油菜杂交种DNA高通量获取方法

通过油菜(Brassica napus)杂交种深孔板内发芽,简化碱裂解法提取DNA步骤,配合高通量研磨器FastFluid Management SK300样品混匀仪的使用,提供了一整套快速高通量低成本获取油菜杂交种子叶DNA样品的集约化方案。该方法可以实现10 h完成万份DNA样品的提取,极大提高了DNA获取效率,有利于利用分子标记对杂交油菜种子进行纯度鉴定。     

一种高质量天门冬基因组DNA提取方法

针对天门冬[Asparagus cochinchinensis(Lour.)Merr.]成熟叶片富含多糖、多酚、蛋白质及其他次生代谢物质的特点,采用改良CTAB法对其基因组总DNA进行提取,并对DNA进行质量检测。结果表明,改良CTAB法可从天门冬成熟叶片中获得纯度高、完整性好的总DNA,其OD260 nm/OD280 nm为1.86,OD260 nm/OD230 nm为2.36,浓度为390μg/mL,产率达11.7μg/g,多糖、多酚和RNA杂质被去除干净,无降解现象,说明该方法提取的天门冬基因组总DNA质量较高。     

健康和患根腐病西洋参根水提液化感作用差异性分析

以黄瓜、萝卜和白菜种子为试材,采用西洋参水提液处理的方法,研究了不同浓度的健康和患根腐病西洋参水提液对3种受试植物种子萌发率、幼苗下胚轴长、根长和鲜质量的影响,分析健康和患根腐病西洋参的差异性化感作用,以期为进一步筛选和鉴定差异化感物质提供参考依据.结果 表明:患根腐病西洋参水提液分别在25000 mg·L-1和2500 mg·L-1显著抑制黄瓜和白菜种子萌发,抑制率最高分别为37.25％和24.00％,而健康西洋参水提液则无明显抑制作用.此外,患根腐病西洋参水提液也明显降低了黄瓜、白菜、萝卜幼苗的根长和下胚轴长,抑制了幼苗的生长,而健康西洋参水提液不明显.总体上表明健康和根腐病西洋参水提液对黄瓜、萝卜和白菜种子的化感作用存在显著差异性.     

农村老龄化下风险偏好、人际关系与农户化学品施用行为分析

基于441份农户的微观调查样本,从各类化肥使用量、农药使用量及其购买成本方面考察了农村劳动力老龄化对化学品投入的影响,并从老年劳动力的体力状况、控制感、技能需求、风险态度和人际关系等途径探究其影响机制,进一步考察农村老年劳动力个体特征对化学品投入产生的异质性影响。结果表明,农村劳动力老龄化会显著减少对复合肥的使用量以及化肥的购买成本。当控制了体力和技能需求等变量后,老龄化对化学品投入依旧有显著的负向影响,表明以往研究推测的体力和技术采纳是老龄化影响务农的途径,不能全面揭示其影响机制。进一步研究发现,农村劳动力老龄化会影响农户的人际关系以及风险偏好对务农投入的边际效应。结论表明,中国建设生态宜居的美丽乡村政策对国家粮食安全战略具有促进作用。     

山核桃天然群体家系种实和幼苗性状变异分析

基于岛石天然林山核桃自由授粉产生的44个单株果实与种子的表型及由种子实生繁殖1年生幼苗生长性状11个指标的数据,分别计算了各指标的特征值,并进行了方差分析,研究其自然变异.结果表明,果实和种子各表型变异程度不一,其中以果实质量的变异系数最大,为11.22％;其次是种子质量和出籽率,分别为8.64％和7.66％;种实各指标在采样单株间的差异均极显著.除果实质量与果形指数和种形指数之间无显著相关外,其余各指标两两间相关均极显著.1年生苗木苗高和地径变异系数分别达13.99％、10.28％,且各家系间差异极显著;苗高与地径的Pearson相关系数为0.552,相关性极显著.2个苗木生长指标与9个种实表型指标间相关性不显著.     

转MsLEA4-4基因拟南芥株系的耐盐性分析

为了深入研究紫花苜蓿（Medicago sativa）MsLEA4-4基因的抗逆性，本试验对前期获得的转MsLEA4-4基因的拟南芥（Arabidopsis thaliana）株系进行不同浓度盐胁迫处理，以验证MsLEA4-4基因在拟南芥植株体内的耐盐性。试验结果表明：盐胁迫后转基因株系的发芽率达到55%，比对照植株（Control plant，CK）高81%；转基因株系的鲜重、叶绿素含量均高于CK（P<0.05）；盐胁迫后转基因株系的存活率比CK提高75.0%~81.3%；盐胁迫明显抑制根系生长，但转基因植株的侧根数量比CK多4~5根（P<0.05）；盐胁迫后转基因株系体内的可溶性糖含量（P<0.05）和超氧化物歧化酶（P<0.01），过氧化氢酶（P<0.01），过氧化物酶（P<0.05）活性均高于CK，脯氨酸（P<0.01）和丙二醛（P<0.05）含量均低于CK。综上可得，MsLEA4-4基因参与了拟南芥体内的耐盐性调控，提高了转基因拟南芥对盐胁迫的耐受性。本研究为进一步探索MsLEA4-4在转基因紫花苜蓿盐胁迫中的功能及培育耐盐性紫花苜蓿品种提供依据。     

牡丹5个管家基因的克隆及其在系统进化分析中的应用

利用RT-PCR技术从牡丹组7个野生种和1个栽培种中分别克隆得到泛素延伸蛋白基因(ubiquitin,UBI)、素环蛋白基因(cyclophilin,CYP)、肌动蛋白基因(Actin)、葡萄糖六磷酸脱氢酶基因(glucose-6-phosphate 1-dehydrogenase,G6PD)和β–微管蛋白基因(beta-tubulin,TUB)等5个管家基因的编码序列(coding sequence,CDS)。序列比对分析发现,5个管家基因序列均相对保守,其在牡丹7个野生种和1个栽培种中的保守性在99.04%~99.69%。利用5个管家基因分别构建了其在牡丹组8份材料中的系统进化树。5个系统进化树均将8份材料分成两组,即革质花盘亚组和肉质花盘亚组;由于5个管家基因核苷酸序列各自的保守性不同,在区分亚组成员间略有差异。综合分析5个管家基因构建的系统进化树可知,杨山牡丹(Paeonia ostii)和栽培牡丹(P.suffruticosa‘Luoyanghong’)常聚为一支,二者亲缘关系较近,因而推测杨山牡丹可能参与了栽培牡丹的形成;紫斑牡丹(P.rockii)和四川牡丹(P.decomposita)一直聚为一支,推测二者亲缘关系较近;黄牡丹(P.lutea)和紫牡丹(P.delavayi)一直聚为一支,推测这二者亲缘关系较近。狭叶牡丹(P.potaninii)与黄牡丹和紫牡丹分化较早,结合前人研究结果建议将狭叶牡丹作为一个独立的种。     

不同营养条件对羊肚菌菌核形成的影响

菌核形成与羊肚菌(Morchella esculenta)子实体的形成有密切的关系。以PDA培养基为基础培养基,通过添加其他物质培养羊肚菌菌丝,观察菌核生长情况,从而初步判断其形成菌核的培养基限定条件。结果表明,碳源营养添加物为淀粉和乳糖,浓度为10 g·L^-1;氮源添加物为NH4HCO3、KNO3和甘氨酸,浓度为250 mg·L^-1;添加KH2PO4,浓度为1 g·L^-1,均能较好地促进羊肚菌菌核的形成。