复方术芩提取液体外抗PEDV感染PK-15细胞的作用效果

为探讨复方术芩提取液体外抗猪流行性腹泻病毒(PEDV)感染Vero细胞作用效果,以Vero细胞为宿主细胞,通过检测药物抗PEDV活性,计算其IC50和治疗指数TI,并从药物对PEDV的直接灭活作用、阻滞作用、吸附抑制、穿入抑制及复制抑制5个方面探讨复方术芩抗PEDV作用机理。结果显示复方术芩提取液能明显抑制PEDV的致病变作用,其IC50为17.41mg/L,TI为23.40。各浓度术芩提取液对PEDV病毒复制过程中均有一定的抑制作用,其中直接灭活作用和复制抑制试验效果比较明显,且质量浓度C=100mg/L,与病毒对照相比差异极显著(P<0.01),质量浓度C≥25mg/L,细胞保护率均超过50%。而阻滞试验、吸附抑制试验和穿入抑制试验,药物质量浓度需要达到100mg/L才出现显著的保护作用。表明复方术芩提取液在体外抗PEDV主要是通过对病毒的直接灭活和对病毒复制抑制而达到抗病毒功效。     

盐酸川芎嗪体外抗IBDV活性及其作用机制

为在体外成纤维细胞培养体系上探讨盐酸川芎嗪抗鸡传染性法氏囊病病毒的活性及其作用机制,采用MTT法结合细胞病变观察法,通过病毒感染抑制、复制抑制、吸附抑制和直接灭活试验进行评价。结果显示,盐酸川芎嗪在体外对鸡传染性法氏囊病病毒具有较强的作用,其EC50为（92．52±21．13）mg／L,SI≥21．62,最大抑制率达83．7％;盐酸川芎嗪对病毒具有较强的直接杀灭作用,但不能阻止病毒吸附;在复制抑制试验中,盐酸川芎嗪的抗病毒作用具有时间依赖性,分别在病毒吸附O、2、4h时将盐酸川芎嗪加入到体系中,盐酸川芎嗪显示出较强的抗病毒作用,随着病毒吸附时间的延长,盐酸川芎嗪对鸡传染性法氏囊病病毒的抑制作用逐渐减弱。结果表明,盐酸川芎嗪可通过直接杀灭鸡传染性法氏囊病病毒或／和干扰其早期复制过程而表现出抗病毒活性。     

垂花香薷抗鸡传染性支气管炎病毒的效果分析

为研究中药垂花香薷抗鸡传染性支气管炎病毒(IBV)的作用,采用体外细胞培养的方法,对中药垂花香薷提取物进行抗IBV活性试验。结果表明,在TCID50为10-3.75时,阻断、抑制IBV的最佳浓度分别为3.91 mg/mL、1.96 mg/mL。     

黄芩苷体外抗传染性法氏囊病病毒作用

为探讨黄芩苷体外抗传染性法氏囊病病毒(IBDV)感染鸡胚成纤维细胞系(DF1)作用机制,以DF1细胞为宿主细胞,利巴韦林为阳性对照药物,从黄芩苷对IBDV的直接灭活作用、阻滞作用、抑制吸附、穿入及其复制5个方面探讨黄芩苷抗IBDV机理。结果显示,黄芩苷的CC50为(206.48±12.74)mg/L,EC50为(46.76±3.15)mg/L,选择指数SI为4.415,在无毒质量浓度范围内其对IBDV的最高抑制率为72.02%;在阻滞试验和复制抑制试验中最高抑制率分别达到60.85%和68.11%;在病毒吸附、穿入抑制和直接灭活试验中抑制率很低,表明黄芩苷不能阻断IBDV对DF1细胞的吸附、穿入和直接灭活。结果表明,黄芩苷在体外可有效抑制IBDV对DF1细胞的感染,其抗病毒机制可能是干扰病毒的复制和阻滞,提示黄芩苷可作为预防及治疗传染性法氏囊病病毒的药物。     

泰山松花粉多糖体外抗鸡传染性法氏囊病病毒的效果

鸡传染性法氏囊超强毒株(vvIBDV)可引起鸡群高死亡率及严重的免疫系统损伤,给养禽业带来巨大的经济损失。为探讨泰山松花粉多糖(TPPPS)体外抗vvIBDV感染鸡胚成纤维细胞(DF-1)作用机制,以DF-1细胞为宿主细胞,利巴韦林(Ribavirin)为抑病毒对照药物,从TPPPS对病毒的直接灭活作用、阻滞作用、抑制吸附及其复制4个方面探讨TPPPS抗vvIBDV机理。结果显示,在无毒质量浓度范围内TPPPS对vvIBDV的最高抑制率为92.4%,Ribavirin的最高抑制率仅为76.7%;在阻滞试验和抑病毒吸附试验中最高抑制率分别达到91.85%和78.36%;在抑制病毒复制试验和直接灭活病毒试验中抑制率很低,表明TPPPS不能抑制病毒复制和直接灭活病毒。结果表明,TPPPS在体外可有效抑制vvIBDV对DF-1细胞的感染,推测其抗病毒机制是TPPPS预处理DF-1细胞从而结合了病毒颗粒在细胞表面的吸附位点及病毒与多糖直接相互作用抑制病毒吸附细胞,或两种作用同时存在。提示TPPPS可作为预防及治疗超强鸡传染性法氏囊病病毒感染的药物。     

盐酸川芎嗪体外抗IBDV活性及其作用机制

为在体外成纤维细胞培养体系上探讨盐酸川芎嗪抗鸡传染性法氏囊病病毒的活性及其作用机制,采用MTT法结合细胞病变观察法,通过病毒感染抑制、复制抑制、吸附抑制和直接灭活试验进行评价。结果显示,盐酸川芎嗪在体外对鸡传染性法氏囊病病毒具有较强的作用,其EC50为(92.52±21.13)mg/L,SI≥21.62,最大抑制率达83.7%;盐酸川芎嗪对病毒具有较强的直接杀灭作用,但不能阻止病毒吸附;在复制抑制试验中,盐酸川芎嗪的抗病毒作用具有时间依赖性,分别在病毒吸附0、2、4h时将盐酸川芎嗪加入到体系中,盐酸川芎嗪显示出较强的抗病毒作用,随着病毒吸附时间的延长,盐酸川芎嗪对鸡传染性法氏囊病病毒的抑制作用逐渐减弱。结果表明,盐酸川芎嗪可通过直接杀灭鸡传染性法氏囊病病毒或/和干扰其早期复制过程而表现出抗病毒活性。     

紫花地丁香豆素类提取物体外对新城疫病毒抑制作用的研究

试验旨在探究紫花地丁香豆素类提取物体外对新城疫病毒的抑制作用。试验以紫花地丁为材料，制备紫花地丁香豆素提取物体，利用高效液相色谱法检测提取物中秦皮甲素和秦皮乙素的含量，利用CCK-8方法检测紫花地丁香豆素类提取物对新城疫病毒（NDV）感染鸡胚成纤维细胞的影响。结果表明，紫花地丁中秦皮甲素和秦皮乙素的含量分别为2.58、7.66 mg/g；紫花地丁香豆素类提取物在DF-1细胞中的半数致死浓度为185.2 mg/L。紫花地丁香豆素提取物浓度以剂量依赖的方式抑制NDV的复制，当提取物浓度为100 mg/L时，对NDV的复制抑制率最高，为74.31%。在NDV吸附抑制中，当紫花地丁香豆素类提取物作用浓度为100 mg/L时，对NDV吸附抑制率最高，为67.4%。研究表明，紫花地丁香豆素类提取物在体外具有明显的抗NDV感染作用。     

龙胆草及其提取物体外抗猪繁殖与呼吸综合征病毒作用的研究

为研究龙胆草水提取物、龙胆草总黄酮、龙胆草总苷体外抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的作用,本试验建立Marc-145细胞模型,在研究其对Marc-145细胞最大安全浓度的基础上,结合细胞病变形态观察和MTT法,设立药物组、利巴韦林阳性对照组、病毒对照组和细胞对照组,对病毒进行阻断、抑制和直接灭活3种作用方式的测定。结果显示,龙胆草水提取物、龙胆草总黄酮、龙胆草总苷和利巴韦林的最大安全浓度分别为6.250、0.020、0.630和0.016 mg/mL。在体外抗PRRSV作用的试验中,龙胆草水提取物对病毒的阻断、抑制和直接灭活作用的最高抑制率分别为43.1%、57.4%和56.4%,均低于阳性对照利巴韦林,且各作用方式下细胞均发生了明显病变。龙胆草总黄酮对病毒的阻断、抑制和直接灭活作用的最高抑制率分别为66.1%、41.1%和42.7%,其抑制作用和直接灭活作用的抑制率均低于阳性对照利巴韦林,阻断作用下细胞轻微病变。龙胆草总苷对病毒的阻断、抑制和直接灭活作用的最高抑制率分别为33.4%、78.2%和81.9%,其抑制和直接灭活作用较强,远高于阳性对照利巴韦林,且在这两种作用方式下细胞基本保持单层完好。综合3种作用方式,3种龙胆草提取物中龙胆草总苷抗PRRSV的效果最好,其次是龙胆草水提取物和龙胆草总黄酮。     

龙胆草及其提取物体外抗猪繁殖与呼吸综合征病毒作用的研究

为研究龙胆草水提取物、龙胆草总黄酮、龙胆草总苷体外抗猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）的作用，本试验建立Marc-145细胞模型，在研究其对Marc-145细胞最大安全浓度的基础上，结合细胞病变形态观察和MTT法，设立药物组、利巴韦林阳性对照组、病毒对照组和细胞对照组，对病毒进行阻断、抑制和直接灭活3种作用方式的测定。结果显示，龙胆草水提取物、龙胆草总黄酮、龙胆草总苷和利巴韦林的最大安全浓度分别为6.250、0.020、0.630和0.016 mg/mL。在体外抗PRRSV作用的试验中，龙胆草水提取物对病毒的阻断、抑制和直接灭活作用的最高抑制率分别为43.1%、57.4%和56.4%，均低于阳性对照利巴韦林，且各作用方式下细胞均发生了明显病变。龙胆草总黄酮对病毒的阻断、抑制和直接灭活作用的最高抑制率分别为66.1%、41.1%和42.7%，其抑制作用和直接灭活作用的抑制率均低于阳性对照利巴韦林，阻断作用下细胞轻微病变。龙胆草总苷对病毒的阻断、抑制和直接灭活作用的最高抑制率分别为33.4%、78.2%和81.9%，其抑制和直接灭活作用较强，远高于阳性对照利巴韦林，且在这两种作用方式下细胞基本保持单层完好。综合3种作用方式，3种龙胆草提取物中龙胆草总苷抗PRRSV的效果最好，其次是龙胆草水提取物和龙胆草总黄酮。     

石香薷挥发油体外抗病毒作用研究

采用有机溶剂法提取了石香薷挥发油，采用体外细胞培养的方法研究石香薷挥发油对新城疫病毒(NDV)感染的拮抗作用，测定其对鸡胚成纤维细胞的最大无毒浓度(TDo)、半数细胞中毒浓度(TD50)、抑制50％细胞病变的药物浓度(IC50)、治疗指数(TI)及体外抗NDV效果。试验结果表明：石香薷挥发油的TDo、TD50、IC50、TI分别为1．56g／l、3.13g/l、0.20g/l、15．65，石香薷挥发油0．79g/l对NDV所致的CPE有明显的抑制作用，证明石香薷挥发油具有明显的抗NDV作用，提示石香薷挥发油可以作为一种新的抗NDV感染的药物。     

紫花地丁总生物碱抗病毒与抑菌试验

研究紫花地丁（维药名比来不喜）的生物学活性,考察了总生物碱的抗病毒、药敏活性,观察其抗病毒和抑菌作用。试验结果显示,紫花地丁总生物碱有抗鸡新城疫病毒作用;对大肠埃希氏杆菌有一定的抑菌活性;对金黄色葡萄球菌的抑菌活性不明显。     

复方中草药饲料添加剂替代抗生素对肉仔鸡生产性能的影响

采用随机单位组设计,将1 000羽白羽肉仔鸡随机分为五组。Ⅰ组(基础日粮+黄霉素75mg/kg和洛克沙胂45.75mg/kg),Ⅱ组(基础日粮+中草药0.3%水平),Ⅲ组(基础日粮+中草药0.4%水平),Ⅳ组(基础日粮+中草药0.3%水平+甜菜碱),Ⅴ组(基础日粮)。结果表明:中草药添加剂0.3%水平组(Ⅱ、Ⅳ组)与抗生素组、对照组的活重、料重比、日增重、采食量的差异极显著(P0.01),该中草药组方的0.3%水平为最适添加量。     

药用植物紫花地丁的分子鉴定及其亲缘关系研究

运用RAPD技术对传统药用植物紫花地丁（Viola yedoensis）及其7个近缘种进行了分析,筛选出的6个随机引物在8个种39份材料中共扩增出163个位点,其中161个位点具有多态性,占98.7%;在扩增产物中有7条特异性扩增条带可用于紫花地丁的鉴定。根据RAPD结果计算的各种间遗传距离的范围为0.022 7-0.424 4,斑叶堇菜与细距堇菜的亲缘关系最近,它们间的遗传距离最小（0.022 7）,而与紫花地丁遗传距离最近的是早开堇菜,为0.147 1。在所研究的类群中,维西堇菜与裂叶堇菜的遗传距离最大（0.424 4）。根据遗传距离所作的聚类分析结果与紫花地丁等8种植物的形态分化相一致,此外,同一种的不同个体总是先聚在一起,反映了种内不同个体在遗传组成上相对一致性。研究结果表明,RAPD在种内是相对稳定的,能快速、准确地应用于紫花地丁的分子鉴定及其与近缘类群关系的研究。     

当归总黄酮提取工艺及体外抗氧化性研究

目的：探讨当归中总黄酮的提取工艺及抗氧化性。方法：在单因素实验的基础上,采用L9（34）正交试验,通过亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠法测定当归总黄酮的含量,并对提取液采用Feton体系、邻苯三酚自氧化体系、普鲁士兰法进行体外抗氧化活性研究。结果：当归中总黄酮的最佳提取工艺：提取温度为80℃,乙醇浓度为75%,提取时间为3.5 h,料液比为1∶30。在最佳提取工艺条件下,当归中总黄酮提取量为9.4642 mg/g。所得提取液总黄酮浓度为0.068 mg/mL时,对羟基自由基清除率可达到74.02%;浓度为0.034 mg/mL时,对超氧阴离子抑制率可达51.79%。结论：采用该方法提取当归总黄酮,回收率高,精密度好,加标回收率99.51%,相对标准偏差RSD 4.04%（n=5）。所得提取液对羟基自由基、超氧阴离子均有较强的清除效果,且清除效果与提取液总黄酮浓度呈明显量效关系。     

中药制剂对禽流感病毒H9N2、新城疫病毒、传染性支气管炎病毒和鸡毒支原体的攻毒保护试验

采用以野菊花、穿心莲、柴胡等10味中药提取的中药制剂,连续给22日龄SPF鸡口服5 d后,以禽流感病毒H9N2、新城疫病毒F4、传染性支气管炎病毒强毒株M41和支原体S6强毒分别攻击,观察SPF鸡临床症状、发病率、病理学变化和分离病毒。结果表明,此中药制剂75 mg/只口服组,新城疫病毒、禽流感病毒和传染性支气管炎病毒攻击后发病率分别为12.5%,0%,10%;37.5 mg/只剂量口服组发病率分别为50%,10%,10%,且低剂量组病毒分离阳性。攻击支原体后,以上两个剂量组SPF鸡病变指数分别3.5和5.5,研究证实本中药制剂可以控制以上4种病原所致的家禽呼吸道病的发生。     

沙冬青总生物碱体外抗牛病毒性腹泻病毒

为了探讨沙冬青总生物碱抗牛病毒性腹泻病毒的作用,采用药毒同加、先药后毒、先毒后药3种不同途径进行体外抗病毒试验,观察病毒致牛肾原代细胞病变,并采用MTT比色法测定D492值,计算病毒抑制率。结果表明,病毒的TCID50为10^-5.29／0．1mL;沙冬青种子总生物碱的药物安全质量浓度为0．39g／L;与病毒对照组相比,当质量浓度为0．16g／L和0．32g／L时,沙冬青种子总生物碱对牛病毒性腹泻病毒有较强的直接杀伤作用,可抑制病毒的复制,能有效保护经病毒感染的牛肾原代细胞,使细胞活性增强,并减弱病毒导致的细胞病变效应,但对病毒没有明显的阻断作用。综上所述,沙冬青种子总生物碱具有较强的抗牛病毒性腹泻病毒的作用。     

Effects of crude extracts of various plants on infectious bovine rhinotracheitis virus-plaque production.

Extracts of 28 plants were tested without demonstable antiviral activity in an agar-overlay plaque-reduction antiviral assay system, using infectious bovine rhinotracheitis virus and bovine endocardial cell cultures. Ethanolic extract of Narcissus tazetta L bulb elicited antiviral activity by inhibition of viral plaque formation. Antiviral activity was demonstrated against infectious bovine rhinotracheitis and equine rhinopneumonitis viruses. Narcissus tazetta L bulb did not directly inactivate the virus extracellularly. The extract exhibited only limited toxicity to rapidly multiplying bovine endocardial cells at plaque-inhibitory levels and was not cytoxic to preformed confluent cell monolayers. Narcissus extract did not induce the formation of drug-resistant viral strains.     

抗非替抗背景下,对野菊花营养活性的再认识及其在猪组学产品中的应用

文章介绍了药食同源清热解毒中草药野菊花的营养活性及其与同样具有清热解毒营养活性的药食同源中草药菊花、金银花、紫花地丁、蒲公英等的区别与联系,指出了抗非替抗背景下,可利用野菊花设计的包括替代抗生素在内的各种功能的猪用组学型产品。     

中草药制剂对泌乳奶牛机体免疫性能的影响

试验采用大青叶、大黄、党参等19味中草药分别组成内服和子宫灌注制剂治疗奶牛子宫内膜炎，并采集颈静脉血测定淋巴细胞刺激指数（SI）和中性粒细胞吞噬力，以观察中草药制剂对奶牛免疫性能的影响。结果显示，中草药制剂均可提高奶牛免疫力，内服中草药制剂应用效果优于子宫灌注制剂（P〈0．05）；复方制剂优于单味中草药制剂（P〈0．05）；复方中草药内服制剂可使淋巴细胞刺激指数（SI）和中性粒细胞吞噬力分别提高53．76％和4．58％（P〈0．01）；复方子宫灌注制剂可使淋巴细胞刺激指数（SI）和中性粒细胞吞噬力分别提高39．58％和1．98％（P〈0．01）。