6个多年生黑麦草品种酯酶和过氧化物同功酶比较研究

选取6个多年生黑麦草品种,利用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对它们的根和茎叶的酯酶及过氧化物同功酶进行了测定,将酶谱数量化,应用SPSS统计软件求出各品种间的遗传相异度,并进行了聚类分析。结果表明:(1)本研究中的4个同功酶图谱皆有多态性,可以鉴别供试的6个品种;(2)供试品种之间的Jaccard相异系数在0.3到0.9091之间。若以Jaccard相异系数0.50为阈值,可以将供试品种分为3群:雅晴和匹克为一群,凯琳特、顶峰和明星为一群,首相单独为一群;(3)Jac-card相异系数最低的为雅晴和匹克两个品种以及顶峰和明星两个品种,均为0.30,亲缘关系最近。而首相与其它品种亲缘关系最远。     

栗蚕幼虫酯酶同工酶酶谱多态性及应用于品种间亲缘关系的分析

栗蚕是珍稀的野蚕资源。采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法,测定栗蚕幼虫不同发育时期、不同组织器官的酯酶同工酶酶谱,并依据酯酶同工酶酶谱的多态性分析纯黑、纯绿2个品种的亲缘关系。检测结果表明:栗蚕幼虫中肠的酯酶同工酶活性和酶带数随龄期而增加,且同一龄期以盛食期的酶表达量最高;幼虫中肠及脂肪体中的酯酶同工酶活性较强,并且酶带数较多;2个供试品种间的酯酶同工酶酶谱明显不同。根据酶谱差异分析2个品种的遗传相似系数为0.86,表现出较近的亲缘关系。研究结果提示:栗蚕幼虫酯酶同工酶的酶活性和酶带数与生长发育和组织功能有关,幼虫酯酶同工酶酶谱可以作为分析品种间亲缘关系的依据之一。     

油菜花药中酯酶和柱头中角质酶的提纯

油菜授粉时期花粉药和柱头总蛋白质提取液经ＳＤＳ聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,花药中酯酶用α－乙酸蔡酯和β－乙酸萘酯染色,柱头中角度质酶用４－Ｍｅｔｈｙｌｕｍｂｅｌｌｉｆｅｒｕｌ ｂｕｔｙｒａｔｅ染色。切下的酶带纯化后,经ＳＤＳ聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,酯酶分子量约为３１ＫＤ,角质酶分子量约为３７ＫＤ。     

山东省35个黑灰色平菇菌株的酯酶同工酶分析

对山东省大规模栽培的35个平菇商业菌株运用酯酶同工酶电泳技术进行分析。结果表明,35个菌株有30个酶谱类型,不同菌株有各自特有的酯酶同工酶酶谱。聚类分析表明,供试菌株在70%相似水平上分为4大类:第一类包括以黑丰268为代表的8个菌株;第二类包括以2002-4为代表的4个菌株;第三类包括以超级99为代表的7个菌株;第四类包括以庆丰518为代表的16个菌株,多为杂交菌株。     

Expression of esterase gene in yeast for organophosphates biodegradation

Organophosphates are esters of phosphoric acid and can be hydrolyzed and detoxified by carboxylesterase and phosphotriesterase. In this work esterase enzyme (Est5S) was expressed in yeast to demonstrate the organophosphorus hydrolytic activity from a metagenomic library of cow rumen bacteria. The esterase gene (est5S) is 1098 bp in length, encoding a protein of 366 amino acid residues with a molecular weight of 40 kDa. Est5S enzyme was successfully produced by Pichia pastoris at a high expression level of approximately 4.0 g L⁻¹. With p-nitrophenol butyrate as the substrate, the optimal temperature and pH for enzyme activity were determined to be 40 °C and pH 7.0, respectively. The esterase enzyme was tested for degradation of chlorpyrifos (CP). TLC results obtained inferred that CP could be degraded by esterase enzyme (Est5S) and HPLC results revealed that CP could be efficiently degraded up to 100 ppm. Cadusafos (CS), coumaphos (CM), diazinon (DZ) dyfonate (DF), ethoprophos (EP), fenamiphos (FM), methylparathion (MPT), and parathion (PT) were also degraded up to 68, 60, 80, 40, 45, 60, 95, and 100%, respectively, when used as a substrate with Est5S protein. The results highlight the potential use of this enzyme in the cleanup of contaminated insecticides.     

果蔗不同器官在不同生育期的同工酶聚类相关分析

为了解过氧化物酶(POD)和酯酶(EST)同工酶在果蔗生长中的变化规律,本研究选择不同的取样时期和植株不同器官,对8个果蔗品种利用垂直平板聚丙烯酰胺电泳得出的叶片、根组织不同生育时期POD、EST同工酶酶谱进行聚类分析,并检测其相关性。结果表明：（1）不同品种间同工酶谱的遗传相似系数存在差异,特别是外引黑皮果蔗(Badila)与中国地方品种之间存在着一定的遗传差异;（2）不同生育时期叶片或根部的POD同工酶和EST同工酶酶谱的聚类图都存在着差异;（3）叶片中的POD、EST酶谱在各个生育时期均达到极显著相关。说明叶片是这两种酶基因表达的最重要活性部位,因此叶片可以作为同工酶分析较为稳定和适宜的采样部位。     

侧柏毒蛾幼虫酯酶对马桑毒素及4种杀虫剂的应激性反应

在比较马桑毒素及４种杀虫剂对虫体内酯酶活力影响的基础上,分析了酯酶应激性反应的异同性。结果表明,马桑毒素Ｂ及４种药剂处理后试虫酯酶相对活力发生了显著变化。其酯酶基因的表达有３种类型,即稳定型、应激型和可抑型。同工酶谱分布频率、相似系数Ｒｉｊ、聚类分析及基因表达率分析结果表明,马桑毒素Ｂ与其它４种药剂处理间的相关性较小,但处理１２ｈ后马桑毒素Ｂ与捕杀特的Ｒｉｊ值为０．８７６４,即由马桑毒素Ｂ所引起的     

家蚕杂种优势与血液酯酶同工酶谱的分析

采用垂直不连续聚丙烯酰胺凝胶薄层电泳（ＰＡＧＥ）,对家蚕血液酯酶同工酶进行了大量的调查。结果表明,双亲酶谱的差异越大,其杂种出现互补酶带和杂种酶带的机会越多,此类杂种人有较强杂种优势的可能性也较大。因此,应用ＰＡＧＥ进行家蚕血液酯酶同工酶谱的分析,作为筛选家蚕家优势较强的组合亲本和早期预测杂种优势,对缩短家蚕育种周期起着重要的作用。     

秋水仙素处理对益母草种子生理生化的影响

研究了秋水仙素处理对益母草种子生物生化变化的影响。方法：以益母草种子为材料，观察了不同程度秋水仙素处理后，酯酶同工酶、过氧化物酶同工酶、发芽、生长情况等的变化。结果：与对照相比，发现各种程度秋水仙素处理的益母草种子，过氧化物酶同工酶带无明显变化；用0．05％－0．5％浓度秋水仙素分别处理益母草种子，酯酶同工酶谱带有增多的现象；并且用不同浓度秋水仙素处理12h后，发现用0．2％浓度处理的种子生长较好。结论：说明一定程度秋水仙素处理就改变益母草种子中酶数量；用0．2％浓度的秋水仙素处理最有利于提高益母草的产量。     

宁夏贺兰山农牧场黄瓜根结线虫种类鉴定

利用传统的比较形态学及新兴的同工酶电泳方法,对宁夏贺兰山农牧场9个样点,共45 个病根中的线虫进行了种类鉴定.结果表明:引起贺兰山农牧场黄瓜根结线虫病的病原线虫主要是南方根结线虫 Meloidogyne incognita,该种数量占样品总量的97%以上,其它种类尚未发现.