细粒棘球蚴重组St-Eg 95-Eg.ferritin疫苗构建及生物学特性检测

构建表达细粒棘球蚴Eg95-Eg.ferritin融合蛋白的重组口服减毒鼠伤寒沙门菌活载体疫苗株并评价其生物学特性。将细粒棘球蚴Eg95-Eg.ferritin融合基因插入到表达载体pYA3341中,构建重组质粒pYA3341-Eg95-Eg.ferritin,将重组质粒分别电转入减毒鼠伤寒沙门菌X3770和X4550,获得重组疫苗菌株St-Eg95-Eg.ferritin,对重组菌的稳定性、生长状态及安全性进行分析。结果表明,经PCR和酶切鉴定成功构建重组质粒pYA3341-Eg95-Eg.ferritin,Western blot检测Eg95-Eg.ferritin蛋白在重组菌中获得表达;生物学特性研究结果表明,重组质粒可稳定存在,且不影响重组菌的生长状态,小鼠口服试验证实,重组菌安全无毒性。成功构建能稳定表达细粒棘球蚴Eg95-Eg.ferritin融合蛋白的口服减毒鼠伤寒沙门菌活载体疫苗株,将为研究包虫病口服基因工程疫苗奠定基础。     

奶牛子宫内膜炎诊断方法综述

奶牛子宫内膜炎是奶牛产后的多发病之一,产后子宫感染是一种非特异性感染,主要致病菌有分泌型化脓菌、埃希氏大肠杆菌及其他多种革兰氏阴性厌氧菌[1]. 1 临床诊断 急性子宫内膜炎和慢性子宫内膜炎都有明显的临床症状.患牛一般体温升高,食欲下降,精神沉郁,产奶量下降,有时弓背、举尾、努责,常作排尿姿势,经常从阴道内流出多量黏性分泌物,结合情期变化和黏液性质,可以建立初步诊断,尤其是在奶牛产后20～26 d检查,其结果将更为准确.如量多而稀薄,形如蛋清样,就可视为卡他性子宫内膜炎;如量少而浓稠,形如脓痰样,就可视为脓性子宫内膜炎[2].     

PRRSV陕西分离株ORF5基因克隆、序列分析及原核表达

克隆猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF5基因,并进行序列分析及原核表达。根据GenBank公布的PRRSV ORF5基因的核苷酸序列,设计并合成一对特异性引物,用RT-PCR方法扩增PRRSV陕西分离株糖基化囊膜蛋白基因ORF5,将其克隆入pGEM-T载体中,进行测序及序列分析。再设计另外1对引物扩增ORF5缺失编码N端31个氨基酸残基的基因片段,将截短的ORF5基因亚克隆入原核表达载体pET-32a中,在大肠杆菌BL21中进行原核表达。结果扩增到603 bp的PRRSV全长ORF5基因,序列分析表明,分离株与北美型代表株VR-2332和欧洲型代表株LV氨基酸同源性分别为87.8%和54.5%。因此推测陕西分离株属于北美型。SDS-PAGE可检测到大小约为38 ku的融合蛋白,主要以可溶性蛋白形式存在。West-ern-blot分析表明,重组蛋白可被PRRSV阳性血清所识别。     

梅花鹿铜缺乏症的诊治

2006年10月中旬,宁夏石嘴山某梅花鹿场的不同年龄段的鹿出现以后肢摇摆、瘫痪为特征的疾病,根据流行情况调查、临床症状、病理学检查及微量元素的测定,初步诊断为铜缺乏症,此后,采取相应的防治措施,取得良好治愈效果.