乌鸡肌胃糜烂病例报告

1995年6月吉林省延边某养殖场饲养的2000多只育成乌鸡群中,有的鸡出现精神沉郁、食欲减退、消瘦、下痢、慢性死亡等现象。经诊断为肌胃糜烂。禽类的肌胃糜烂常发生于肉用鸡和蛋鸡,乌鸡的肌胃糜烂实为少见,现将有关情况报告如下。 1.临床症状:病鸡食欲减退,精神不振,羽毛蓬乱,鸡冠、肉髯苍白,皱缩。嗉囊膨大,腹泻,拉棕色稀便或软便,严重者拉黑褐色稀便。后躯羽毛被粪便污染。少数病鸡步态不稳,喜蹲伏,闭目缩颈,最后消瘦衰竭死亡。个别死鸡倒提双脚时,从口中流出黑褐色或淡绿色液体。病程约7～30天。 2.剖检变化:血液稀薄,呈淡红色,肌肉苍白,干燥,无光泽。少数死鸡嗉囊扩张,内充满黑褐色或淡绿色液     

猪附红细胞体病的病理学观察

用常规病理学方法，对5头患有附红细胞体病的仔猪进行病理解剖学和病理组织学观察，病理解剖学主要变化是血液稀薄，凝固不良，全身皮肤及粘膜，脂肪和脏器黄染，肝，脾肿大，病理组织学主要变化是肝，脾，肾等器官有含铁血黄素沉积和广泛的器官损害。     

马巴贝西虫EMA-1基因的克隆与表达

通过聚合酶链式反应扩增出体外培养的马巴西虫USDA株基因EMA-1，将该片段连接到克隆质粒载体pUC19的BamHI酶切位点上，并对其序列进行测定。结果表明该基因长度为836bp，编码的表面蛋白由272个氨基酸残基组成，与佛罗里达（Florida)株的EMA-1的氨基酸序列有95%左右的同源性，再将EMA-1基因片段插入到表达质粒载体pGE-MEX-2的BamHI位点上，并导入大肠杆菌JM109（DE3）中，经SDSPAGE分析和Western blot检测的结果表明，马巴贝西虫USDA株基因EMA-1，在大肠杆菌内获得表达，融合蛋白的分子量为65kDa。将其免疫给小鼠可产生特异性的抗马巴贝西虫抗体，且同驽巴贝西虫无交叉反应。     

虫克星对黑熊消化道寄生虫的驱虫试验

１９９４年１月份和６月份，对延边两家养熊场３８只熊进行消化道寄生虫区系普查，并在此基础上用虫克星和盐酸左咪唑进行了对比驱虫试验。结果，两种药物使犬蛔虫、犬钩虫和类圆线虫的虫卵减少率、转阴率均达到１００％，但虫克星组的排虫时间显著长于盐酸左旋咪唑组。     

牛瑟氏泰勒虫P23和P33表面蛋白双基因融合表达载体的构建及原核表达

为探索牛瑟氏泰勒虫的表面蛋白基因融合产物作为双价疫苗的可行性,以牛瑟氏泰勒虫基因组DNA为模板,通过重叠延伸拼接聚合酶链式反应（SOE-PCR）把P23和P33表面蛋白基因连接一起,2个基因之间插入一个linker（Gly4Ser）3,经EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切,获得1151bp的双基因融合片段,克隆于表达质粒pGEX-4T-1中,构建了双基因重组表达载体pGEX-4T-P23-P33,转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导,表达出预期大小70．0ku的融合蛋白。Western blot检测结果显示,该蛋白与牛瑟氏泰勒虫抗血清呈阳性反应,表明融合蛋白具有反应原性,为进一步研究此融合蛋白作为疫苗候选成分提供了理论依据。     

动物传染病学"三段式"实践教学体系的构建

动物传染病学是动物医学专业必修的主干专业课程,传统的实验课教学,主要是验证课堂教学的基本理论和掌握一些基本的实验方法,是一种辅助性教学手段[1,2].     

弓形虫重组GRA3抗原单克隆抗体的制备与鉴定

为了鉴定弓形虫特异性重组GRA3蛋白的抗原表位,以原核表达并纯化的融合蛋白GRA3免疫BALB/c小鼠,利用快速免疫法进行免疫,通过ELISA进行筛选,获得8株能够稳定分泌抗GRA3蛋白特异性单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞。这8株McAbs亚类鉴定均为IgG型,特异性强,ELISA检测结果均为阳性,抗体效价均大于1∶200 000。该结果为进一步探索GRA3蛋白的结构和功能以及建立诊断方法奠定了基础。所生产的McAb可用于免疫组化和疫苗的制备,并可大大提高诊断的特异性。     

表达牛源犬新孢子虫NcSRS2基因重组腺病毒的构建及免疫原性分析

为构建牛源犬新孢子虫NcSRS2基因重组腺病毒,并分析其免疫原性,PCR扩增牛源犬新孢子虫NcSRS2基因,构建克隆质粒pMD18-T-NcSRS2、重组腺病毒穿梭质粒pCR259-NcSRS2及表达质粒Transpose-AdNcSRS2,脂质体介导转染QBI-HEK293细胞,包装重组腺病毒Ad5-NcSRS2,PCR检测重组腺病毒NcSRS2基因,IFAT和Western blotting检测NcSRS2基因在QBI-HEK293细胞中的表达,测定病毒滴度后,收集病毒液免疫BALB/c小鼠,间接ELISA检测小鼠血清IgG抗体水平.结果显示,扩增的牛源犬新孢子虫NcSRS2基因大小为1 227 bp,与GenBank中发表的NcSRS2( AF061249)核苷酸序列相似性为99％;重组腺病毒Ad5-NcSRS2在293细胞中包装成功,表达蛋白的相对分子质量为43 ku,具有较好的反应原性;测得重组腺病毒Ad5-NcSRS2滴度为109TCID50·mL-1,间接ELISA检测二免后3周BALB/c小鼠血清中IgG抗体效价达1 ∶ 2 048.本研究成功构建了具有良好免疫原性的重组腺病毒Ad5-NcSRS2,为牛源犬新孢子虫NcSRS2基因重组腺病毒载体疫苗的研制奠定了基础.     

新孢子虫致密颗粒蛋白截短型NcGRA7t的体外表达及免疫活性检测

为构建新孢子虫致密颗粒截短型NcGRA7t基因的原核表达质粒,研究其在体外细胞中的表达情况和免疫活性,运用PCR方法和基因克隆技术,构建了pGEX-4T3-NcGRA7t重组质粒,并在大肠杆菌中进行诱导蛋白表达,用SDS-PAGE和Western blot检测重组蛋白在体外的表达情况和免疫活性。结果显示:以新孢子虫的cDNA为模板,从新孢子虫Nc-1株扩增出了NcGRA7t基因,并克隆到了表达载体上。本试验成功构建了重组表达质粒pGEX-4T3-NcGRA7t,表达出的NcGRA7t重组蛋白具有免疫活性,为新孢子虫病的流行病学调查和亚单位疫苗的研究奠定了基础。     

牛卵形巴贝斯虫伴侣素CCT_η基因的克隆与生物信息学分析

对牛卵形巴贝斯虫延边株的伴侣素CCTη基因进行分子克隆,并利用生物信息学软件对CCTη基因进行了同源性、系统进化树、编码蛋白等电点、信号肽、跨膜区、糖基化位点及疏水性分析。结果显示,克隆的CCTη基因由1 008个核苷酸组成,其中编码335个氨基酸。与GenBank上发表的牛卵形巴贝斯虫CCTη基因序列(AB367928.1)同源性100%。CCTη基因编码蛋白等电点为7.32,不存在信号肽结构、跨膜区及糖基化位点。疏水性最大值3.38,最小值-3.79。本研究从CCTη基因方面近一步证实了该分离株的分子分类。