基于响应面分析对坚强芽胞杆菌-CX10发酵黄芪多糖的条件筛选与优化

以黄芪为原料,采用二级因子最陡上升/下降法、单因素试验和响应面法,以新分离白蚁源坚强芽胞杆菌-CX10为发酵菌种,对黄芪发酵多糖(Fermented Astragalus Polysacharin,FAPS)质量分数进行研究。对11个重要的发酵培养基因素及其发酵条件进行筛选,如化学因素(葡萄糖、蛋白胨、酵母提取物、乳清粉、KH_2PO_4、NaCl和黄芪粉)、物理因素(温度、pH和时间)和生物因素(接种量),用二阶因子(Plackett-Burman Design,PB)筛选关键因素,以发酵黄芪多糖质量分数显著性影响为中心指标,通过单因素试验考察碳源、氮源、pH、接种量、时间和温度6因素对多糖质量分数的影响,用中心复合设计(BOX-Benken Design,BBD)优化4个重要的发酵参数,如发酵pH、发酵时间、发酵温度和接种量,以获得更高的黄芪多糖的质量分数。最佳发酵条件为:pH 7.35、发酵时间37.54 h、发酵温度37.45℃、接种量10.60%。试验验证在最佳发酵条件下黄芪多糖质量分数为(69.3±0.013)%,理论预测值为71.77%,结果与预测值基本相符,证明该优化条件有效。     

牛病毒性腹泻病毒Core蛋白的原核表达及多克隆抗体制备

为制备牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的Core蛋白及其多克隆抗体,根据Core蛋白的编码基因序列,设计合成一对特异性引物,利用RT-PCR扩增BVDV Core基因并定向插入Pet30a载体中,构建重组质粒Pet30a-Core,经酶切鉴定后转化大肠埃希菌TOP 10感受态细胞,筛选获得阳性重组菌,以IPTG进行诱导后成功表达出分子质量为20 ku的重组Core蛋白。将诱导表达的蛋白产物经融合蛋白的Ni柱亲和法进行纯化,利用纯化的重组蛋白免疫新西兰白兔制备多克隆抗体,并利用间接ELISA法测出多克隆抗体效价达到1∶512 000。蛋白质印迹法(Western blot)和间接免疫荧光试验(IFA)证实,多克隆抗体可与细胞中的BVDV抗原发生反应,具有良好的免疫原性和特异性。本实验成功制备了BVDV重组Core蛋白的兔源多克隆抗体,为BVDV的检测及其Core蛋白功能研究奠定了基础。     

提质减量 “两减”促农业绿色发展农业

<正>肥料是粮食的粮食。在农业生产中,化肥和农药发挥着不可替代的作用。新中国成立以来的农业生产发展表明,我国粮食总产量与化学肥料和化学农药的使用量密切相关。新中国成立后,我国肥料发展经历过几个机遇期。一是20世纪60年代开始的"小化肥"建设,由于我国当时化肥供应严重不足,在计划经济的体制下,为了满足我国化肥的需要、打破封锁,我国自力更生,建设了一批以生产碳酸铵为主的年产合成氨3000~5000吨的化肥厂;二是改革开放后,我国一方面开始大化肥的建设,另一方面于20世纪90年代开始生产复(混)合肥料,     

信阳市废弃农膜污染治理现状及对策

当前,随着设施农业的快速发展,农膜得到了广泛推广与大量使用,已成为农业生产的一种重要生产资料。农膜的大量使用在提高生产力的同时,也对耕地土壤和农村环境带来了污染。基于此,本文系统介绍当前信阳市农膜使用现状及防治措施,分析存在的主要问题及原因,针对性提出防治对策,为本地农膜污染防治工作提供依据。     

山西太行黑山羊品种选育效果

山西太行黑山羊是太行山羊一个重要的地方类群,目前群体数量急剧减少,濒临灭绝。为了加强品种保护,在左权新世纪种羊场建立品种保护基地,组建太行黑山羊核心群。结果表明,经过3 a科学选育,黑山羊体型外貌、体质量、体尺和繁殖性能都取得显著的遗传进展,为科学保种及肉用品系培育奠定了基础。     

施氮对黄土高原旱地小麦根际AMF群落结构的影响

为了解施氮量对黄土高原旱地小麦根际土壤AMF群落结构多样性的影响,探明施氮量与AMF群落结构多样性之间的关系,采用宏基因组测序方法对小麦根际土壤样品进行ITS区的高通量测序,并聚类分析了不同施氮水平对黄土高原旱地小麦根际土壤中AMF菌群结构的影响。结果表明,N2(90 kg/hm2)处理下,小麦根际土壤AMF多样性要高于N1(0 kg/hm2)与N3(180 kg/hm2)处理;不同土层AMF菌群结构多样性亦有差异,N1与N2处理下,L3土层(60～100 cm)AMF丰度最高;N3处理下,随着土层的加深,小麦根际AMF多样性呈逐渐增加的趋势,AMF丰度在L1土层(0～20 cm)达到最高。N2L1(施氮90 kg/hm2结合0～20 cm土层)与N3L2(施氮180 kg/hm2结合20～60 cm土层),N3L3(施氮180 kg/hm2结合60～100 cm土层)与N1L3(施氮0 kg/hm2结合60～100 cm土层),N3L1(施氮180 kg/hm2结合0～20 cm土层)与N1L1(施氮0 kg/hm2结合0～20 cm土层)处理组合下样品相似度较高,N2L2(施氮90 kg/hm2结合20～60 cm土层)与其他样品差异较大,N2L2样品中球囊霉属(Glomus)的相对丰度最高。     

卢氏县农村公路交通脱贫攻坚经验与启示

卢氏县地处河南省西部,总面积4004平方公里,辖19个乡镇352个行政村4113个自然村,总人口38.2万。县域横跨长江、黄河两大流域,地貌特征为“三山三河两流域,八山一水一分田”,是国家级贫困县、秦巴山区集中连片特困地区扶贫开发工作重点县、河南省“三山一滩”扶贫开发工作重点县、河南省4个深度贫困县之一。2015年底,全县有4个乡不通干线公路、231个行政村不通四级路、1893个20户以上自然村不通硬化路,134个行政村不通班车,加之自然灾害频发,特别是2007年、2010年两次特大洪灾,使本来就十分脆弱的道路交通设施遭受毁灭性重创,交通落后成为制约群众脱贫致富的“瓶颈”,是河南省交通脱贫建设任务最重、建设难度最大的县。     

投喂蚕豆对草鱼免疫器官超微结构和免疫基因表达的影响

为研究草鱼摄食蚕豆后免疫功能变化及转投30 d人工饲料后免疫增强效果,在草鱼摄食蚕豆30、60、90、120及150 d(转投饲料30 d)时,检测肠道、头肾、肝脏等器官超微结构及C-type lysozyme、IFN-I、TNF-α等免疫基因表达变化。结果表明:1)饲喂单一饲料蚕豆的草鱼,其肠道、头肾、肝脏等3个重要免疫器官受到严重损伤,转投饲料30 d后其病变并未显著好转;2)免疫基因C-type lysozyme、IFN-I、TNF-α、IgM和MHC-I的表达在30～120 d均被抑制,转投饲料30 d后,头肾中C-type lysozyme、IL-1β、IFN-I、IgM、MHC-I以及肝脏中IL-1β、TNF-α、IFN-I、IgM、MHC-I的表达量有所增加。综上,草鱼摄食蚕豆后其免疫功能受到显著抑制,而转投30 d饲料对脆肉鲩的免疫机能具有一定的恢复作用。     

基于逐级电网安全的电动汽车有序用电策略和系统框架

电动汽车负荷作为一种分散式的负荷,具有可中断、可调节的特性,同时电动汽车负荷又具有分布式储能资源的潜力,如果可以被充分利用于电网需求侧管理,可节省大量的电网投资和提高电网设备利用率。随着国家电网有限公司泛在电力物联网的建设,提升了对电网设备和用户侧的充分连接和感知能力,对电动汽车负荷潜力的利用就具备了基础条件,文章提出了测算电动汽车负荷的方法,并提出了一种基于逐级电网安全的电动汽车有序用电策略和系统框架,以提高电网运行的安全性和经济性。     

肝片吸虫CatB4蛋白分子特征及其免疫原性分析

[目的]明确肝片吸虫组织蛋白酶B4(CatB4)的分子特征及其免疫原性,为研究肝片吸虫CatB4蛋白的生物学特性及揭示其致病机理提供科学依据.[方法]通过RT-PCR扩增肝片吸虫CatB4基因,利用在线分子生物信息学软件对CatB4基因及其编码蛋白进行分子特征分析;构建原核表达载体pET-CatB4,经IPTG诱导获得融合蛋白后进行SDS-PAGE和Western blotting检测分析;并以融合蛋白CatB4免疫小鼠制备多克隆抗体,利用免疫组化对融合蛋白在肝片吸虫体内的表达进行定位分析.[结果]肝片吸虫CatB4基因片段为699 bp,其编码蛋白等电点(pI)7.95,理论分子质量25.89 kD,无信号肽和跨膜区,属于非分泌性蛋白;CatB4蛋白存在10个潜在的磷酸化位点、2个N-糖基化位点和7个N-肉豆蔻酰化位点,有9个抗原决定簇,具有高度保守的CatB结构域,是由无规则卷曲连接9个α-螺旋和8个β-折叠构成其空间结构.基于CatB4基因核苷酸序列同源性构建的系统发育进化树显示,肝片吸虫和大片吸虫聚为一支,二者的同源性为83.98%.SDS-PAGE检测和Western blotting分析结果均显示在41.80 kD处能检测到目的条带.以纯化融合蛋白CatB4与弗氏佐剂乳化后免疫的小鼠均可产生特异性抗体,证实融合蛋白CatB4具有较强的免疫原性;免疫组化定位分析结果显示,在肝片吸虫的卵黄腺腺体细胞、排泄管上皮细胞、肠道上皮细胞和卵黄腺管上皮细胞均发生特异性的抗原抗体反应,呈深棕色.[结论]诱导表达获得的融合蛋白CatB4可特异性识别绵羊肝片吸虫阳性血清,具有较强的免疫原性,且主要在肝片吸虫分泌排泄组织器官中表达,说明CatB4蛋白具有作为肝片吸虫候选抗原的潜力.