紫花苜蓿LEA基因超表达载体的构建及烟草转化

运用已克隆的紫花苜蓿MsLEA3-1基因构建植物超表达载体,将MsLEA3-1插入带有启动子rolD和终止子nos的表达载体pKYLX7中,酶切鉴定表明,目的基因已正确地插入载体中。用根癌农杆菌介导法将其转入烟草中,共获得25株卡那霉素抗性苗,对其中的4株进行PCR检测,全都扩增出目的条带;进一步对这4株进行Southern杂交检测和RT-PCR检测,发现4株系均有杂交带出现且均发生了基因转录,说明已成功获得能够表达MsLEA3-1基因的转基因烟草。     

鹅MTTP基因多态性与脂质指标和屠体性状的相关研究

利用PCR-SSCP技术检测四川白鹅(n=24)和朗德鹅(n=33)MTTP基因的第8、18和21外显子的多态性,计算基因频率和基因型频率,并将发现的多态性与鹅肝脂质指标和屠体性状进行关联分析,研究MTTP基因多态性与鹅肝脂质指标和屠体性状的相关关系。结果发现,鹅MTTP基因第21外显子130 bp处存在G→A突变,该突变位点在朗德鹅群体中表现出AA和BB 2种基因型,AA基因型鹅的肝脂质指标和屠体性状与BB基因型个体差异不显著(P0.05);在四川白鹅群体中仅存在BB基因型,鹅MTTP基因的该突变位点对鹅肝脂质指标和屠体性状的影响不显著。     

达县水土保持生态建设与管理的思考

介绍了达县水土保持生态建设和管理的成功经验,指出了达县水土保持生态建设中存在的问题,并据此提出了加强预防监督与监测工作,以生态工程项目为依托推进生态清洁小流域建设,积极探索经果林栽植方式及管护长效机制、地方和群众投入长效机制、群众利益均衡及补偿机制等对策。     

莱茵鹅15项血清生化指标的测定及分析

为了更有效地保护和利用莱茵鹅的优良基因,对北方种鹅场和双鸭山种鹅场的莱茵鹅血清进行了15项生化指标的测定及分析。结果表明:北方种鹅场和双鸭山种鹅场莱茵鹅血清三酰甘油、肌酐、直接胆红素、氯、镁、尿素氮、白蛋白和钙等血清生化指标之间的差异达到了极显著水平(P<0.01);血清总蛋白和总胆红素之间的差异达到了显著水平(P<0.05);而葡萄糖、高密度脂蛋白胆固醇、总胆固醇、无机磷和尿酸含量之间差异不显著(P>0.05)。研究还初步建立了莱茵鹅15项血清生化指标的参考值及参考范围。     

山羊β-防御素蛋白的理化性质对其抗菌活性的影响

为了解山羊内在防御系统中发挥的重要作用,在山羊防御素保守序列的基础上设计了12条不同理化性质的防御素(DGBD1~12)基因,克隆到毕赤酵母表达载体pPICZαA的EcoR I和Not I酶切位点,构建重组表达载体pPICZαA-DGBD。经SaI线性化后电击转化毕赤酵母GS115,经PCR鉴定阳性重组菌。经过摇瓶发酵和甲醇诱导,阳性重组菌的发酵上清液对大肠杆菌,金黄色葡萄球菌等具有较强的抑制作用。最小抑菌浓度测定显示重组质粒对大肠杆菌的抑制作用最强。研究结果显示,疏水指数较高的序列DGBD1~DGBD3的抗菌活性较好,稳定指数较低的序列DGBD4~DGBD6抗菌活性仅次于疏水指数,说明DGBD结构稳定性和疏水性对其抗菌活性有较大影响。     

几种化学除草剂对盾负泥虫影响的初步测定

选用北方地区大豆田和果园常用化学除草剂，用点滴，药纸，涂抹法进行对盾负泥虫影响的测定研究。结果初步表明，氟乐灵，虎威处理的卵孵化率与对照比较差异显著，分别减少２２．４％和１５．８％。而农农和２，４－Ｄ丁酯对卵的孵化率影响很小，与对照比较无显著差异。只减少３．５％和３．７％，     

纳米TiO2悬浮液对烟草青枯菌杀菌活性的研究

纳米T iO2是一种半导体光催化剂,在近紫外光的激发下,可以产生强的杀菌活性。以烟草青枯菌P seudomonas solanacearum为试验对象,采用平板稀释法对自制的纳米T iO2悬浮液进行杀菌活性测定。结果表明:在阳光或汞灯下照射4h后,T iO2对烟草青枯菌的杀菌率可达90%以上。说明用纳米T iO2防治烟草青枯病具有一定的可行性。     

大豆疫霉菌对大豆下胚轴侵染过程的细胞学研究

 接种后1.5~24h,用光镜和电镜研究了2个大豆品种与大豆疫霉菌Ps411的亲和性和非亲和性互作。观察结果表明,大豆疫霉菌对大豆下胚轴的侵染过程可分为侵入前、侵入、皮层组织中的扩展和进入维管束组织4个连续阶段。大豆下胚轴接种后在25℃保湿培养,1.5h后游动孢子即形成休止孢并萌发产生附着孢,3h后侵入表皮细胞,6h后进入皮层组织,24h后进入维管束组织。病原菌主要以侵染菌丝直接侵入表皮,表皮细胞间隙是主要侵入部位。皮层细胞是病原菌定殖和发展的主要场所,胞间菌丝侵入皮层细胞并形成吸器。在菌丝与寄主细胞接触部位的寄主细胞壁与质膜之间常有胞壁沉积物的形成。在抗病品种上病菌的侵染事件与感病品种基本一致,但不能形成正常的吸器,胞壁沉积物明显多于感病品种,菌丝在寄主组织内的扩展明显受到抑制。利用β-1,3-葡聚糖免疫金标记单克隆抗体进行的免疫细胞化学的研究表明,胞壁沉积物内含有大量的β-1,3-葡聚糖,在大豆疫霉菌菌丝壁中也存在β-1,3-葡聚糖。以上结果表明,病原菌的侵染可诱导抗病寄主细胞内β-1,3-葡聚糖迅速的合成与积累、并形成胞壁沉积物,以抵御病菌的侵染与扩展。     

新城疫病毒F48E9感染CEF细胞特异性表达基因的筛选鉴定

分别以NDV F48E9和La Sota株感染鸡胚成纤维细胞,于感染后8 h提取NDV感染CEF细胞总RNA,通过mRNA差异显示技术筛选病毒感染诱导表达的特异性基因.主要方法是先以锚定引物经反转录后,然后以9～10 bp随机引物为上游引物,以锚定引物Oligod(T)18为下游引物,进行PCR扩增,PCR产物采用8%的尿素变性PAGE胶电泳进行分离鉴定.对于特征性差异带进行第二次PCR扩增,克隆后测定其核苷酸序列.结果我们发现数个差异条带,选取差异带在500 bp以内的条带,经测序后显示经NDV F48E9感染后,有一条差异条带特异性表达的基因所编码的蛋白与Receptor(TNFRSF)-interacting serine-threonine kinase 2有47 %同源,是一个新基因,其蛋白功能不明确,有可能和细胞的凋亡有关.     

中药色谱指纹图谱技术及应用前景

简要介绍了中药色谱指纹图谱的概念,概述了中药色谱指纹图谱的研究现状,展望了其在中药质量控制领域中的应用前景.