转基因生物及其产品相关数据库的构建

使用SQL数据库管理系统作为平台，将转基因产品外源基因检测技术的研究成果与利用英特网等手段收集的国内外有关转基因生物及其产品的研究技术与产业化状况、安全管理法律法规、检测方法与标准及科普知识等信息与数据，构建成数据库，含承担单位情况简介、留言本与8个子库，共54个栏目，约12500条记录，总容量达100兆字节(MB)以上。本文主要介绍该数据库的系统开发、构建过程、内容、功能等。     

饲料与动物产品中牛、羊源性成分的多重PCR检测

以鱼粉、奶粉、牛奶、果乳、鱼油及牛油为试验材料,进行了18S rDNA片段、牛源性成分和羊源性成分之间的多重PCR检测。多重PCR检测结果与单一PCR检测结果完全一致。结果表明,多重PCR方法用于进出口饲料及动物产品中牛、羊源性成分的同时检测是可行的。     

动物油脂中DNA的提取及牛、羊源性成分的PCR检测

用异硫氰酸胍法提取鱼油、加入牛肉DNA的鱼油、加入山羊肉DNA的互油和牛油中的DNA。18S rDNA片段以及牛、羊源性成分的PCR扩增结果表明，建立的动物油脂DNA提取方法是可行的。用建立的DNA提取方法提取3份送检鱼油的DNA，牛、羊源性成分的PCR检测结果均为阴性。     

水稻种子样品前处理对转基因成分荧光PCR检测的影响

以转基因水稻科丰6号不同含量的水稻种子为样品,对影响检测结果的主要前处理措施,包括样品研磨颗粒细度与DNA提取过程中样品CTAB裂解缓冲液温育时间等,进行分析筛选.结果表明,样品颗粒细度与CTAB缓冲液温育时间的不同处理组合对提取的DNA含量影响极显著,其中,样品颗粒细度100目与CTAB缓冲液温育时间8 h(过夜)处理的样品DNA提取效果与荧光PCR检测结果均最佳.采用最佳前处理组合,样品的主要转基因成分(Ca MV 35S、NOS、Cry1Ab)检出限从通常的转基因含量质量分数0.01%降到0.001%,使得水稻种子转基因成分荧光PCR检测灵敏度提高10倍,大幅度提高了检测结果的准确性.     

饲料中的转基因成分在蛋鸡体内代谢残留的研究

用含20%抗草甘膦转基因豆粕的饲料喂养鸡蛋,通过检测其内脏、肌肉、血液、粪便及肠道微生物的豆粕转基因成分,探讨饲料中转基因成分在鸡蛋体内的代谢残留状况。以定性PCR检测含20%转基因豆粕的饲料及蛋鸡的8种内脏样品(肠、胰腺、食道、肝、腺胃、肾、心脏、肌胃)、肌肉、血液、蛋品、粪便、肠道微生物的转基因豆粕的工具基因CaMV35S启动子与NOS终止子以及目的基因CP4-EPSPS等外源基因成分。PCR检测结果表明:除了含20%转基因豆粕的饲料外,蛋鸡的8种内脏器官、肌肉、血液、蛋品、粪便及肠道微生物中均未检出转基因豆粕的CaMV35S、NOS、CP4-EPSPS等外源基因成分。检测结果表明:长期喂养含20%转基因豆粕饲料的蛋鸡的8种内脏器官、肌肉、血液、蛋品、粪便及肠道微生物中均未发现有转基因成分残留,说明饲料中的转基因成分,通过肠胃消化降解后吸收,不会在鸡的组织器官内残留。     

Sorhum属7个近似种的DNA微量提取方法比较

本研究以Sorghum属中7个近似种的种子为试验材料，采用CTAB、SDS、CTAB与SDS相结合及TakaRa dNA提取试剂盒等4种方法提取DNA，并对不同提取方法所获取的DNA纯度、浓度及DNA提取率进行研究分析比较。结果表明：采用Moiler方法对其7个近似种的基因组DNA的提取为最佳方法。     

分子标记在动植物检验检疫与GMO产品检测中的应用

介绍了几种常用的分子标记技术,综述了分子标记技术在动植物、食品等检验检疫与转基因生物及其产品外源基因检测中的应用,展望了分子标记技术在检验检疫中应用的信息化、网络化前景.     

鳖病原细菌的分离鉴定及胞外产物的初步分析

对来自福建光泽、宁德和福州的表现不同症状的病鳖进行细菌分离,所得菌株经形态观察及生化反应鉴定均为有运动力的气单胞菌,其中主要是嗜水气单胞菌（Aeromonashydrophila）．对气单胞菌进行了致病性和药物敏感性试验,对其液体培养物用（NH4）2SO4沉淀得到胞外产物,测得其对免血有溶解性,对小白鼠有致死也．SDS－PAGE电泳结果表明,胞外产物的差异具有菌株特异性．     

转基因玉米EPSPS蛋白适体的筛选与结构分析

通过体外合成长度为70个碱基的随机ssDNA文库,采用指数富集配基的系统进化(SELEX)技术,以转基因玉米EPSPS蛋白为靶目标进行16轮筛选,将筛选到的适体群进行克隆、测序,初步获得与转基因玉米EPSPS蛋白特异性结合的适体。并用Macaw2.05和DNAMAN软件对每个适体的保守序列和二级结构进行分析。结果表明:一级结构分析序列同源性可分为四大群,其中A群有11条序列含有67个保守碱基;二级结构分析结果表明,茎环状和口袋状等结构可能是适体与转基因玉米EPSPS蛋白结合的结构基础。利用SELEX技术获得与转基因玉米EPSPS蛋白特异结合的适体群,其一级和二级结构与亲和力密切相关。     

动物产品及饲料中牛源和羊源性成分PCR检测方法的优化

以牛肉、山羊肉为试验材料，对动物产品及饲料中牛源、羊源性成分PCR检测方法进行了优化。结果，牛源性成分的最低检测限可达10μg/g，羊源性成分的最低检测限达0．1μg/g。PCR检测和酶切鉴定结果表明，在水平测试的混合饲料粉中可检出牛源、羊源性成分。