猪瘟诊断技术研究进展

猪瘟(Classical Swine Fever,CSF)是严重危害养猪业的主要传染病之一,世界动物卫生组织(OIE)将其确定为A类传染病,也是我国农业部规定的一类传染病。     

一起猪流行性腹泻病毒与博卡病毒混合感染病例分析

陕西渭南某猪场发生了一起仔猪腹泻病例,通过临床症状观察、病理解剖、细菌分离以及病原RT-PCR检测,确诊为一起流行性腹泻病毒混感博卡病毒病例。针对发病原因提出了防治措施,为防控仔猪腹泻提供参考。     

高职畜牧兽医专业建设的探索

2009年12月,咸阳职业技术学院畜牧兽医专业被列为陕西高职教育省级重点专业。根据省教育厅关于重点专业建设标准,结合咸阳当地畜牧兽医产业发展趋势,我们对专业进行了全面建设和改革,基本完成了重点专业建设任务,取得了较好的效果。希望我们的经验能为同类型高职院校相关专业建设和改革起到示范和推动作用[1]。     

鸡群免疫失败的常见因素分析和对策

<正>免疫接种是防控鸡群传染病最为经济有效的措施。随着我国养殖水平的不断提高和禽病知识的普及,无论是集约化养鸡场还是农村小规模养鸡专业户,都十分重视对鸡群进行免疫接种。广大养殖户充分认识到了免疫的重要性及疫苗接种对预防烈性传染病的关键作用。免疫接种在大多数情况下可预防传染病的暴发,但随着免疫接种的普及,有关免疫失败的报道也越来越多,已成为令养鸡场和兽医工作者最为头痛的问题之一。     

猪瘟病毒RT-nested PCR检测方法的优化和应用

为了优化猪瘟病毒的RT-nested PCR检测方法,对福建省猪瘟流行情况进行了调查。根据GenBank上发表的猪瘟病毒Shimen株基因序列设计并合成了2对引物,优化了猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)的RT-nested PCR检测方法,并对所优化的RT-nested PCR特异性进行了检验。结果表明,该方法检测CSFV cDNA含量的最低极限为1×10-7ng/mL,只有CSFV扩增出了272 bp的目的条带,从猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪流感病毒(SIV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪伪狂犬病病毒(PRV)和猪细小病毒(PPV)阳性毒和健康猪脾、肝组织及阴性PK-15细胞均未扩增出特异性条带,说明该方法特异性强。应用此方法对福建省133份病料进行检测,结果有60份病料为阳性,阳性率为45.1%。结果提示优化的检测方法灵敏度高,特异性强;福建省猪群CSFV感染率高,需要加强CSF预防控制工作。     

萆薢提取物治疗鸡痛风的剂量筛选试验

称取萆薢粉 １２００ ｇ经甲醇提取后，按每克萆薢粉加蒸馏水 ７ ｍＬ制成水剂。用高蛋白、高钙高蛋白日粮从２３日龄起饲喂红白粉商品代鸡，定期随机抽样２０只，翅静脉采血，测定血液尿酸、钙、磷含量，观察临床症状，进行病理学检查。试验表明，高钙、高蛋白日粮能引起鸡痛风。将用高钙、高蛋白日粮复制的８３日龄红白粉商品代痛风鸡 ３０只，随机分为 ５组，每组６只，Ｅ组为对照．Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ组每日饮水中分别深加 ３９． ９，３５． ７，３１． ５，２７． ３ ｍＬ萆薢水剂，每天采血测定血液尿酸、钙、磷含量，用药后 １０ ｄ剖检观察。结果用药组血液尿酸含量显著低于对照组，差异极显著（Ｐ＜０．０１）．钙、磷含量与对照组差异不显著（Ｐ＞０．０５）。萆薢水剂的用药理想剂量为每只５．２５ ｍＬ／ｄ，相当用原药萆薢粉０．７５ ｇ／ｄ。     

H9N2亚型禽流感病毒M1基因在大肠杆菌中的原核表达

采用RT-PCR技术扩增禽流感病毒M1基因,将M1结构基因克隆于pMD18-T载体.测序结果表明,插入的片段为M1目的基因.切下目的基因M1,重组到含有谷胱苷肽(GST)的融合蛋白原核表达载体pET-32a(+),获得的重组质粒经PCR、酶切以及序列分析鉴定表明,M1基因插入的位置、大小和读码框架均正确,证明成功构建融合表达载体pET-32a-M1.构建好的重组质粒经1 mmol/L IPTG诱导,在大肠杆菌BL21中得到大量表达,经过6h表达量达到高峰.融合蛋白M1的分子质量为29.8 ku,以包涵体形式存在.Western-Blot及ELISA分析表明,融合蛋白能够与M1单克隆抗体发生特异性反应,说明该重组蛋白具有良好的抗原性和特异性.     

陕西省猪瘟流行毒株E0和E2全基因分子特征分析

【目的】分析目前陕西省猪瘟病毒（CSFV）流行毒株的E0、E2全基因分子特征,为猪瘟防控提供参考。【方法】根据CSFV Shimen株及HCLV株全基因序列,设计并合成了4对引物,采用RT-PCR方法,从采自陕西不同地区的猪瘟病料中扩增E0、E2全基因并进行序列测定分析。【结果】从采集的病料中成功扩增了5株猪瘟流行毒株的E0、E2全基因,这5株流行毒株E0基因核苷酸同源性在94.4％～99.8％,与参考毒株ALD、Alfort187、Brescia、CAP、Glentorf、GPE、GXWZ02、HCLV、Paderborn、Rimes和Shimen的核苷酸同源性在80.4％～96.3％,氨基酸同源性在86.5％～99.3％。5株流行毒株E2基因核苷酸同源性在91.1％～98.0％,与参考毒株的核苷酸同源性在77.7％～94.6％,氨基酸同源性在85.2％～95.9％。5株流行毒株E0 Rnase活性区域氨基酸基序位点没有变异,但导致流行毒株发生免疫逃逸的E2蛋白关键位点中有3个发生了变异。【结论】测定的陕西省猪瘟流行毒株E0、E2基因序列变异明显,其中E2蛋白关键位点变异较大。     

纳米乳形成机理的理论

纳米乳是由水、油、表面活性剂和助表面活性剂按适当比例形成的粒径为10~100纳米的热力学稳定、各向同性、低粘度、透明或半透明的均相分散体系。纳米乳的形成至今尚没有一种理论能完整地解释,目前有负界面张力理论、混合膜理论、几何排列理论、增溶理论和R比理论等理论,其中较为成熟的是负界面张力理论。     

一株鸡新城疫病毒的分离鉴定及其油乳剂灭活苗免疫效果评价

从河南某种鸡场发病鸡群中分离出1株毒株,经HA、HI和动物回归试验,确定分离的病毒为NDV,命名为HNYD株。经过测定,HNYD株鸡胚半数致死量（ELD50）为10^90/0．1mL;鸡胚最小致死量的平均致死时间（MDT）为53．8h;对1日龄SPF雏鸡脑内致病指数（ICPI）为1．86,提示HNYD株为强毒力株。血清交叉反应试验显示HNYD株和La Sota株存在一定的抗原性差异。用HNYD株油乳剂灭活苗对HNYD株和La Sota株的保护率分别为90％和100％,明显优于La Sota株油乳剂灭活苗,提示HNYD株制备的疫苗对流行毒株和经典毒株的攻击均能很好的保护。