蛹虫草与黄伞复合多糖抗氧化活性研究

[目的]研究蛹虫草与黄伞复合多糖的抗氧化活性。[方法]采用超声提取法分别提取蛹虫草多糖和黄伞多糖,并将二者按不同比例复合后,在不同浓度下进行羟基自由基的清除试验。[结果]在一定的剂量配比下,蛹虫草多糖与黄伞多糖表现出很好的复合效果,清除羟基自由基的能力较单独多糖有明显的提升。其中复合比例为2∶1,浓度为16 mg/ml时清除率较蛹虫草多糖提高了79.82%,是黄伞多糖的3.6倍;通过方差分析得出,复合多糖与单独多糖之间存在显著差异(P0.05),既表现出了较好的协同作用又呈现出很好的量效关系。[结论]复合后的多糖的活性提高,表现出了较好的清除羟基自由基清除效果。     

灰树花多糖提取工艺的研究

为进一步优选灰树花多糖的最佳提取工艺,研究了溶剂用量、提取时间及提取次数对灰树花多糖提取的影响。结果表明:通过提取方法的考查确定葡糖糖吸收曲线为Y=0.125 8 X+0.105 5(R2=0.999 2),浓度在0.021 4~0.128 4mg·mL-1时与吸收度呈良好的线性关系。采用正交设计,用硫酸-蒽酮法在波长618nm处测定其吸收度,通过灰树花多糖得率的计算最终确定灰树花多糖的最佳提取工艺为水煎煮2次,煎煮时间分别为第1次提取2.0h,第2次提取1.0h,加28倍水,该方法简单,重现性好,提取率高。     

响应面法优化绣球菌多糖脱色工艺研究

利用弱酸性离子树脂HZ-830对绣球菌多糖进行脱色,通过Box-Benhnken中心组合试验和响应面分析法,在前期单因素试验基础上,以脱色温度、脱色pH和脱色时间为自变量,脱色率为响应值,将 HZ-830树脂对绣球菌多糖的脱色工艺进行优化。优化后确定的最佳脱色工艺条件为：脱色温度（A ）＝41℃, pH （B）＝8,脱色时间（C）＝3.5 h ,平均脱色率为87.73％。     

响应面法优化灵芝胞外多糖的发酵工艺条件1）

在单因素试验的基础上,通过Box-Benhnken组合设计和响应曲面分析法优化灵芝液体发酵产胞外多糖的发酵工艺条件。响应面分析结果表明,灵芝胞外多糖的最佳液体发酵培养条件为：葡萄糖15．79g/L ,玉米粉10．23g/L ,豆饼粉10．41g/L。此条件下的验证试验表明,此时胞外多糖的得率为340．05mg/L ,与理论值基本吻合。该方法对灵芝液体发酵多糖的开发与应用有重要意义。     

灵芝多糖的提取纯化及其免疫活性

【目的】从灵芝孢子粉中提取纯化多糖,研究灵芝多糖对小鼠细胞免疫功能的影响,为灵芝开发利用提供试验依据。【方法】利用水煮醇沉法从灵芝孢子粉中提取粗多糖,经反复冻融、Sevag法脱蛋白和Sepharose CL-6B柱层析,纯化得灵芝多糖(GLP)。通过HPLC鉴定GLP的纯度,G.C.分析其单糖组成。采用MTT法、中性红试验、Griess法、比色法和ELISA法,分别检测GLP对小鼠脾淋巴细胞增殖、腹腔巨噬细胞吞噬功能、NO产量和iNOS活性以及TNF-α产量的影响。【结果】GLP为白色粉末,分子质量为51ku,HPLC分析GLP为单一狭窄对称峰,其单糖组成为葡萄糖(Glc)和半乳糖(Gal),二者物质的量之比为16.8∶1。GLP能够刺激小鼠T淋巴细胞增殖,并呈现剂量依赖关系;当GLP质量浓度达到100μg/mL时,能显著增强腹腔巨噬细胞的吞噬能力,提高其分泌iNOS的活力和NO的生产量;同时,当GLP质量浓度≥200μg/mL时,能显著促进腹腔巨噬细胞分泌TNF-α的能力,具有剂量依赖性。【结论】GLP能够增强小鼠免疫细胞活性,有望成为重要的生物免疫调节剂。     

皱纹盘鲍脏器多糖的分离纯化及鉴定

利用碱性蛋白酶从皱纹盘鲍脏器中提取多糖,采用胃蛋白酶和Sevag相结合的方法脱除蛋白质;经Sephadex G-100凝胶柱层析和DEAE-cellu lose 52离子交换层析分离纯化得到AHP-2;AHP-2经高效液相色谱和比旋光度法鉴定其为均一性多糖;紫外扫描无蛋白质的特征吸收峰;红外光谱分析,AHP-2具有典型的多糖吸收峰和硫酸基吸收峰;凝胶色谱法测定其分子量为10 000~15 000;化学组成分析表明,AHP-2是硫酸酯多糖,硫酸根含量11.55%;气相色谱测定单糖组成为鼠李糖、岩藻糖、木糖、半乳糖和葡萄糖,其摩尔比Rha∶Fuc∶Xyl∶Gal∶G lu=6.7∶2.0∶3.9∶7.4∶1.0。     

西番莲多糖提取物对猪圆环病毒2型感染RAW264.7细胞氧化应激的影响

为研究西番莲多糖提取物（Passiflora edulis polysaccharide extract，PEPE）对猪圆环病毒2型（Porcine circovirus type 2，PCV2）感染RAW264.7细胞氧化应激相关因子的影响，本试验探讨了PEPE对氧化应激的调节作用。在96孔细胞培养板中每孔加入100 μL浓度为1×10⁶个/mL的RAW264.7细胞，分别设细胞对照组、PEPE组（25、50、100、200、400、800和1 600 μg/mL），分别于培养箱培养24和48 h，用MTT法检测细胞活性，筛选PEPE的药物安全浓度范围。试验分为以下6个组：细胞对照组、病毒组、PEPE高（400 μg/mL）、中（200 μg/mL）、低（100 μg/mL）剂量组及维生素C组，其中细胞对照组加入含10% FBS的DMEM培养液，其余组加入PCV2病毒液，孵育2 h后在PEPE组加入对应浓度的PEPE溶液，VC组加入配制好的VC溶液，细胞对照组和病毒组加入含10% FBS的DMEM培养液，培养48 h，同样用MTT法检测细胞活性，以研究PEPE对PCV2感染RAW264.7细胞活性的影响。按照上述6个试验组分组，处理同上，将细胞培养12 h，收集样品用于检测氧化应激相关因子水平。用Griess法和DCFH-DA荧光探针分别检测RAW264.7细胞上清中NO含量和细胞内活性氧（ROS）水平、OPT荧光法检测细胞内还原型谷胱甘肽（GSH）和氧化型谷胱甘肽（GSSG）含量，化学发光法检测细胞内黄嘌呤氧化酶（XOD）、髓过氧化物酶（MPO）和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）活力。结果显示，PEPE对RAW264.7细胞的安全浓度范围为25~400 μg/mL。PCV2感染RAW264.7细胞后，细胞活性显著降低（P<0.05），而不同浓度PEPE处理组均能提高细胞活性。RAW264.7细胞被PCV2感染后，细胞分泌NO、ROS水平，GSSG含量及XOD、MPO和iNOS活性显著升高（P<0.05），感染细胞GSH含量显著降低（P<0.05）；PEPE作用于PCV2感染的RAW264.7细胞，显著降低感染细胞NO、ROS水平、GSSG含量及XOD、MPO和iNOS活性（P<0.05），100 μg/mL PEPE处理组细胞GSH水平显著升高（P<0.05）。本试验结果表明，PEPE能提高PCV2感染RAW264.7细胞的抗氧化能力，有利于缓解病毒感染所致氧化应激。     

Design and Experimental Analysis of Silicon Oil Clutch

采用热水浸提、醇沉法提取红枣多糖,对红枣多糖提取工艺与一般理化性质进行了研究.选择浸提固液比、温度、时间和浸提次数作为单因素进行梯度实验,确定其条件范围,再通过正交实验L9(33)进一步确定红枣水溶性多糖最佳提取工艺条件.结果表明,最佳提取工艺条件为:固液比1:7,浸提温度80℃,浸提时间2 h,反复浸提2次.理化性质研究结果表明,提取的红枣多糖中含有多肽和AA,为蛋白质复合多糖.     

南瓜水溶性粗多糖提取工艺的优化

报导了南瓜水溶性多糖的水提醇沉优化工艺。在单因素试验的基础上,选取南瓜水溶性多糖提取时间、提取温度和水料比3个因素进行Box-Benhnken中心组合设计,利用响应面分析法对其提取工艺参数进行优化研究。利用Design-Expert软件对南瓜水溶性多糖得率的二次多项数学模型解逆矩阵分析表明,在提取温度为72.41℃,提取时间为3.02h,水料比为33.48∶1时,南瓜水溶性多糖得率最高,最大得率预测值为2.463%,与实测值2.447%相符。利用优化工艺参数提取南瓜水溶性多糖时,具有最大的提取效果。     

天然螺旋藻多糖的提取纯化及降血糖活性实验研究

螺旋藻营养丰富,含有多种生物活性物质,特别是其中的螺旋藻多糖,能够降低血糖。采用内蒙古鄂尔多斯地区天然生长的螺旋藻,经脱脂、破壁、抽提、浓缩、醇析、脱蛋白等方法提取。再经DEAE-52纤维素层析和SephadexG-200凝胶层析纯化,得螺旋藻多糖。以螺旋藻多糖(PSP)100mg/kg,200mg/kg分别对昆明种小鼠连续灌胃(以下简称ig)10d。结果发现,螺旋藻多糖能显著对抗葡萄糖及肾上腺素而致小鼠血糖升高。上述结果说明,PSP具有一定的降血糖活性,值得进一步深入研究。