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21.
马立克氏病病毒囊膜糖蛋白B抗原Ⅰ型特异性和群共同性决定簇的单克隆抗体 总被引:3,自引:1,他引:2
用能表达马立克氏病病毒(MDV)糖蛋白B(gB)的重组杆状病毒感染的Sf9细胞免疫小鼠,制备针对MDVgB的单克隆抗体。以Ⅰ型马立克氏病病毒GA株感染的鸡胚成纤维细胞作为检测抗原,同时以免疫荧光试验(IFA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)来筛选杂交瘤细胞,结果获得了IFA和ELISA均为阳性的2株单克隆抗体细胞株,定名为BA4和BD8。在IFA和免疫沉淀试验中,单抗BD8与Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型MDV均呈阳性反应;单抗BA4只对Ⅰ型MDV(包括CVI988疫苗株)呈阳性反应。免疫沉淀反应进一步确证2株单抗识别的是MDV糖蛋白B抗原。 相似文献
22.
重组逆转录病毒载体的包装 总被引:1,自引:1,他引:0
将3.7kb的LacZ基因片段克隆到含标志基因Neo的逆转录病毒载体,pLXSN与pLNCX的多克隆位点,构建了含有LacZ基因的重组逆转录病毒载体pLLSN和pLNCL.在测定了G418对饥装细胞系PA317的最小致剂量后(最小致死剂量为0.3g/L),通过脂质体Lipofectin与磷酸钙2种介质,分别将2种重组逆转录病毒载体导入包装细胞系PA317进行包装,并以0.3g/L,的G418进行筛选,得到多个G418抗性克隆,经扩大培养,传代,分别得到包装pLLSN与pLNCL的2株阳性细胞,电镜下可见阳性细胞的培养上清中具有逆转录病毒形态特征的成熟病毒粒子,本0研究为运用逆转录病毒载体系统,解决转角因效率低的问题奠定了基础。 相似文献
23.
禽痘病毒表达载体是已构建表达外源基因的病毒载体中的一种,它在表达外源基因上具有明显的优势:(1)它的基因组结构庞大,能耐受较大的外源基因(25~35kb)在其基因组的不同位点插入。(2)严格的胞浆内复制,避免了病毒基因重组入宿主细胞染色体的可能性。且禽痘病毒的宿主范围较窄,仅感染禽类,在哺乳动物体内仅产生一过性感染,安全性较高。(3)表达产物(蛋白质)在翻译后的加工修饰过程与体内极为相似,因此活性高。且保留了相应的抗原性、免疫原性。基于这些特点,使得禽痘病毒载体不仅可作为禽源疫苗,而且还可作为哺乳动物乃至人类的基因工程活载体疫苗,具有广阔的应用前景。 相似文献
24.
表达HAV结构基因的重组腺病毒鉴定及细胞病变分析 总被引:1,自引:0,他引:1
利用RT-PCR方法,从HAV-L8株的RNA中扩增出结构基因(vp3 vp1),克隆到穿梭质粒pXCX2NotI上。采用磷酸钙-DNA共沉淀技术,将腺病毒载体pJM17与pXCX2-CMV-HAV共转染293细胞。在光学显微镜下观察到明显的细胞病变(CPE);经RT-PCR、免疫荧光染色和蛋白印迹鉴定证明HAV的结构基因已插入到腺病毒基因组中;在电子显微镜下观察发现有二十面体的病毒颗粒。以上结果表明获得了重组腺病毒rAdHAV,纯化后的rAdHAV滴度为1×109.0TCID50/mL。 相似文献
25.
以CP23重组蛋白为抗原建立检测微小隐孢子虫抗体间接ELISA方法的研究 总被引:3,自引:0,他引:3
摘要:以在E.coli高效表达的微小隐孢子虫子孢子表面抗原CP23为抗原,以辣根过氧化物酶(HRP)标记的山羊抗鼠IgG为二抗,建立了检测微小隐孢子虫抗体的间接ELISA方法。经检测筛选出最佳反应条件为1μg/孔纯化的E.coli表达的CP23抗原包被酶标板,用10%免血清进行封闭,以正常E.coli裂解上清液稀释待检血清。实验表明应用CP23重组蛋白作为诊断C.parvum抗原具有特异性高、抗原易纯化和成本低等特点。 相似文献
26.
利用IBV重组N蛋白建立ELISA抗体检测试剂盒的研究 总被引:3,自引:0,他引:3
利用表达鸡传染性支气管炎病毒Gray株N蛋白的基因工程重组菌,表达IBV—N蛋白,并利用表达载体上带有组氨酸标记的特点,应用金属螯合填料将其纯化。用纯化的IBV—N蛋白作为包被抗原,成功地建立了一种检测血清中IBV抗体的间接ELISA方法。确定抗原最佳包被浓度为0.58μg/ml;被检血清的最佳稀释度为1:100;酶标二抗的工作浓度为1:1000。确定了血清样品阴、阳性临界0D值为0.14。与IDEXX公司IBV抗体检测试剂盒比较,结果表明自建ELISA试剂盒具有较高的敏感性和特异性。 相似文献
27.
28.
29.
细菌耐药拮抗剂的研究 总被引:6,自引:1,他引:5
本文介绍了具有拮抗细菌耐药性作用的物质的研究进展情况,包括灭活酶抑制剂、药物渗透促进剂、外输泵抑制剂、细菌生物被膜抑制剂、抗菌药物增强剂、耐药质粒消除剂等。 相似文献
30.
杭州市为减少农牧生产给城市环境带来的污染,对畜牧产业结构作了强有力的调整,实行杭州市区禁养与限养的规定。2002年老城区与西湖风景区内全面实行禁养,畜牧场与个体农户饲养的家畜一律收购处理。2004年内西湖、拱墅、江干等实行全面禁养。牧场、奶牛场一律外迁;余杭、肖山等区实行限养,并对现有牧场制定污水污物净化处理达标的规定。 相似文献