新城疫病毒单抗酶联试剂盒与RT-PCR方法检测新城疫强毒感染的比较

新城疫 ( ND)是威胁我国养禽业的头号疾病 ,病原是新城疫病毒 ( NDV)。 NDV只有一个血清型 ,其抗原性一致 ,但毒力差异很大。强毒毒株可引起易感鸡群高发病率和高死亡率的典型 ND,在免疫鸡群则引起低死亡率的非典型 ND;弱毒株不致病 ,有的弱毒株还被用作弱毒疫苗。由于弱株在自     

动物疫病和食品安全控制问题

根据SPS协定附件A对国际标准、准则和建议的定义,有关动物疫病和食品安全控制的标准是国际兽疫局(InternationalOfficeofEpizootics,OIE)制定的<国际动物卫生法典>和以及国际食品法典委员会(CodexAlimentariusCommission,CAC)制定食品添加剂、兽药、农残、污染物的限量标准和准则.<法典>规定了能引起严重社会经济或公共卫生后果、具有重大影响的15种A类传染病和90种B类传染病作为法定报告的传染病.我们所说的动物疫病主要是指A类疾病和B类疾病,它们不仅对我国的养殖业造成巨大经济损失,而且会严重影响动物和动物产品的贸易.食品污染已成国患,保证食品安全已刻不容缓.     

应用属特异单抗和分属噬菌体鉴定沙门氏菌分离株的比较研究

本研究应用属特异单抗和分属噬菌体对102株疑似沙门氏菌分离株进行鉴定,并以标准程序作验证。结果表明,属特异单抗ELISA反应阳性的77株菌株中,76株为沙门氏菌,1株为弗劳地氏柠檬酸杆菌;而分属噬菌体O-I裂解阳性的74株细菌中,72株为沙门氏菌,2株为大肠杆菌,同时出现了漏检。这预示着属特异单抗试剂在沙门氏菌鉴定和快速检验中有很广阔的应用前景。     

多重PCR方法快速检测粪样中产气荚膜梭菌

建立了多重聚合酶链反应 (multiplexPCR)检测产气荚膜梭菌的α_毒素和肠毒素 (enterotoxin)基因。该方法可以检测猪粪便样品或小肠内容物中肠毒性产气荚膜梭菌。首先猪粪便样品经前处理后 ,接种选择性培养基 ,再挑取单个菌落溶于超纯水中 ,煮沸提抽 ,制备样品DNA ,进行PCR检测。从实验中我们成功的扩增出 32 4bp的α毒素基因片段和 2 33bp的肠毒素基因片段。以人工污染样品 10倍系例稀释后进行检测 ,该方法的检测灵敏度达到 1.0× 10 4 CFU/g并对 5 8份猪粪便样品检测 ,获得 5 3株产气荚膜梭菌 ,分离率为 91%,其中 4株为带有肠毒素的产气荚膜杆菌 ,占整个分离菌株的 7.5 %。因此多重PCR方法在检测粪样中的产气荚膜梭菌是一种非常有用的方法并可以快速检出肠毒素 ,从而避免了使用动物作定型试验。     

硅对铝酸毒害下黄瓜生长发育的影响

采用盆栽试验和田间试验方法,研究硅对铝酸毒害下黄瓜幼苗MDA含量、POD活性等生理指标及黄瓜整个生长发育过程的影响.结果表明,2 mmol/L的AlCl3对黄瓜幼苗的生长发育有明显的抑制作用,当AlCl3浓度达到10 mmol/L时,严重抑制黄瓜的生长发育;加硅处理可以缓解铝酸毒害对黄瓜生长发育的抑制作用,缩短座果期,促进雌花开放,减少畸形瓜数.硅增强黄瓜对铝酸毒害抗性的最佳处理浓度范围在0.01～1.00 mmol/L;加硅处理可以显著降低黄瓜幼苗叶片中丙二醛(MDA)含量,显著增加过氧化物酶(POD)等保护酶的活性,减轻了黄瓜叶片膜脂的过氧化程度.生产上可通过加硅处理增加黄瓜对铝酸盐毒害的抗性,可进一步研究硅对铝酸酸化土壤的修复作用,进而通过施用硅肥增加黄瓜等经济作物的产量.     

抗鸡白痢沙门氏菌单抗及其在鸡白痢病检疫中的应用研究

应用淋巴细胞杂交瘤技术制备了一组针对鸡白痢沙门氏菌O_9抗原的单抗。以单抗3-47-26酶结合物和鸡白痢沙门氏菌脂多糖抗原建立了一种抗体竞争ELISA试验以检疫鸡白痢病,该法通过样品抑制酶标单抗与LPS的结合,以检测鸡白痢抗体。试验结果表明,79份鸡白痢阳性血清具有显著抑制作用(95.0％±4.3％),而130份鸡白痢阴性     

鸡痘病毒基因组DNA复制非必需片段的鉴定

将中国鸡痘病毒鹌鹑化弱毒株（２８２Ｅ４）蚀斑纯化，在ＳＰＦ鸡胚成纤维细胞上增殖后，经超声波裂解，蔗糖梯度离心得到纯化病毒，以蛋白酶Ｋ消化，酚：氯仿、氯仿和水饱和乙醚抽捉，乙醇沉淀，得到ＦＰＶ基因组ＤＮＡ，后用ＥｃｏＲｌ消化，随机克隆到ｐＵＣ１８质粒中。限制性内切酶片段电泳分析结果表明，克隆到１０个不同大小的片段，根据酶切图谱分析，选取克隆或亚克隆后的单一酶切位点，插入标记基因（Ｐ１１一ＩａｃＤ筛选出３个复制非必需片段。为进一步构建表达外源片段重组质粒载体创造了良好的条件。     

鸡痘病毒ORF073基因克隆及原核表达

根据已经发表的鸡痘病毒(FPV)美国致病株的ORF073基因序列,设计1对引物,分别以282E4FPV、LP株FPV、102E6FPV为模板,扩增出目的片段,将其克隆到pGEM-TEasy载体中,经酶切鉴定证实,并进行序列测定。目的片段包含了大小为522 bp的ORF073基因,与GenBank上的AF198100(FPVUS)和AJ581527(FP9)序列进行序列比较分析表明:3种病毒株的ORF073基因与鸡痘病毒美国致病株(FPVUS)和英国弱毒株(FP9)完全一致。克隆的ORF073基因与原核表达载体pET-28a构建重组表达载体,经IPTG诱导,在BL21(DE3)细菌中表达了分子质量约32 ku的蛋白。     

新城疫病毒F_（48）E_8株cDNA文库的构建

以ＳＰＦ鸡胚繁殖我国标准新城疫病毒Ｆ＿（４８）Ｅ＿８强毒株，经蔗糖密度梯度超速离心纯化病毒。再以酚－ＳＤＳ法提取病毒基因组ＲＮＡ，作为反应模板、采用Ｐｒｏｍｅｇａ公司商品试剂盒合成双股ｃＤＮＡ。以同聚物加尾的方法将ｃＤＮＡ克隆到质粒ｐＧＥＭ３Ｚｆ（一）中，经ＡＩＸ平板筛选，限制性内切酶分析和Ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ标记的核酸探针检测，共获得插入外源片段大小在０．６～４．８ｋｂ的阳性克隆７５个，初步构建了Ｆ＿（４８）Ｅ＿８株的ｃＤＮＡ文库     

有机红枣生产管理规程

2004年临县有机红枣生产基地通过了国家有机产品各项指标检验，获得中国认证中心全国红枣首家认证。有机红枣是指来自于有机红枣生产体系，根据国家有机产品生产要求和相应的标准，并通过国家有机食品认证机构认证的红枣产品。有机红枣是一种环保型安全食品。要求生产程序符合有机生产规范、环境（空气、土壤、水质等）无污染。生产过程中绝对禁止使用农药、化肥、激素等人工合成物质。