精子介导生产转hCD59基因猪

为研究精子介导法生产异种器官移植用转基因猪的效率,将人膜反应性溶解抑制物(hCD59)基因与脂质体混合制成基因/脂质体复合物,分别采用睾丸注射法和基因脂质体复合物/精子共孵育法制备转人hCD59基因猪,其中睾丸注射法处理公猪1头,44 d后配母猪8头,7头受孕(受孕率87.5%),产仔73头,PCR阳性猪3头(阳性率4.3%);外源基因/精子共孵育法处理公猪4头,处理母猪4头,1头受孕(受孕率25%),产仔11头,PCR阳性猪1头(阳性率9%)。从15头受孕母猪共获得84只仔猪,经PCR初步检测,其中4只仔猪为转基因阳性,阳性率4.8%。研究结果表明:通过精子介导法可以获得转基因猪。     

异种器官移植转基因猪检测系统的建立

以 PCR、免疫荧光、细胞毒试验在 DNA、表达、功能水平对转 h DAF基因猪进行了检测。结果表明 :转基因猪的整合率为 19.35 % ( 18/ 93) ;在 14头转基因阳性猪中 ,有 7头动脉肌肉层表达了外源 h DAF基因 ,6头猪的外源基因表达产物可以抑制猪淋巴细胞的裂解     

转人血清白蛋白基因猪的表达分析

整合有人血清白蛋白基因的转基因猪 ,经琼脂糖扩散、蛋白质电泳、Western杂交等分析 ,发现 3头转基因猪不同程度地表达了人血清白蛋白 ,其中最高表达水平为 2 0 3mg/mL。     

猪ICM注人囊胚获得嵌合胚的研究

以湖北白猪囊胚为ICM供体,杜洛克猪囊胚为受体囊胚,进行嵌合胚的研究.采用免疫外科和显微外科两种方法,分离184枚供体囊胚的ICM.用酶将ICM分散,而后注入到受体囊胚的囊胚腔中,共获67枚嵌合胚,经体外短期培养,其中35枚嵌合胚恢复,恢复率为52.2%.将恢复的嵌合胚分别移入5头与供体囊胚猪同步的受体母猪子宫内,两头受孕,其中一头维持到分娩.产仔4头,但未见毛色嵌合现象.     

猪羊生长激素基因保守性研究

生长激素基因在猪羊间的差异 ,通过两对引物 ,分别为P1:5’ -agctggattctttacggctgagcc - 3’和P2 :5’ -tccggaagcaggagagcagaccgtag - 3’ ,P3:5’ -gctgacacctacaaggagtttg - 3’和P4:5’ - gtttgcttgaggatctgtcctg - 3’。对它们的DNA进行聚合酶链反应 ,电泳及序列分析结果表明 :P1-P2和P3-P4引物都能扩增出猪羊DNA样 ,得到大小一致的扩增带 (对应引物的带 ) ,但southern杂交结果的差别很大 ;生长激素基因的碱基组成在猪羊间的差异为 6 5 % ,即猪羊生长激素基因保守性很强     

PG 600诱导初情期前母猪的同期发情及其对移植胚胎存活的影响

用PG600诱导初情期前的青年母猪同期发情,进行胚胎移植试验。结果是,有82.85%的母猪在经PG600处理后的第4天、第5天发情;胚胎移植后,怀孕率达到85.71%,头平均产仔6.79头,与对照组无显著差异(P>0.05)。     

人类MCP和CD59双基因导入小鼠的整合及传代研究

将人类MCP(膜辅因子蛋白)和CD59(终末阶段同源限制因子)两种基因采用混合注射的方法,导入521枚昆明小鼠的受精卵原核中,得到原代转CD59基因小鼠14只,CD59的整合率为18.4%;转MCP基因小鼠12只,MCP的整合率为15.7%;转CD59 MCP双基因小鼠7只,双基因整合率为9.2%;转基因效率5%。通过5只存活的G0代转双基因小鼠和非转基因小鼠的繁殖,得到F1代转MCP小鼠14只,转CD59小鼠16只,转双基因小鼠10只;F1代双基因占33.3%。     

家畜手术中粘连的诱因及防治措施的研究

通过大量的手术比较,发现手术中创伤、出血、组织块及其他刺激都会使粘连增加,而清理创口、使用抗生素会明显减少粘连的发生,抗粘连剂的使用应该谨慎。     

表达人血清白蛋白转基因猪的研究

本研究采用显微注射法，使含有猪血清白蛋白侧翼序列的微小人血清白蛋白导入猪的基因组中，生产出转入血清白蛋白（HSA）基因猪，经PCR和Southern杂交检测，有4头活仔整合有HSA基因，其中的3头不同程度的表达了人血清白蛋白。