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131.
荷斯坦奶牛耳组织成纤维细胞分离培养及冷冻保存方法研究 总被引:5,自引:0,他引:5
试验对荷斯坦奶牛耳组织成纤维细胞的分离、体外培养及5种冷冻保存方法进行了研究。结果表明:用DMEM/F12 20%胎牛血清 100IU/mL双抗的完全培养液进行组织块培养,能获得良好的荷斯坦奶牛耳组织成纤维细胞原代培养物;成纤维细胞混合培养物经TrypsinEDTA(0.25%Trypsin,1mmol/LEDTA.4Na)消化所收集到的细胞主要为成纤维细胞,经2~3代传代,可得到纯化的荷斯坦奶牛耳组织成纤维细胞。纯化培养的成纤维细胞在冷冻保护剂和血清成分相同的条件下,选用5种不同的冷冻保存方法进行冷冻保存,其中使用70%细胞悬液 20%胎牛血清 10%DMSO的冷冻保存悬液,先在4℃预冷平衡0.5h,接着在液氮罐口的气态氮中悬挂4h,然后沉入液氮的方法冻存的细胞,解冻后,经台盼蓝染色后进行细胞活力分析,活细胞率为86.68%;培养48h后细胞贴壁率为86.40%,明显高于其他几种方法。 相似文献
132.
活性氧(ROS)对小鼠早期胚胎胚细胞分裂的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
在体外CZB培养的不同时期添加过氧化氢(2.1μmol/L),发育至囊胚阶段,制作胚胎标本,观察其囊胚发育率、胚细胞数和分裂相数。结果显示:0~12 h组和0~72 h组的胚胎发育率显著低于其他几组(P<0.05),对照组、12~24 h组、24~36 h组、36~48 h组之间均差异不显著(P>0.05);各组之间的胚细胞数和分裂指数均无显著差异。说明胚胎在体外培养时,2细胞期胚胎对外源性H2O2最敏感,也最容易发生发育阻滞。但是经H2O2处理之后,度过2细胞期发育阻滞的胚胎能在以后的发育中发生补偿性生长,其胚细胞数和分裂指数都和体外正常发育的胚胎没有差异。 相似文献
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LI Ya-qing ZHANG Zhen-xiang XU Yong-jian CHEN Shi-xin NI Wang YANG Zhao MA Dan 《园艺学报》2006,22(5):948-952
AIM: To study the effect of cigarette smoke medium (CSM) on the gene expression and activity of gelatinases from alveolar macrophages (AMs) in the rat, and then to explore their role in the pathogenesis of chronic obstructive pulmonary disease (COPD). METHODS: AMs were obtained from BALF of the rats that had smoked for 12 weeks. CSM was produced following the method of Wirtz and colleagues, and the cultured AMs were respectively stimulated for 24 h by 0%, 1%, 3%, 5%, 10%, 15% CSM. The mRNA levels of MMP-9 and MMP-2 were detected by semi-quantitative RT-PCR, and the enzyme activity was measured by Zymography. RESULTS: When the concentration of CSM was below 5%, the expression and activity of MMP-9 and MMP-2 signficantly increased with the concentration of CSM in a dose-depended manner (P<0.05). While the concentration of CSM exceeded 5%, the expression and activity of MMP-9 and MMP-2 correspondingly decreased with the increase in CSM concentrations (P<0.05), which possibly were related with the cytotoxicity of CSM. CONCLUSION: The expression and activity of MMP-9 and MMP-2 are induced by CSM. The gelatinases induced by smoking from AM may play an important role in the pathogenesis of COPD. 相似文献
138.
四种杀菌剂对金银花白粉病的防治效果及对金银花品质的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
采用随机区组试验比较四种杀菌剂对金银花白粉病的防治效果,用高效液相色谱法测定各处理样品的绿原酸含量,以筛选出符合金银花规范化种植需要的药剂。结果表明,施药后14天以15%三唑酮600倍液防治效果最好,达77.8%,其次是15%三唑酮1200倍、50%多菌灵500倍液处理,防治效果分别为75.7%和70.8%,极显著地高于3%中生菌素500和1000倍及2%农抗1201000倍液处理的防效。2%农抗120500倍液的防治效果达60.3%,与前三种处理差异不显著,显著好于后三种处理,但未达极显著水平。15%三唑酮1200倍防治处理的绿原酸含量最高,达1.683%,其次是50%多菌灵500倍处理,绿原酸含量达1.539%,符合《中华人民共和国药典》要求,可作为金银花规范化管理中白粉病防治优先采用的药剂。 相似文献
139.
140.