猪肺炎霉形体168弱毒菌株免疫猪同圈感染试验初报

<正> 我所接受的猪肺炎霉形体安宁系,经回复猪,从168号猪分离出的菌株,经克隆化菌落三次,在改进的Switzer's液体培养基(KM_2)中,连续传代,由强毒株渐变为弱毒株。在传至340代以后,经用杂交猪做免疫试验和试用于野外一万多头剂,说明有良好的安全性和免疫力。用此弱毒株免疫的杂交猪是否带菌和排菌而感染健康猪?应加以检查。故在免疫猪圈中,放入健康猪同时饲养,检试有无感染,现将初步结果报告于后。     

大型猪场烈性传染病动态控制操作流程大纲

猪烈性传染病严重影响养猪业。近年来，多以非典型、慢性及隐性状况出现，集约化、规模化、工厂化猪场大批涌现后，污染普遍，同一猪场中各类型的猪，包括种猪公、母猪，后备种猪、初生仔猪、保育猪、育肥猪等均可感染。多表现为生长迟缓，僵猪、流产、死产、产弱仔及震颤，猪场不明原因的免疫失败等，给我国养猪业带来很大的经济损失。     

副猪嗜血杆菌的分离与鉴定

副猪嗜血杆菌病又称"革拉瑟氏病"(Glasser'sdisease),是由副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HP)引起的一种以多发性浆膜炎和关节炎为特征的接触性传染病.     

大中型猪场阻断非洲猪瘟的三道防线

正欧洲爆发原因:一是野猪作为非洲猪瘟病毒的天然储主,将疾病传播到家养猪场。高加索地区带毒野猪的运动导致疫情不断扩散;当地的狩猎习惯使野猪带毒废弃物被动转移;波兰死亡和腐烂的疣猪,尸体仍然有感染性。二是各国不能合作完成广泛的监测、报告和扑杀,导致疫情扩散,非洲猪瘟的快速诊断和彻底监测对于其控制是必不可少的。三是横穿欧洲的汽车交通威胁欧洲全境,2018年迄今,欧洲共接收     

猪肺炎支原体抗体胶体金免疫层析检测方法的建立

旨在建立猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)抗体胶体金免疫层析检测方法,从而快速地对Mhp的感染和免疫情况进行监测,预防和控制猪支原体肺炎传播。通过柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,确定Mhp特异性抗原P46蛋白的最适标记pH和标记浓度并进行标记,作为金标液。将P46蛋白包被检测线T线,抗P46蛋白单抗包被质控线C线,组装检测试纸条。经优化,建立可同时用于Mhp血清抗体和黏膜抗体检测的胶体金免疫层析检测方法。利用该检测方法对76份临床血清样品和40份临床鼻拭子样品进行检测,并与ELISA检测结果进行比较。用该试纸条检测血清样品时,灵敏性、特异性、重复性较好,与商品化Mhp ELISA抗体检测试剂盒符合率为96.1%;该方法检测呼吸道鼻拭子样品时,存在微弱的非特异性反应,检测结果与本实验室建立的sIgAELISA检测方法符合率为87.5%。本研究成功建立了Mhp抗体胶体金免疫层析检测方法,整个过程只需10 min。检测血清样品具有较好的特异性和灵敏性,检测鼻拭子样品时特异性还有待提高。     

猪肺炎支原体特异性蛋白P36基因的克隆与表达

根据Genbank中猪肺炎支原体P36基因序列设计一对特异性引物,通过聚合酶链式反应(PCR)扩增出猪肺炎支原体ZCF23株特异性蛋白P36基因序列,经测序确认后,克隆人原核表达载体pGEX 6p-1的EcoR I和Xho I位点之间,转化宿主菌BL21,将筛选出的阳性克隆用IPTC诱导,通过SDS-PAGE电泳进行鉴定,结果表明,P36蛋白基因获得了表达,这为猪肺炎支原体免疫检测与诊断提供了重要条件.     

猪肺炎支原体DnaK基因的表达及ELISA方法建立

猪肺炎支原体(Mhp)是猪气喘病的主要病原体。利用Mhp NJ株的DnaK基因通过SOE-PC(splicing withoverlap extension PCR)R扩增和突变,获得了目的片段并插入表达载体pET-28a(+)中,然后转入宿主菌BL21(DE3)。重组质粒经1 mmol/L IPTG在37°C温度下诱导5 h,目的蛋白可达到总蛋白的14.1%。Western Blotting证明表达的重组蛋白具有猪肺炎支原体反应原性,用该重组蛋白建立的ELISA方法可检测到猪肺炎支原体抗体。此为该病基因工程疫苗抗原的筛选和ELISA诊断试剂盒的研制奠定基础。     

3种制备猪肺炎支原体DNA模板方法的探讨

为了筛选出一种快速、高效、廉价提取猪肺炎支原体模板DNA的方法,本研究分别对试剂盒法、双蒸水煮法、酚-氯仿法进行比较,从中选出最佳提取方法。结果显示：这3种方法均适合由菌液中提取基因组DNA;水煮法不能由组织中提取出基因组DNA,试剂盒法可由组织中提取出基因组DNA且得到的目的DNA较纯,但每次提取量少;酚-氯仿法能大批量提取组织基因组DNA,但操作繁琐,易污染且稍有杂带。针对不同的模板,选择合适的DNA制备方法,有利于做出准确检测、提高检测效率,为疾病的早期诊断提供保障。     

弓形虫疫苗的研究进展

弓形虫病是一种人兽共患病,已知有200多种哺乳动物和鸟类可感染该病,孕妇感染后会经胎盘传染给胎儿,造成严重疾患.猪弓形虫病在我国猪群中比较常见,给养猪业带来了巨大的经济损失.     

猪肺炎支原体套式PCR检测方法的建立及应用

根据GenBank中登录的猪肺炎支原体P36(L-乳酸脱氢酶)全基因序列,设计合成了2对引物,建立套式PCR方法。运用该方法对猪肺炎支原体不同菌株培养物进行了扩增,并对经肺内免疫猪支原体肺炎活疫苗后支气管肺泡灌洗液进行了检测。结果表明,不同菌种均能扩增出427 bp的目的条带,而其他病原菌未出现特异性扩增条带。建立的套式PCR方法检测猪肺炎支原体的最低检测限度为10个CCU(颜色变化单位)。支气管肺泡灌洗液检测结果表明,经肺内免疫的猪支气管肺泡灌洗液扩增结果均为阳性。