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AIM: To investigate the feasibility to inhibit the expression of MHCⅡ by special siRNA targeting class Ⅱ major histocompatibility complex (MHC Ⅱ) transactivator (CⅡTA), which might regulate MHC Ⅱexpression for suppressing immune rejection. METHODS: Five different siRNA were designed, synthesized and transfected into freshly isolated rat corneal keratocytes. At 24 hours posttransfection, the changes of MHC Ⅱexpression were detected by flowcytometry, and the mRNA abundance of CⅡTA and MHC Ⅱ was measured by FQ-PCR after inducing with recombinant rat interferon-gamma (IFN-γ). RESULTS: Different siRNA showed different reduction in MHC Ⅱ and CⅡTA expression compared with the control (P<0.01). Among the five groups, the siRNA-4 was the most efficient. The mRNA content of CⅡTA and MHC Ⅱ were reduced by 95.10%±1.25% and 82.70%±1.95% respectively and the expression of MHC Ⅱ was inhibited by over 80% in siRNA-4 group at 24 hours posttransfection. CONCLUSIONS: The special siRNA targeting to CⅡTA inhibits CⅡTA mRNA and further inhibits its regulation of MHC Ⅱ molecular expression. The blockade of MHC Ⅱ by siRNA may be useful for further studying allogeneic corneal limbal transplantation. 相似文献
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采后热空气处理对金冠苹果后熟衰老及病害的影响 总被引:2,自引:1,他引:2
金冠苹果采用38℃,72h或96h热空气处理,可降低0℃贮藏中果实的呼吸强度和乙烯释放量,延缓非溶性果胶的降解,维持较高的硬度、脆度,同时也会加速果皮的褪绿变黄和固酸比的上升,尤其是38℃96h处理的作用效果更为明显,显著提高了货架期后(20℃7d)苹果的质地品质和可接受程度,延缓衰老。苹果分别接种扩展青霉、灰葡萄孢霉,0℃和20℃条件下其病害发生率和腐烂均很严重,采用38℃96h热空气处理可以完全控制病害的发生,避免腐烂。可见,热空气处理一方面能延缓金冠苹果的后熟衰老,另一方面还能控制贮期病害的发生。 相似文献
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苹果砧木SH40 和八棱海棠缺铁胁迫下根系有机酸分泌的差异 总被引:1,自引:0,他引:1
以苹果砧木SH40和八棱海棠(Malus micromalus) 的生根试管苗为试材, 采用水培方法, 研究了缺铁胁迫对根系分泌有机酸的种类和数量的影响。结果表明: SH40和八棱海棠根系分泌有机酸种类相同,主要是草酸、丙二酸、酒石酸、苹果酸和柠檬酸, 但在分泌总量上差异明显, 八棱海棠分泌有机酸总量大于SH40。缺铁胁迫时SH40草酸分泌量和八棱海棠柠檬酸分泌量大量增加, 且八棱海棠干物质和铁含量明显高于SH40。草酸和柠檬酸分泌量增加可能是SH40和八棱海棠耐受缺铁胁迫的原因之一。 相似文献
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97.
单精注射法生产转基因小鼠的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
精子胞质内显微受精技术(ICSI)作为辅助受精的一种手段,将体外受精研究和胚胎的显微操作技术结合起来,比以往对精子质量的要求大大降低,使其无论在畜牧业生产实践还是在哺乳动物的生殖生理基础研究中都有着十分重要的意义。本研究用小鼠精子及小鼠精子与GFP基因孵育后对小鼠卵母细胞进行ICSI,获得子代鼠。提取鼠尾基因组DNA,应用PCR、Southern blot进行整合检测。在发育至成年的11只小鼠中经PCR和Southernblot检测到3只阳性(27.3%)。结果表明,利用ICSI技术可以高效地生产转基因小鼠。 相似文献
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应用PCR检测鸭肠炎病毒弱毒在鸡胚体内的分布 总被引:2,自引:0,他引:2
根据GenBank已发表的鸭肠炎病毒(DEV)UL6基因的部分核苷酸序列,设计并合成一对引物.以鸭肠炎病毒中国商品化疫苗毒蚀斑纯化株(DEV Clone-03)DNA为模板,经PCR扩增出预期516bp的目的片段。将此片段插入克隆载体质粒pMD18-T,并进行序列测定,序列比较结果显示,此段序列与参考序列完全一致。用PCR检测DEV Clone-03在鸡胚体内的分布情况显示,接毒死亡鸡胚的尿囊膜、心、肝、脾、肺、肾和肌肉皮肤内均存在病毒。PCR敏感试验表明此方法可以检测到100μL尿囊液中提取的10^-3稀释的病毒DNA,相当于0.2个EID50病毒量的DNA。 相似文献
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为了提高猪传染性胸膜肺炎灭活苗的保护力,本研究利用基因重组技术表达了猪传染性胸膜肺炎放线杆菌6种主要致病因子蛋白:rApxⅠ、rApxⅡ、rApxⅢ、rApxⅣ、rApfa和rOMP。设立试验Ⅰ组(灭活苗),试验Ⅱ组(灭活苗、rApxⅠ、rApxⅡ、rApxⅢ和rOMP),试验Ⅲ组(灭活苗、rApxⅠ、rApxⅡ、rApxⅢ和rApxⅣ),试验Ⅳ组(灭活苗、rApxⅠ、rApxⅡ、rApxⅢ和rApfa)和空白对照组(PBS),每组26只BALB/c小鼠,分3次免疫,每次间隔2周,每周检测血清抗体水平,在免疫后第2周、第4周和第5周,MTT法检测脾脏T细胞增殖水平及ELISA法测定IFN-γ分泌水平。在第3次免疫后的第7 d,将每组剩余20只小鼠平均分成2组,分别以APP1型菌(5×10~9 CFU)和APP7型菌(1×10~(11) CFU)进行攻毒保护试验。结果表明,向灭活苗中添加重组亚单位成份可以提高机体的细胞免疫和体液免疫水平,并能提高灭活苗的交叉保护率;试验Ⅱ组的ApxⅠ和OMP抗体水平以及细胞免疫水平均显著高于其它各组(p<0.05),对于APP1和APP7型菌的攻毒也提供了明显优于其它各组的保护结果,试验Ⅲ、Ⅳ组的细胞、体液免疫水平及保护率较试验Ⅰ组也有所提高。结果显示出ApxⅠ、OMP抗体水平和细胞免疫水平与攻毒保护率之间存在着正相关性,向灭活苗中加入重组蛋白成份可以提高疫苗的交叉保护,试验Ⅱ组通过激活体液免疫和细胞免疫,对两个血清型APP的攻击提供了很好的保护作用,从而为猪传染性胸膜肺炎新型疫苗的研制提供参考。 相似文献
100.
以苦皮藤Celastrus angulatus Max.提取物水解产物中的1β,2β,4α, 6α,8β,9α,13-七羟基-β-二氢沉香呋喃为起始原料,先经过甲基磺酸酯保护后再用氢化铝锂还原,得到一结构新颖的双呋喃二氢沉香呋喃倍半萜(化合物 S ),并以此为原料设计合成了7个未见文献报道的双呋喃二氢沉香呋喃醚类衍生物 (a~g ),其结构经核磁共振谱、红外光谱、高分辨质谱等方法确证。初步的杀虫活性测定结果表明:目标化合物对3龄粘虫Mythimna separate幼虫具有一定的杀虫活性,其中二烯丙基醚和三丁基醚衍生物(化合物 d和f )在10 mg/mL的浓度下该幼虫的死亡率分别为86.2% 和 82.7%。 相似文献