PRRSV陕西分离株ORF5基因克隆、序列分析及原核表达

克隆猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF5基因,并进行序列分析及原核表达。根据GenBank公布的PRRSV ORF5基因的核苷酸序列,设计并合成一对特异性引物,用RT-PCR方法扩增PRRSV陕西分离株糖基化囊膜蛋白基因ORF5,将其克隆入pGEM-T载体中,进行测序及序列分析。再设计另外1对引物扩增ORF5缺失编码N端31个氨基酸残基的基因片段,将截短的ORF5基因亚克隆入原核表达载体pET-32a中,在大肠杆菌BL21中进行原核表达。结果扩增到603 bp的PRRSV全长ORF5基因,序列分析表明,分离株与北美型代表株VR-2332和欧洲型代表株LV氨基酸同源性分别为87.8%和54.5%。因此推测陕西分离株属于北美型。SDS-PAGE可检测到大小约为38 ku的融合蛋白,主要以可溶性蛋白形式存在。West-ern-blot分析表明,重组蛋白可被PRRSV阳性血清所识别。     

杆状病毒表面展示系统及其应用研究进展

杆状病毒表面展示系统是近年来发展起来的一种新的真核生物表面展示系统。通过与杆状病毒囊膜蛋白gp64融合表达或与特异性的锚定部位结合,可以将外源肽或蛋白质展示在杆状病毒表面,形成所谓的杆状病毒"假病毒",从而筛选出目的蛋白或活性肽。杆状病毒表面展示系统可用来展示需要磷酸化、糖基化、甲基化、乙酰化、羟基化、二硫键异构化等翻译后修饰,才能表现功能活性的复杂真核蛋白,以及用于构建多肽文库和抗体库、新型疫苗研制、基因治疗等方面。文章对杆状病毒表面展示系统的原理、特点和应用方面进行了综述,并对其发展前景进行了展望。     

土壤盐渍化对烟草生理生化影响的研究进展

综述了盐胁迫对烟草种子萌发、植株生长、细胞超微结构、水分代谢、离子平衡、抗氧化酶类、氮素代谢及光合作用等方面的国内外研究进展,为提高烟草的耐盐性及选育耐盐烟草新品种提供参考。     

烘烤方式对‘云烟87’烟叶质量的影响

为进一步提升烟叶烘烤水平,提高出烤烟叶质量,以‘云烟87’为材料,连续多年对当地散叶烘烤和挂杆烘烤的烤后烟叶进行对比。结果表明,随着散叶烘烤工艺的逐年改进,散叶烘烤与挂杆烘烤在烟叶外观质量上的差距逐年缩小;散叶烘烤在烟叶化学品质上明显优于挂杆烘烤,化学成分更加协调;综合来看,散叶烘烤烟叶的综合品质在逐年提升,并优于挂杆烘烤。     

微生物肥料在烟草生产中的应用

烟草是我国重要的经济作物之一。近几年来,由于化肥的大量施用及不合理的耕作制度,造成了烟田土壤肥力下降,土壤微环境受到严重的破坏,烟叶产质受到严重的影响。微生物肥料是一类以微生物生命活动及其产物导致农作物得到特定肥效应活体制品,在提高肥料利用率,改善土壤理化性质,改善烟叶产质方面有着积极的作用。综述了微生物肥料的作用机理、主要类型及在烟草生产中的应用现状和发展前景,以期为武平烤烟生产中微生物肥料的应用研究提供理论依据。     

镉胁迫对烟草生理生化的影响

镉是一种会严重污染环境的重金属,过量的镉会对植物产生毒害。镉对植物生理生化的影响在国内外已有大量的研究,但在烟草上的研究还处在起步阶段。国内外的研究成果可以为减轻重金属对烟草的毒害,规避重金属风险提供参考依据。就镉对烟草生长发育、细胞分裂、细胞超微结构、细胞膜、光合作用以及酶活性等方面的影响作一简要综述,以期为耐性烟草的选育和Cd污染的综合治理提供理论基础。     

猪细小病毒YL株序列分析及其 VP2基因原核表达

为对猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV)进行分子生物学研究,将该病毒YL株基因组分为4个重叠片段进行PCR扩增,并将扩增产物克隆到pGEM-T载体中,测定病毒基因组全长序列。另外,应用其中1对引物,通过PCR方法扩增出一段包含VP2主要抗原区域的片段,构建重组质粒pET-VP2,IPTG诱导表达。序列分析结果表明,PPV YL株和国内外PPV分离毒株NS1基因核苷酸同源性为97.8%～99.4%,氨基酸同源性为96.7%～99.5%,与国内外主要毒株VP2基因核苷酸同源性为98.7%～99.7%,氨基酸同源性为97.4%～99.8%。进化树分析表明,PPV YL株与BQ株(EU790641)毒株处在同一分支上,遗传距离最近。SDS-PAGE结果显示,表达产物分子质量为56ku,经Western blotting检测具有生物学活性。     

关于广西建设国家木材战略核心储备基地的思考

简要介绍我国木材供需状况及广西木材资源现状及特点,分析建设国家木材战略核心储备基地的优劣势,提出建立健全财政补贴制度、完善森林保险机制和木材生产金融扶持政策、实施林业基础设施倾斜支持等政策建议以及扶持龙头企业、引导集约经营、加快良种选育、强化服务体系等措施建设。     

萆薢中薯蓣皂甙的分离及其对鸡痛风的作用

本研究从萆艹解中分离出一种白色针状结晶，经薄层层析和熔点测定鉴定为薯蓣皂甙。取３００ ｇ 萆解粉，８００ ｍ Ｌ／ Ｌ 乙醇回流３ 次，每次３ ｈ，过滤后滤液减压浓缩至干，按每克萆艹解 粉加７ ｍ Ｌ蒸馏水制成皂甙水剂，比色法测定薯蓣皂甙含量为４．７８５７ ｇ／ Ｌ，将 ３０ 只痛风鸡随机分成 ３组，第Ⅰ组１０ 只为对照；第Ⅱ组１０ 只每日用肾肿清按１０ ｇ／ｋｇ 的比例拌料饲喂；第Ⅲ组１０ 只每日饮水中添加５２．５ ｍ Ｌ 皂甙水剂。每间隔３ ｄ 颈静脉采血３～５ ｍ Ｌ／只，分别测定血液尿酸、血清钙、血清磷的含量。观察临床症状，在试验第３４ ｄ 扑杀所有鸡进行病理学检查。结果表明，第Ⅱ、Ⅲ组血液尿酸含量与第Ⅰ组相比明显降低，差异显著（ Ｐ＜ ０．０５）；第Ⅱ、Ⅲ组血清钙和血清磷含量与第Ⅰ组相比差异不显著（ Ｐ＞ ０．０５）；第Ⅱ组血液尿酸、血清钙和血清磷含量与第Ⅲ组相比差异不显著（ Ｐ＞ ０．０５）。第Ⅱ组、第Ⅲ组治愈率分别为６０％ 、８０％ ．