家蚕脂围蛋白(PLIN)基因的序列分析及表达与亚细胞定位研究

脂围蛋白(perilipin)与脂肪细胞脂类代谢的调节有关。从家蚕蛹cDNA文库中筛选到一条cDNA开放阅读框(ORF)序列长度为918 bp的基因,预测其编码305个氨基酸残基,蛋白分子质量约32.5 kD。经NCBI比对发现该蛋白具有部分脂围蛋白的保守结构域,因此将该ORF序列命名为BmPLIN基因。将该基因插入到载体pET-28a(+)的多克隆位点,构建重组表达质粒pET-28a(+)-BmPLIN,并转化大肠杆菌中进行原核表达得到带有His标签的融合蛋白,表达的融合蛋白以包涵体形式存在。用纯化后的融合蛋白为抗原免疫大白兔获得多克隆抗体,ELISA间接法测定抗体的效价达到1∶12 800以上。通过荧光定量PCR和Western blotting技术对BmPLIN基因及其编码蛋白在家蚕5龄幼虫各个组织器官中的转录、表达水平进行分析的结果是:BmPLIN基因mRNA在家蚕5龄幼虫各组织器官中的转录水平由高到低依次为生殖腺(卵巢和睾丸)、脂肪体、肠、表皮、头部、马氏管、丝腺、气门,在家蚕5龄幼虫的生殖腺(卵巢和睾丸)中有明显的BmPLIN蛋白特异条带。以家蚕Bm5细胞进行免疫细胞实验的结果显示,BmPLIN蛋白在细胞质和细胞核中均有分布。     

小麦TaSIM蛋白的原核表达与纯化及Western blotting检测

为了获得TaSIM(Salinity-induced R2R3-MYB)基因的纯化蛋白,以便研究TaSIM转录因子的DNA结合特异性。本研究以含有pET28a-TaSIM原核表达载体的大肠杆菌BL21为材料,用0.5 mmol/L IPTG,在37℃诱导TaSIM融合蛋白表达2 h,收集上清液,采用Ni-NTA柱纯化含有His标签的TaSIM融合蛋白,SDS-PAGE电泳检测结果表明获得了分子量大小约为33 kD的TaSIM融合蛋白。采用Western blotting检测TaSIM融合蛋白的表达,以鼠抗血清和辣根过氧化酶标记的山羊抗小鼠Ig G为抗体,结果表明TaSIM融合蛋白能够和抗体特异结合,说明诱导的蛋白是TaSIM融合蛋白。研究结果为进一步利用凝胶阻滞方法检验TaSIM蛋白与顺式作用元件的结合提供实验基础。     

燕麦β-葡聚糖的提取纯化功能性及应用的研究展望

燕麦是我国重要农作物之一。它含有的β-葡聚糖,具有清肠,降胆固醇,调节血糖,提高免疫力等特殊生理功能,是一种非常理想的保健产品。综述了燕麦葡聚糖的提取纯化、功能性以及应用。     

金鱼藻对富营养化水体营养源的净化作用

通过实验室静态培养试验,以金鱼藻(Ceratophyllum demersum L.)对富营养化水体营养源的吸收和水质净化效果进行了研究。结果表明:①金鱼藻能迅速有效地增加水体中溶解氧(DO),增长率达49.71%;pH随时间变化呈现先升高后回落的过程,其变化与生物量存在一定线性关系;②金鱼藻对水样的TN、TP、COD、Chl-a去除率分别为90.01%、35.13%、72.67%、99.82%,水质由中富营养型(Meso-eutrophic,MT)向贫营养型(Olig-eutrophic,OT)转变;③通过SPSS软件分析,指标间的皮尔森相关性高度显著,两两线性相关系数介于0.934～0.983,表明金鱼藻对水质净化效果具有同一性。     

人工强化生态滤床对北方生活污水净化效果的研究

人工强化生态滤床是根据接触氧化滤池及人工湿地净化机理耦合建立的一种创新型污水处理技术。通过试验室装置小试,考察了跌水曝气复氧、滤料种类、滤料堵塞等因素对人工生态滤床运行效果的影响。结果表明,跌水曝气复氧预处理效果明显,能够满足人工强化生态滤床复氧量要求;通过对火山滤料和砾石滤料净化效果分析可知,火山滤料出水水质明显优于砾石滤料出水水质。人工强化生态滤床技术在北方污水处理方面具有运行费用低,出水水质好等优点,具有很好的推广价值。     

浮筏种植水花生对养殖废水的净水效果

[目的]了解浮筏种植水花生对养殖废水的净水效果。[方法]将水花生种植于浮筏上,直接置于盛有养殖废水的水池中,在种植前和种植期间分别测定废水的水温、透明度、化学需氧量、pH、氨态氮、总氮及总磷。[结果]浮筏种植水花生具有较高的净水效率,试验池的透明度上升62.1%(P0.05),化学需氧量下降50.6%(P0.05),氨态氮下降48.1%(P0.05),总磷和总氮分别下降57.9%(P0.05)和68.3%(P0.05)。[结论]浮筏种植水花生可用于养殖废水的净化。     

从甜叶菊叶片中分离纯化抗氧化内生真菌

[目的]从甜叶菊叶片中分离纯化抗氧化内生真菌。[方法]以甜叶菊叶片为材料,从中分离纯化出内生真菌,对它们进行了液体培养,检测其发酵上清液的总抗氧化性能、清除DPPH自由基和抑制化学发光的能力。[结果]共分离获得42株内生真菌,编号为F01-F42。总抗氧化最强的为F41;清除DPPH能力最强的为F37;综合比较总抗氧化性能和清除DPPH能力,F02、F07、F20、F25、F37、F41 6株较突出。利用流动注射化学发光法对这6株发酵液进行检测,化学发光抑制率均大于70%,验证了它们的抗氧化性能较突出;对这6株进行了初步形态鉴定,它们的菌落颜色为白色或淡黄色,F02菌丝有隔膜,其他没有。[结论]筛选出高抗氧化活性的真菌,为将来的抗氧化研究奠定了基础。     

立体式人工湿地处理微污染源水的应用与研究

[方法]探讨立体式人工湿地在微污染源水体处理中的应用。[方法]提出了一种立体式人工湿地模式,重点分析了运用该模式的嘉兴石臼漾水厂引水河道新塍塘的水质生态净化中试工程,并从水质水量、季节气候、物种配置以及管理维护4个方面,探讨了该项技术净化水质的影响因素。[结果]在夏秋两季,3种不同水力负荷的工况下,中试工程能够改善水体透明度及溶氧环境,有效降低了微污染源水中的SS、CODCr、NH3-N、TN、TP等水质指标,出水基本能稳定达到地表水III类标准。[结论]该立体式人工湿地对微污染源水的净化处理是可行的,具有极其广阔的应用价值与推广前景。     

茶树良种信阳10号提纯复壮技术

茶树良种是茶产业可持续发展的前提和基础,信阳10号作为信阳茶区唯一的国审茶树品种,栽培面积一直没有达到其应有的规模,结合信阳茶产业生产实际对信阳10号扦插繁殖技术加以总结。     

硫酸铵浓度对疏水作用层析纯化重组乙肝表面抗原的影响

以表面抗原活性收率和纯度为考察指标,转化乙肝病毒preS2-S基因重组酵母株,经甘油培养基充分增殖,转移到甲醇培养基中诱导表达.破碎细胞收集细胞原液,离心15000 r·min-1除去细胞碎片,超滤浓缩.结果表明,硫酸铵0.12、0.16 mol·L-1时盐浓度低,HBsAg未结合到疏水介质上;硫酸铵0.24 mol·L-1时疏水性强, HBsAg不宜从介质上洗脱.表明0.20 mol·L-1硫酸铵更适合重组HBsAg纯化.