新城疫病毒受体在不同动物细胞上的分布比较

细胞表面的SAα2,3Gal和SAα2,6Gal2种糖链可以作为新城疫病毒(NDV)入侵靶细胞的受体,但这2种糖链在不同动物细胞上的分布和相对丰度存在差异,为明确不同动物细胞上NDV受体的分布和相对含量,分别对鸡胚成纤维细胞、鹅胚成纤维细胞、鸭胚成纤维细胞以及Vero细胞,使用糖链检测试剂盒进行凝集素细胞原位免疫组织化学检测,FITC/PI双染色后激光共聚焦显微镜观察比较不同禽类细胞上受体分布。结果表明鸡胚成纤维细胞和Vero细胞表面同时分布有SAα2,3Gal和SAα2,6Gal2种受体,而鹅胚成纤维细胞、鸭胚成纤维细胞表面则只分布有SAα2,3Gal受体,缺乏SAα2,6Gal受体,提示NDV受体在不同禽类细胞表面的分布存在种属差异性。     

GPR54基因在绵羊不同组织中的表达及其在睾丸中的定位研究

试验旨在研究GPR54(G-protein coupled receptor 54)基因在绵羊不同组织中的表达及其在4~6月龄公羔睾丸组织中的表达特性及定位。本研究采用实时荧光定量PCR法检测各组织GPR54 mRNA表达规律,以及其在不同月龄公羔睾丸中的表达量,运用免疫组化技术对睾丸中GPR54基因进行定位分析。结果显示,GPR54在不同组织中均有不同程度的表达,其中在下丘脑、垂体和睾丸中大量表达;GPR54在4~6月龄绵羊公羔睾丸组织中呈阶段性表达,6月龄表达量显著高于4和5月龄(P<0.05);4月龄时,在精原细胞和极少数的初级精母细胞中检测到较弱的阳性信号;6月龄性成熟时,在睾丸中分裂早期的精子细胞检测到强阳性信号。综上表明,GPR54基因在绵羊不同组织中广泛表达,在下丘脑-垂体-睾丸生殖轴中发挥重要的作用,并与动物的性成熟及雄性动物精子发生过程有密切的关系。     

免疫组织化学法定位猪肾脏中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的研究

脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)是目前全球污染谷物最严重的真菌毒素之一。在所有的易感动物中,以猪最为敏感。该研究采用DON标准品,通过静脉注射的途径,研究该毒素在猪体内肾脏的分布情况,为毒素的残留提供依据。选用10头健康阉公猪,随机分为2组,一组经乳静脉注射DON,注射剂量为75μg/kg体质量,另一组经乳静脉注射生理盐水。注射完成后开始计时,并观察记录猪的反应情况,待30min后放血宰杀,并迅速取肾脏,采用免疫组化法定位肾脏中DON的分布情况。研究结果显示,染毒剂量75μg/kg体质量组,静注后约5～10min开始出现明显的异常反应。具体表现为:狂躁不安,不停的磨牙,咀嚼,之后大量流涎,随之出现呕吐等症状,这一过程的持续时间对该组猪来说存在个体差异。免疫组化法定位结果显示,在肾小囊的壁层见有DON的分布。     

BXSB小鼠肾组织NF-ΚB的表达及意义

目的：了解NF-κB在BXSB狼疮性肾炎小鼠肾组织中的表达及意义。方法：取BXSB狼疮性肾炎小鼠（即LN组）与C57BL／6小鼠（即对照组）各10只．应用免疫组织化学SP法检测肾组织中NF-κB的表达．并与病理学指标行等级相关分析。结果：LN组小鼠肾组织中NF-κB表达较对照组显著增高（P〈0．05）;NF-κB在肾小球和肾小管均有表达．但以肾小管表达更为显著;肾小球NF-κB阳性细胞数、NF-κB阳性肾小管数与肾组织活动指数呈高度正相关。结论：NF-κB可能参与了LN小鼠的发病机制．检测其在肾组织中的表达可作为反映狼疮肾组织活动病变的参考指标之一。     

犬恶丝虫核苷二磷酸激酶(NDPK)基因的原核表达及其免疫荧光定位

对犬恶丝虫核苷二磷酸激酶(NDPK)基因的基本特征进行探究,并评估其诊断价值,旨在为犬恶丝虫病的诊断提供依据。本研究原核表达了Di-NDPK,通过生物信息学、免疫印迹和免疫荧光组化分析了该蛋白的基本特征,通过检测犬恶丝虫阳性血清评估了rDi-NDPK的诊断价值。免疫印迹显示,Di-NDPK具有良好的反应原性,免疫荧光组化显示,Di-NDPK在犬恶丝虫的侧索及肠上皮细胞和肠腔中分布。间接ELISA显示,该方法的敏感性为66.7%(16/24),特异性为38.9%(14/36),其中与犬细粒棘球蚴病阳性血清、犬钩虫病阳性血清以及犬弓首蛔虫病阳性血清发生交叉反应。Di-NDPK是一个分泌蛋白,但不适合作为犬恶丝虫病的诊断候选抗原。     

仔猪空肠组胺免疫组织化学法研究

为研究仔猪肠道组胺免疫组织化学固定液、染色条件及组胺在仔猪空肠的分布情况,将5头三元杂交仔猪屠宰后,取其空肠,Carnoy氏液或4%多聚甲醛磷酸缓冲液固定,进行抗原修复及一抗作用条件的免疫组织化学方法学研究。通过显微测微技术测定空肠各层组胺阳性细胞的分布。结果发现,Carnoy氏液是肠道组胺免疫组织化学的良好固定液;柠檬酸缓冲溶液(pH7.2)100℃抗原修复3 h及一抗4℃孵育12 h是空肠组胺免疫组化的良好条件;黏膜及黏膜下层组胺阳性细胞数极显著地高于浆膜(P<0.01)。     

An immunohistochemical study on endocrine cells in the neuroendocrine system of the digestive tract of milkfish Chanos chanos (Forsskal, 1775)

In this study, several kinds of endocrine cells which produce neuropeptides and hormones have been identified and located in the digestive tract of milkfish (Chanos chanos) by the immunohistochemical technique. The oesophagus, stomach (cardiacus, fundic and pyloric regions), pyloric caeca, intestine (anterior, middle and posterior regions) and rectum were divided from the digestive tract of milkfish. The distribution and frequency of the endocrine cells produced these neuropeptides and hormones including gastrin, cholecystokinin, leu‐enkephalin, neuropeptide Y and somatostatin were described in these segments. Endocrine cells containing all neuropeptides and hormones immunoreactivities were present in the anterior intestine region, but no reaction was found in oesophagus. Only a few L‐ENK‐ and SST‐immunoreactive cells were detected in the pyloric caeca. Large numbers of SST‐immunoreactive cells were observed in the stomach with no immunoreactivities to other neuropeptides and hormones. Two different types of endocrine cells were founded in the intestine and pyloric caeca. These results indicate that the anterior intestine region may be the main region of food digestion and absorption, and the neuropeptides and hormones regulate the food intake process by different ways in milkfish.     

皮肤角质形成细胞肿瘤中PCNA的表达及其与肿瘤转移的关系

目的：探讨皮肤角质形成细胞肿瘤中增殖细胞核抗原(PCNA)的表达及其与肿瘤转移的关系。方法：用ADC免疫组化技术观察48例皮肤鳞状细胞癌(SCC)、41例基底细胞癌(BCC)及15例角化棘皮瘤(KA)手术切除标本。结果：PCNA在SCC中的表达明显高于DCC及KA(P＜0．01)。但其在BCC与KA中的表达差异无显著性(P＞0．05)。PCNA在低分化SCC中的表达明显高于高分化者(P＜O．01)。但其表达在淋巴结转移组与无转移组之间的差异无显著性(P＞0．05)。结论：PCNA在SCC、DCC及KA中的表达差异有非常显著性：其表达与SCC的分化程度有关。但与淋巴结转移似无关。     

犬瘟热病毒间接免疫酶组化检测方法的建立

为对犬瘟热病毒(CDV)进行组织定位检查,本实验利用犬瘟热抗CDV单克隆抗体(MAb),采用间接免疫酶组化法对6只人工感染的比格犬肠组织的病毒抗原进行定位检测。结果表明,利用犬瘟热抗CDV MAb建立的间接免疫酶组化方法具有较高的特异性和灵敏性,可原位检测病犬肠组织中CDV抗原的分布,其抗原的阳性表达主要在小肠绒毛和李氏隐窝的上皮细胞胞浆内,表明CDV主要侵害小肠的粘膜上皮组织。     

An automated anion-exchange chromatographic procedure for the estimation of saccharides in acid hydrolysates of soil

It is well known that the major neutral monosaccharide components released from soil by acid hydrolysis are glucose, galactose, mannose, arabinose, xylose, ribose, rhamnose and fucose. A colorimetric determination of the saccharide mixture released from soil is unsatisfactory for determining an accurate figure for soil saccharides. More precise information can be obtained by the determination of monosaccharides after separation by chromatography. Paper and thin-layer chromatography for quantitative analysis are rather time consuming and laborious. The gas chromatographic procedure was applied successfully for the analysis of sugars in soil hydrolysates by OADES et at. (7). Preparation of the various derivatives for gas chromatography still requires many steps, much handling of the sample, and considerable time, although final analysis of the product derivative is accomplished in an hour or two.