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从鼠的肝脏组织中提取总 RNA,采用 RT- PCR获得了鼠层粘蛋白 ( laminin)α5链的 E3 ( L G4 - 5)、L G4 和 L G5等 3个基因片段 ,与 NCBI数据库参考序列相比 ,同源性在 99%以上。将 E3 ( L G4 ,5)、L G4 和 L G5定向克隆到原核高效表达载体 Pet- 2 8a中 ,构建 Pet- 2 8a- E3 、Pet- 2 8a- L G4 、Pet- 2 8a- L G5等 3个原核表达质粒。将表达质粒转化表达受体菌 BL2 1中 ,IPTG诱导表达。收集菌液进行 SDS- PAGE电泳、Western- blotting分析 ,结果显示 ,这 3段基因在原核细胞中成功表达 ,薄层扫描显示表达蛋白占细胞总蛋白的 2 0 %以上。大量提取包涵体 ,纯化后免疫家兔 ,8周后得多克隆抗体 ,间接 EL ISA在抗体稀释到 1∶ 1 2 80 0时仍为阳性 相似文献
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为探明过氧化氢(H2O2)提高燕麦耐碱性的作用,以‘定莜6号’幼苗为材料,采用珍珠岩栽培方法,在幼苗三叶一心期根部浇灌75 mmol·L-1 NaHCO3或添加二甲基硫脲(DMTU,H2O2淬灭剂)或抗坏血酸(ASA,H2O2清除剂)模拟碱胁迫,通过叶面喷施0.01 mmol·L-1 H2O2来观测H2O2对碱胁迫下幼苗生长、活性氧代谢和渗透溶质积累的影响。结果表明:喷施H2O2 能够缓解NaHCO3胁迫对燕麦幼苗生长的抑制,降低幼苗叶片O 2 · - 、H2O2和丙二醛含量,提高超氧化物歧化酶、抗坏血酸过氧化物酶等抗氧化酶活性和非酶抗氧化剂抗坏血酸、谷胱甘肽含量;使过氧化氢酶、过氧化物酶活性及渗透溶质可溶性糖、游离氨基酸和脯氨酸含量显著降低,有机酸和叶绿素含量明显提高,而可溶性蛋白质含量则变化不大;添加DMTU和ASA后有效逆转了喷施H2O2对NaHCO3胁迫燕麦生长受抑和生理响应的调节。采用主成分和隶属函数分析显示,喷施H2O2显著提高了NaHCO3胁迫下燕麦幼苗的综合评价值,添加DMTU和ASA完全或部分逆转了H2O2的作用。因此,外源H2O2是通过调控活性氧代谢和渗透调节来缓解碱胁迫导致的氧化伤害和生长抑制,从而增强燕麦幼苗的耐碱性。 相似文献
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HUANG Ping ZHANG Jia-bao XIN Xiu-li ZHU An-ning ZHANG Cong-zhi MA Dong-hao ZHU Qiang-gen YANG Shan WU Sheng-jun 《中国农业科学(英文版)》2015,(1)
Cropland productivity has been signiifcantly impacted by soil acidiifcation resulted from nitrogen (N) fertilization, especialy as a result of excess ammoniacal N input. With decades’ intensive agricul... 相似文献
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自助借还作为一种先进的图书馆管理设备,已在很多图书馆中使用。本文通过自助借还机在石河子大学的使用实践,分析了自助借还系统的优势和不足,并提出相应的改进措施。 相似文献
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