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目的:研究不同预处理方法对灵芝多糖提取效果的影响。方法:对比浸泡、微波、气流精细粉碎等预处理方式对从灵芝子实体中提取灵芝多糖的影响,并比较最佳预处理方式结合热水提取、醇提取、碱提取、超声波结合酶提取、微波提取等提取方式在灵芝多糖提取方面的效果,最后通过高效液相色谱检测分析气流精细粉碎预处理后提取所得灵芝多糖的性质。结果:最佳预处理方法为气流精细粉碎,对比传统方法直接提取(粗粉碎结合热水提取),粗收率变化较小,而多糖含量提高114%,多糖得率提高104%。最佳结合方式为气流精细粉碎预处理结合碱提取,相对传统方法提取,粗收率提高76%,多糖含量提高78%,多糖得率提高215%。通过高效液相色谱检测分析气流精细粉碎预处理后提取所得灵芝多糖的性质,发现该处理方法对灵芝多糖性质的影响较小。结论和讨论:气流精细粉碎预处理能大幅提高灵芝多糖的提取效果,主要是提高提取物中灵芝多糖的含量,使多糖得率提高,提取更加完全,且对所提取多糖性质的影响较小,推测气流粉碎预处理主要是破坏了灵芝精粉颗粒的机械支撑壁膜结构,使细胞内功效物质的溶出更加完全,这方面内容将在后续开展实验中进行研究分析。 相似文献
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脱氧雪腐镰刀菌烯醇提取、纯化及含量检测 总被引:1,自引:0,他引:1
《中国兽医学报》2017,(9):1771-1777
本试验通过提取和纯化方法的优化,旨在获得高纯度的脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)。首先将禾谷镰刀菌孢子液接种于玉米培养基,于27℃30%湿度的条件下培养25d,收集产毒培养基,制成毒素粗提液。经过层析柱2次洗脱,分段收集洗脱液,用薄层色谱法(TLC)确定含DON的洗脱液,合并洗脱液,运用多重结晶法进行纯化,获得DON的纯品,高效液相色谱法(HPLC)进行分析确认。采用该培养方法,每千克玉米培养基可产生DON 56.65 mg,纯化后可得到DON 29.5mg,纯度达到98.1%;HPLC检测条件为:Waters C18柱(4.6mm×150mm,5μm),流动相为乙腈-水(16∶84),流速0.8mL/min,紫外波长218nm,色谱柱柱温30℃;本方法加标回收率为86.9%~100.6%,日内相对标准偏差≤9.42%,日间相对标准偏差≤5.79%。本试验建立的DON提取与纯化方法简单,不需要任何特殊的试剂与设备,且该检测方法回收率高,准确度和精密度均能满足试验要求,为DON纯品的定量提供了技术支撑。 相似文献
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SSR分子标记已经得到普遍应用,初学者如不能很好地掌握实验操作要点,就难以在较短时间内成功地获得试验结果.本文分别介绍了DNA提取、PCR扩增和电泳检测PCR扩增产物等实验过程中容易被忽视的注意事项,以期为普及SSR分子标记实验技术服务. 相似文献
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赭曲霉毒素A(Ochratoxin A,OTA)普遍存在于谷物等粮食和动物饲料中,是一种可以引起癌症的霉菌毒素。为了快速检测OTA,利用荧光染料PicoGreen识别双链DNA原理,建立了一种基于核酸适体与PicoGreen检测毒素OTA的方法。在10 mmol/L Tris,120 mmol/L Na Cl,5 mmol/L KCl,20 mmol/L CaCl2(pH8.5)缓冲液中,PicoGreen与双链DNA结合后,释放的荧光在3 min内达到峰值(激发波长为480 nm,发射波长为520 nm)。从加样到荧光检测,整个流程可在40 min内完成。检测OTA的灵敏度为1μg/L;检测范围为1μg/L~200μg/L。特异性实验表明:OTA核酸适体-Pico Green方法与黄曲霉毒素B1、伏马毒素B1、桔毒素和玉米赤霉烯酮等霉菌毒素无交叉反应。本方法在检测敏感性和特异性方面与传统抗体ELISA方法相当(Kappa值为:0.857)。由于核酸适体成本比抗体低,因此本方法比抗体ELISA方法更具实用价值。 相似文献