| 多重PCR方法快速检测粪样中产气荚膜梭菌 |
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| 引用本文： | 文其乙,刘秀梵.多重PCR方法快速检测粪样中产气荚膜梭菌[J].中国预防兽医学报,2002,24(1):48-51. |
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| 作者姓名： | 文其乙 刘秀梵 |
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| 作者单位： | 扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室,江苏,扬州,225009 |
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| 摘 要： | 建立了多重聚合酶链反应 (multiplexPCR)检测产气荚膜梭菌的α_毒素和肠毒素 (enterotoxin)基因。该方法可以检测猪粪便样品或小肠内容物中肠毒性产气荚膜梭菌。首先猪粪便样品经前处理后 ,接种选择性培养基 ,再挑取单个菌落溶于超纯水中 ,煮沸提抽 ,制备样品DNA ,进行PCR检测。从实验中我们成功的扩增出 32 4bp的α毒素基因片段和 2 33bp的肠毒素基因片段。以人工污染样品 10倍系例稀释后进行检测 ,该方法的检测灵敏度达到 1.0× 10 4 CFU/g并对 5 8份猪粪便样品检测 ,获得 5 3株产气荚膜梭菌 ,分离率为 91%,其中 4株为带有肠毒素的产气荚膜杆菌 ,占整个分离菌株的 7.5 %。因此多重PCR方法在检测粪样中的产气荚膜梭菌是一种非常有用的方法并可以快速检出肠毒素 ,从而避免了使用动物作定型试验。
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| 关 键 词： | 产气荚膜梭菌 α－毒素 肠毒素 多重聚合酶链反应 粪样 检测 |
| 文章编号： | 1008-0589(2002)01-0048-04 |
| 修稿时间： | 2001年4月5日 |
Multiplex PCR Assay for the Rapid Detection of Clostridium Perfringens in Feces of Pigs |
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| WEN Qi_yi,LIU Xiu_fan.Multiplex PCR Assay for the Rapid Detection of Clostridium Perfringens in Feces of Pigs[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2002,24(1):48-51. |
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| Authors: | WEN Qi_yi LIU Xiu_fan |
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