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表达HAV结构基因的重组腺病毒鉴定及细胞病变分析 总被引:1,自引:0,他引:1
利用RT-PCR方法,从HAV-L8株的RNA中扩增出结构基因(vp3 vp1),克隆到穿梭质粒pXCX2NotI上。采用磷酸钙-DNA共沉淀技术,将腺病毒载体pJM17与pXCX2-CMV-HAV共转染293细胞。在光学显微镜下观察到明显的细胞病变(CPE);经RT-PCR、免疫荧光染色和蛋白印迹鉴定证明HAV的结构基因已插入到腺病毒基因组中;在电子显微镜下观察发现有二十面体的病毒颗粒。以上结果表明获得了重组腺病毒rAdHAV,纯化后的rAdHAV滴度为1×109.0TCID50/mL。 相似文献
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为了在体外研究紫花地丁黄酮类提取物抗鸡传染性支气管炎病毒(IBV—M41)的作用,以鸡胚肾细胞为宿主细胞,阿昔洛韦为阳性对照药物,通过观察细胞病变效应(CPE)与空斑减数试验测定紫花地丁黄酮类提取物抗IBV活性,计算其IC50与治疗指数,并从药物对病毒的直接灭活作用、对病毒吸附的影响及对病毒穿膜的影响3个方面初探紫花地丁黄酮类提取物抗IBV活性的机理。结果:紫花地丁黄酮类提取物能明显抑制IBV的致病变作用,其IC50为16.52mg/L,TI值为15.76。研究显示,紫花地丁黄酮类提取物在体外对IBV直接灭活的效果明显,在高浓度时对抑制IBV吸附与穿入细胞具有一定作用。结果表明:紫花地丁黄酮类提取物在体外有明显的抗IBV感染作用,且主要是通过直接灭活IBV而发挥作用。 相似文献
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为了研究伪狂犬病病毒,从而预防该病的发生。[方法]对PK15、Vero、BHK、CEF 4种细胞增殖猪伪狂犬病病毒后细胞病变进行比较,并对4种细胞增殖的PRV分别进行毒价测定。[结果]4种细胞增殖PRV毒价分别为:PK15细胞107.15TCID50/ml;BHK细胞107.00TCID50/ml;Vero细胞106.96TCID50/ml;CEF细胞106.70TCID50/ml。[结论]PRV毒株在不同细胞上增殖CPE表现不同,毒价也存在差异。 相似文献
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构建了重组逆转录病毒表达质粒plxas-N,该质粒能表达互补猪传染性胃肠炎病毒N基因全长的反义RNA序列。用质脂体方法将重组质粒plxas-N转染至PA317细胞中,经抗生素G418(500μg/ml)筛选出稳定的产毒细胞克隆。分别扩大培养细胞克隆,取其上清液感染小鼠成纤维细胞NIH3T3,测定细胞克隆产生的重组病毒滴度,并用高滴度重组病毒感染IBRS2细胞。提取被感染的IBRS2细胞的总RNA,RT-PCR证明plxas-N整合到IBRS2细胞基因组。通过TGEV分别感染IBRS2和IBRS2抗性细胞产生的病变,结果表明该反义RNA对病毒的复制有抑制作用,其抑制率近50%。 相似文献
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应用电镜技术对水泡性口炎病毒在BHK-21上的形态发生和增殖规律进行观察.结果表明:VSV能导致BHK-21细胞圆缩,胞浆严重空泡化,线粒体嵴断裂及空泡化;病毒在细胞浆内复制、增殖,在细胞膜和线粒体膜以出芽方式获得囊膜而成熟. 相似文献
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程泽华 《山西农业大学学报(自然科学版)》2003,23(2):143-144,154
猪瘟兔化牛睾丸细胞苗在生产中,常出现疫苗毒价不达标的问题。其主要的原因是在生产中使用了含BVD/MD抗体的犊牛血清。试验过程中,采用合格的疫苗与标准的BVD/MD抗血清中和,然后再加入标准BVD/MDV,接种BT细胞,结果出现CPE。证实了疫苗中的HCV与BVD/MD抗体发生了结合。故生产前对血清中BVD/MD抗体的检测是不可忽视的。 相似文献
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The effect of water regimes and soil moisture stress on total nodule number, effective nodule number, nodule dry weight, nitrogenase activity and nitrogen fixation in soybean was studied. The effective nodule number, nodule weight, nitrogenase activity and nitrogen fixation increased due to increase in water regimes from 0.4 to 0.6 Cumulative Pan Evaporation (CPE). The stress during either flowering or pod filling reduced the effective nodule number, nodule weight, nitrogenase activity and nitrogen fixation. The amount of nitrogen fixed was maximum with 0.8 CPE (50.09 kg ha-1 season-1) followed by 0.6 CPE (42.08 kg ha-1 season-1) and 0.4 CPE (33.04 kg ha-1 season-1). The amount of nitrogen fixed was reduced by 17.71 % and 26.39 % due to stress during flowering and pod filling respectively compared to normal irrigation. 相似文献
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猪瘟病毒生物学特性研究的一些新进展 总被引:2,自引:0,他引:2
罗廷荣 《广西农业生物科学》2001,20(1):55-57
本文综述了近年来对猪瘟病毒的生物学特性研究的一些新进展。许多研究表明 ,在抗原性、病原性、病理和遗传特性方面均显示出一致的多样性分布。在细胞培养特性方面 ,猪瘟病毒一般不能引起细胞病变 ,但研究者也培养出一种来源于猪贤的 FS L 3细胞系 ,接种猪瘟病毒后可引起细胞病变 ,对该病毒的进一步研究将非常有益 相似文献