平榛脱水素基因的克隆与表达分析

 以平榛（Corylus heterophylla Fisch.）花芽为试材,采用RT-PCR和RACE方法克隆了一个平榛与脱水素基因同源的cDNA基因,命名为ChDHN（GenBank登录号HM228389）,其全长639 bp,具有一个504 bp的潜在编码区,编码167个氨基酸组成的多肽,具有LEA类家族成员具有的特征多肽序列,属于Y₄SK₂类型DHN基因,预测ChDHN蛋白质分子量18.03 kD,预测其理论等电点为7.28。对ChDHN的时空表达特性进行了研究,以Actin为内参,对ChDHN在4 ℃冷激条件下（0、2、4、8、24和48 h）的表达模式进行了初步的研究,冷激处理后ChDHN表现逐渐上调的表达趋势,24 h达到最大表达量,48 h表达量降低;推测ChDHN属于植物冷适应调节网络中的应答基因;定量RT-PCR分析ChDHN在不同器官中的表达,在种子中高丰度表达,其次是雄花序和花芽,在树皮中表达最低。用PCR、酶切和测序鉴定等方法检测已成功构建重组表达载体pET-32a(+)-DHN,将鉴定完全正确的重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),经SDS-PAGE分析并经过Western blotting鉴定,表明重组蛋白被IPTG诱导后高效表达出一条比预测分子量18.03 kD大4 kD的融合蛋白。     

双热源半自动控温甜樱桃促成栽培系统设计与试验

为解决甜樱桃促成栽培产量和质量不稳定的问题,该研究根据甜樱桃促成栽培特点,研制了一种双热源半自动控温甜樱桃促成栽培系统。该系统以煤、柴为燃料的地炕式加热炉为补充加热方式,结合太阳能调控温度。通过与传统大棚比较,分析了该系统对甜樱桃栽培产量及经济效益的影响。结果表明:连续2 a应用甜樱桃促成栽培系统的大棚产量稳定在11 550 kg/hm2以上,优质果率超过80%,年经济效益比普通大棚高37%(2012年)和36%(2013年)。该系统采用半自动测控促成栽培环境,使环境因子的检测和报警实现自动化,明显降低了劳动强度,在甜樱桃促成栽培中推广应用,可取得显著经济效益。     

冷锻炼诱导甜椒抗冷力的生化机理研究

以喜温植物甜椒抗冷品种1141和不抗冷品种0004为试验材料,研究了冷锻炼对两品种叶片膜质过氧化作用及活性氧清除系统的影响。结果表明:冷锻炼明显提高了甜椒幼苗叶片细胞膜的稳定性及膜保护系统功能。与未锻炼苗相比较,锻炼苗在低温胁迫过程中表现出更高的超氧化物歧化酶(SOD)活性和抗坏血酸(AsA)含量,以及较低的膜质过氧化水平。冷锻炼提高了两品种抵御低温破坏的能力,但对抗冷品种抗冷力的提高作用更大一些。     

中国樱桃泰山干樱的组织培养及植株再生研究

以中国樱桃泰山干樱(Prunus pseudocerasus Lindl.)一年生枝的休眠芽为外植体,研究了不同种类和不同浓度生长调节物质对泰山干樱初代培养、增殖和生根的影响。结果表明,泰山干樱的最佳初代培养基为MS 6-BA1.0mg/L IBA0.2mg/L;MS培养基中分别加入0.5mg/L6-BA和0.1mg/LZT,增殖效果最好,增殖系数达6.8,有效新梢数可达80.2%;组培苗在1/2MS IBA0.5mg/L培养基上根诱导效果最好,生根率可达80%,平均根长4.54cm;移栽到草炭土和河沙1:1的混合基质中,温室炼苗后,成活率可达70%以上。     

ISSR标记对34份樱桃种质资源的遗传分析

利用ISSR标记对34份樱桃种质资源进行遗传多样性检测。结果发现,ISSR标记能够揭示材料间较高的遗传多样性。每个引物可获得6～12条DNA片段,平均为8.76条;17个ISSR引物共扩增出149条DNA片段,其中143条具有多态性,多态性比率（PPB）为95.97%;平均多态信息量（PIC）为0.90;每个位点有效等位基因数（Ne）为1.914;材料间遗传相似系数GS变幅为0.44～0.91,平均达0.73。通过聚类,从分子水平对樱桃种质资源的遗传关系进行分析,并对34份资源进行分类,ISSR标记能将34份樱桃种质完全区分开,为樱桃种质资源的研究利用提供参考。     

樱桃主栽品种的遗传多样性分析

利用24对SSR引物对30个樱桃主栽品种进行遗传多样性分析, 以了解樱桃产区的资源多样性状况, 为种质资源的开发和利用提供帮助。结果表明: 樱桃产区具有丰富的遗传变异。SSR的遗传多样性指数的分布范围为1.3647～2.9964, Simp son指数分布范围为0.6111～0.9326。30个品种的分子数据聚类结果均呈现一定的地理分布规律。根据系统聚类分析将30个樱桃品种分为两大类: 欧洲甜樱桃和中国樱桃, 与传统分类学的结果相符。同时在两大类内又将品种进行细分, 第Ⅰ类分为3组, 第Ⅱ类分为2组,其结果与地理分布有一定的相关性, 能够反映樱桃的遗传特点及区域特性。     

高灌蓝莓光合作用对若干环境因子的响应

研究了4个高灌蓝莓品种( ‘泽西’、‘日出’、‘乔治亚吉姆’和‘里维尔’) 的光合作用启动过程, 及其光合作用对环境因子的响应。结果表明: 4个品种的光合启动时间均较长(46～75 min) , 其中‘里维尔’的光合启动最快, ‘日出’最慢。这4种蓝莓的CO₂补偿点均较高(89～121 μmol·mol^-1 ) , 是典型的C3 植物。相对南高灌蓝莓品种, 北高灌品种‘日出’和‘泽西’具有较高的光合能力、羧化效率、PSⅡ最大光化学效率和饱和光强, ‘日出’的光补偿点最低(18.22 μmol·m^-2·s^-1 ) , 具备耐阴生树种的特征。北高灌品种的光合最适温度较低, 范围也较窄(23～25℃) , 不适宜在南方高温地区种植; 相比之下, 南高灌品种‘里维尔’具有较高和较宽的光合最适温范围(23～35℃) , 适宜引种的区域范围较宽。     

大樱桃矮化砧吉塞拉(Gisela)的微体快繁技术体系研究

以从国外引进的大樱桃矮化砧吉塞拉5、6为材料,在MS+6-BA1mg/L+IBA0.1mg/L培养基上诱导出丛生芽;在MS+6-BA0.5mg/L+IBA0.1mg/L的增殖培养基上3周增殖倍数可达10倍;在1/2MS+IBA0.3mg/L的生根培养基上生根率可达70%－100%;温室炼苗后,移栽成活率可达90%以上。     

核桃叶片总RNA提取方法的比较研究

通过对比Trizol、EASYspin和Qiagen 3种试剂盒提取方法,探讨适合核桃叶片总RNA提取的有效方法。结果表明EASYspin试剂盒提取的RNA纯度较高、完整性好,试验用时较短,且试剂盒成本较低。     

怎样改造苹果密植园的树形

当前许多苹果幼树密植园,多以株行距2×3m或2×4m长方形方式栽植,由于头几年多按疏散分层形结构培养,仍然采用低定干、多短截、重“轰条”、多留枝的传统观点和手法整形修剪,以致出现长枝多、短枝少、成花难、结果少,质量差的现象,造成树冠内膛郁闭、树冠交接封行,从而影响树体通风透光。个别管理差的果园甚至出现“满树棍棒向夭长、什么树形也不象”的局面。为此必须下决心对株行距2×3—4m,5年生以前的幼树园片进行树形改造,将原来的疏散分层形改造成自由纺锤形。主要采取以下措施: