| 荷斯坦奶牛耳组织成纤维细胞分离培养及冷冻保存方法研究 |
| |
| 引用本文： | 王亮,刘婷婷,彭涛,朱海,汪汉卿,曹旭.荷斯坦奶牛耳组织成纤维细胞分离培养及冷冻保存方法研究[J].黑龙江畜牧兽医,2006(5):9-12. |
| |
| 作者姓名： | 王亮 刘婷婷 彭涛 朱海 汪汉卿 曹旭 |
| |
| 作者单位： | 中国科学院兰州化学物理研究所甘肃省天然药物重点实验室，新疆金牛生物股份有限公司，新疆金牛生物股份有限公司，新疆金牛生物股份有限公司，中国科学院兰州化学物理研究所甘肃省天然药物重点实验室，中国科学院新疆理化技术研究所 甘肃兰州730000，中国科学院新疆理化技术研究所，新疆乌鲁木齐830011，中国科学院北京研究生院，北京100039，新疆乌鲁木齐830026，新疆乌鲁木齐830026，新疆乌鲁木齐830026，甘肃兰州730000，新疆乌鲁木齐830011 |
| |
| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(30471242)，中科院“百人计划”2002年第1期 |
| |
| 摘 要： | 试验对荷斯坦奶牛耳组织成纤维细胞的分离、体外培养及5种冷冻保存方法进行了研究。结果表明:用DMEM/F12 20%胎牛血清 100IU/mL双抗的完全培养液进行组织块培养,能获得良好的荷斯坦奶牛耳组织成纤维细胞原代培养物;成纤维细胞混合培养物经TrypsinEDTA(0.25%Trypsin,1mmol/LEDTA.4Na)消化所收集到的细胞主要为成纤维细胞,经2~3代传代,可得到纯化的荷斯坦奶牛耳组织成纤维细胞。纯化培养的成纤维细胞在冷冻保护剂和血清成分相同的条件下,选用5种不同的冷冻保存方法进行冷冻保存,其中使用70%细胞悬液 20%胎牛血清 10%DMSO的冷冻保存悬液,先在4℃预冷平衡0.5h,接着在液氮罐口的气态氮中悬挂4h,然后沉入液氮的方法冻存的细胞,解冻后,经台盼蓝染色后进行细胞活力分析,活细胞率为86.68%;培养48h后细胞贴壁率为86.40%,明显高于其他几种方法。
|
| 关 键 词： | 荷斯坦奶牛 成纤维细胞 体外培养 冷冻保存 活细胞率 细胞贴壁率 |
| 文章编号： | 1004-7034（2006）05-0009-04 |
| 收稿时间： | 2005-08-05 |
| 修稿时间： | 2005-08-05 |
Isolation and Pure Culture of Holtein Milk Cow Ear Fibroblasts and Research on Cryopreservation Methods |
| |
| WANG Liang,LIU Ting-ting,PENG Tao,ZHU Hai,WANG Han-qing,CAO Xu.Isolation and Pure Culture of Holtein Milk Cow Ear Fibroblasts and Research on Cryopreservation Methods[J].Heilongjiang Animal Science And veterinary Medicine,2006(5):9-12. |
| |
| Authors: | WANG Liang LIU Ting-ting PENG Tao ZHU Hai WANG Han-qing CAO Xu |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | Holstein milk cow fibroblast in vitro culture cryopreservation living cell rate adherence rate |
| 本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录！ |
