噬菌体对致病性耐药大肠杆菌的裂解试验

大肠杆菌是引发肠道疾病的一种主要致病菌,常引起犊牛、羔羊痢、仔猪痢和猪水肿病等,严重威胁动物健康,阻碍了畜牧业的发展,每年造成数以亿计经济损失。治疗该病的常规方法是使用各种抗生素,但随着大量耐药菌株的出现,治疗效果已不够理想。据报道目前许多国家25%的肺炎链球菌已     

鸡缩胆囊素(CCK)在T4噬菌体表面的展示及免疫原性研究

采用T4噬菌体表面展示系统，将CCK-33肽四多串联体及八多串联体展示在T4噬菌体表面，并研究其免疫原性。将CCK四串联体和八串联体与SOC基因缺失的、依赖溶菌酶的噬菌体ФT4-Z1重组，获得重组噬菌体CT-4CCK和西T-8CCK。SDS-PAGE和Western Blot检测结果表明，CCK多串联体蛋白已经成功展示在T4噬菌体表面，其融合蛋白分子量约30ku和41ku，能够与CCK标准阳性血清发生特异性反应。以重组噬菌体为免疫原制备油佐剂疫苗主动免疫胡须肉鸡后，抗体浓度显著升高，肉鸡的体重、采食量都有所提高，而料肉比有所下降。结果说明，鸡CCK蛋白展示在T4噬菌体表面具有良好的免疫原性。     

噬菌体抗体库技术研究进展

噬菌体抗体库技术是利用PCR扩增出抗体的全套可变区基因,将抗体分子DNA片断如Fab或单链抗体(ScFv)与噬菌体外壳蛋白基因PⅢ或PVⅢ连接,使融合蛋白表达于噬菌体颗粒的表面,经过“吸附-洗脱-扩增”过程富集筛选特异性抗体。这一技术将抗体基因型和表型联系在一起,使识别抗原的能力和噬菌体的可扩增性统一起来,较好的模拟了体内的抗体产生的过程,成为一种高效的筛选体系。本文就噬菌体抗体库技术的原理、构建、筛选及其应用研究进展做一综述。     

噬菌体展示技术及其应用研究进展

噬菌体展示技术（Phage Dlsplay techniques，PDT）起源于1985年，是一种用于筛选和改造功能性多肽、蛋白质强有力的生物技术，广泛应用于研究蛋白质的结构与功能，蛋白质间的识别与作用，分离体内特异蛋白质与基因以及实验进化等多个分子生物学领域。目前噬菌体展示技术的研究进展非常迅速，在抗原决定簇的定位、蛋白质相互作用位点的确定、特异调节分子的分离和人工抗体和疫苗的制备、诊断技术、酶抑制剂的研究开发、多肽药物的研制等生物技术研究的不同领域得到了应用，并对这些领域产生了深远的影响。     

噬菌体生物扩增法检测犬结核病

2006年4月12日,四川省崇州市张某将两只贵宾犬(价值80余万元)送四川农业大学兽医院就诊。病犬在成都某宠物医院按照肺炎医治16天,但效果不佳,且症状加剧。在我院经实验室检测,最后确诊为犬结核病。其中一条犬因病情严重,来我     

苏云金杆菌发酵中环境温湿度对噬菌体污染影响的研究

苏云金杆菌发酵中常常受到噬菌体的严重威胁。作者从１９８６～１９９４年进行了Ｂｔ发酵中噬菌体污染与环境温湿度关系的研究。结果表明,９年平均倒罐率为０．６９％,３、４、５、６、１１月份倒罐率分别为０．７４％、１．０６％、３．２４％、０．３８％和０．３９％。５月份平均温度偏高,平均相对湿度大,有利于噬菌体的增殖,是防治噬菌体污染的关键月份。在研究中发现,环境中的ＴＰ－４型噬菌体检出率高,对发酵生产的威胁最大。     

出血性大肠杆菌噬菌体933W的分离鉴定

出血性大肠杆菌(EHEC) O157主要引起感染人的腹泻、出血性结肠炎或尿路感染综合症[1].本试验于2010年9～11月份,使用国际标准菌株EHECO157:H7 EDL933,将编码Stx2的噬菌体933W从细菌染色体上分离出来,并对其增殖和保存特性进行研究,以保持培养噬菌体933W具有较高的感染性和活力,为进一步进行该噬菌体研究和开发噬菌体生物制剂奠定基础.     

干酷直投发酵剂的研究进展

干酪直投发酵剂是国内生产干酪的重要原料，完全来自进口。本文介绍了干酪发酵剂的作用、分类、干酪直投发酵剂的优势和发展历史，重点介绍了干酪直投发酵剂的研究进展，包括干酪菌种的筛选、乳酸菌增殖培养技术、分离技术、冻干保护技术、防止噬菌体污染和冻干菌种的复配原则，为开展国内干酪直投发酵剂的研究提供资料。     

东方田鼠肝脏裂解物筛选日本血吸虫成虫噬菌体展示cDNA文库

东方田鼠对血吸虫具有天然抗性。为寻找东方田鼠抗血吸虫抗性相关靶基因，探索其分子机理，我们将日本血吸虫童虫与东方田鼠不同组织／器官裂解物共培养，比较它们对血吸虫童虫的杀伤效果，之后，以杀伤效果较好的肝脏裂解物为探针，以亲和淘洗方法筛选日本血吸虫成虫（44d）噬菌体展示cDNA文库。经三轮筛选后，随机挑取92个噬菌体克隆进行序列测定及生物信息学分析，获得了19个有效EST序列，其中15条EST序列与已知基因或表达序列标签同源，4个EST序列与已知基因或表达序列标签均无同源性，为新的表达序列标签。对19个有效EST编码蛋白的功能预测结果显示，其中6个为卵壳蛋白（Eggshell protein）相关基因，10个EST及其编码蛋白的功能与血吸虫基因表达调控及蛋白质加工修饰相关。研究结果提示，东方田鼠直接或间接地影响血吸虫基因表达，进而影响血吸虫的发育，可能是东方田鼠具有抗血吸虫特性的一个重要分子机理。     

高效电转化技术在噬菌体抗体库构建中的应用

大肠杆菌的高效电转化技术是构建大容量噬菌体抗体库的关键技术，为了制备高转化效率的大肠杆菌TGI感受态细胞，采用电转化方法探索该菌在对数生长期的不同生长阶段、细胞浓度、噬菌粒DNA含量、电场强度对电转化效率的影响。实验结果表明，在菌株处于对数生长期的0D600值为0．5时，收集细胞制备感受态，感受态细胞浓度为4．0×10m细胞／mL，噬菌粒pCANTAB—ScFvAFBI浓度为100pg/μL，电场强度为20kV／cm，此时制备的大肠杆菌TGI感受态细胞的电转化效率可达2．13×10，cfu／μg DNA。研究结果表明，利用本实验确定的参数，可以制备出大肠杆菌TGI高效电转化感受态细胞，为大容量噬菌体抗体库的构建奠定了坚实的基础。