禽痘病毒表达载体在兽用重组疫苗中的应用

禽痘病毒表达载体是已构建表达外源基因的病毒载体中的一种，它在表达外源基因上具有明显的优势：(1)它的基因组结构庞大，能耐受较大的外源基因(25～35kb)在其基因组的不同位点插入。(2)严格的胞浆内复制，避免了病毒基因重组入宿主细胞染色体的可能性。且禽痘病毒的宿主范围较窄，仅感染禽类，在哺乳动物体内仅产生一过性感染，安全性较高。(3)表达产物(蛋白质)在翻译后的加工修饰过程与体内极为相似，因此活性高。且保留了相应的抗原性、免疫原性。基于这些特点，使得禽痘病毒载体不仅可作为禽源疫苗，而且还可作为哺乳动物乃至人类的基因工程活载体疫苗，具有广阔的应用前景。     

表达HAV结构基因的重组腺病毒鉴定及细胞病变分析

利用RT-PCR方法,从HAV-L8株的RNA中扩增出结构基因(vp3 vp1),克隆到穿梭质粒pXCX2NotI上。采用磷酸钙-DNA共沉淀技术,将腺病毒载体pJM17与pXCX2-CMV-HAV共转染293细胞。在光学显微镜下观察到明显的细胞病变(CPE);经RT-PCR、免疫荧光染色和蛋白印迹鉴定证明HAV的结构基因已插入到腺病毒基因组中;在电子显微镜下观察发现有二十面体的病毒颗粒。以上结果表明获得了重组腺病毒rAdHAV,纯化后的rAdHAV滴度为1×109.0TCID50/mL。     

以CP23重组蛋白为抗原建立检测微小隐孢子虫抗体间接ELISA方法的研究

摘要：以在E.coli高效表达的微小隐孢子虫子孢子表面抗原CP23为抗原，以辣根过氧化物酶(HRP)标记的山羊抗鼠IgG为二抗，建立了检测微小隐孢子虫抗体的间接ELISA方法。经检测筛选出最佳反应条件为1μg／孔纯化的E.coli表达的CP23抗原包被酶标板，用10％免血清进行封闭，以正常E.coli裂解上清液稀释待检血清。实验表明应用CP23重组蛋白作为诊断C.parvum抗原具有特异性高、抗原易纯化和成本低等特点。     

利用IBV重组N蛋白建立ELISA抗体检测试剂盒的研究

利用表达鸡传染性支气管炎病毒Gray株N蛋白的基因工程重组菌，表达IBV—N蛋白，并利用表达载体上带有组氨酸标记的特点，应用金属螯合填料将其纯化。用纯化的IBV—N蛋白作为包被抗原，成功地建立了一种检测血清中IBV抗体的间接ELISA方法。确定抗原最佳包被浓度为0．58μg／ml；被检血清的最佳稀释度为1：100；酶标二抗的工作浓度为1：1000。确定了血清样品阴、阳性临界0D值为0．14。与IDEXX公司IBV抗体检测试剂盒比较，结果表明自建ELISA试剂盒具有较高的敏感性和特异性。     

新希望六和实现强强联合(1)--刘永好在新希望-六和联合重组新闻通气会上的发言

众所周知，中国是一个农业大国，而农业的发达程度很大程度上是看它在农牧业所占的比重，农牧业所占的比重越大，这个国家农业发展的程度相对就高一些。目前，我国畜牧业占农业的比重还不到50％，有个别的省份已超过50％．农牧业中牧业所占的比重将会越来越大。从粮食的消耗来讲，人均粮食消耗是越来越低，越是发达国家人均粮食消耗越低，肉制品、奶制品的消耗就会越大．这是衡量国家是否发达，人们生活是否好的一个标志，所以说，畜牧业是大农业最重要的一个范畴。     

重组与区域管理将是城区动物防疫管理的主旋律

杭州市为减少农牧生产给城市环境带来的污染，对畜牧产业结构作了强有力的调整，实行杭州市区禁养与限养的规定。2002年老城区与西湖风景区内全面实行禁养，畜牧场与个体农户饲养的家畜一律收购处理。2004年内西湖、拱墅、江干等实行全面禁养。牧场、奶牛场一律外迁；余杭、肖山等区实行限养，并对现有牧场制定污水污物净化处理达标的规定。     

关于国有企业债务重组的探析

从20世纪90年代以来,国有企业的债务困境问题成为制约国有企业改革和发展的一个突出问题。本文通过建立债务重组模式,来讨论如何解决国有企业的债务困境问题。     

水稻稻瘟病抗性基因定位与候选基因辅助选育

本试验研究了304个来源于中156／谷梅2号的重组自交系（RIL）和80个来源于Vandana／Moroberekan的高世代回交群体（BC3B和BC3F4）。在RIL中，利用RFLP，RAPD，SSLP，RGA和候选基因标记定位了一个对菲律宾稻瘟病菌株Ca89（谱系4）的抗性主基因，该基因来源于谷梅2号，暂定名为Pi-26（t），位于第6染色体上的两个RGA标记之间，距离标记RGA24a为4．9cM，距离RGA6a为8．4cM。同时，定位了对浙江稻瘟病菌株92-183的两个抗性基因，其中一个基因来自于中156，     

动物生物工程制剂在猪病防治中的应用

自重组人胰岛素问世以来,基因工程制剂异军突起。目前国内外已研发成功50多个品种,广泛用于癌症、肝炎、糖尿病、发育不良、遗传性疾病以及一些疑难病症的治疗,起到了化学药品难以达到的治疗作用,因为这些生物工程制剂的研发集中体现了现代生物学、医学与药学最先进的科学技术水平。大连三仪动物药品公司针对我国养猪生产中猪病的严重性和复杂性,全力研发了一批生物工程制剂。经过几年临床试验证实,此类产品具有良好的预防与治疗效果,得到广大用户的一致好评。本文就此作一简介,供同仁们参考。1猪用干扰素干扰素(IFN)是机体受病毒或其他干…     

微小牛蜱Bm86基因的克隆及真核表达载体的构建

为了克隆微小牛蜱Bm86基因及构建该基因的表达载体，以微小牛蜱饥饿幼蜱的破解物提取的总RNA为模板，参照已发表的微小牛蜱Bm86基因的核苷酸序列，设计了1对引物，采用RT—PCR技术获得微小牛蜱Bm86基因；将Bm86基因克隆入载体，并进行序列分析，结果证明，克隆的Bm86基因序列与GenBank上登录的Bm86基因序列的同源性达97．4％，而且该序列包含完整的开放阅读框。将该基因克隆入真核表达载体pPIC9K，构建并获得了重组真核表达载体pPIC9K—Bm86。