22味中药对犊牛腹泻大肠杆菌的体外抑菌试验

开展了乌梅、白头翁、黄连、穿心莲等22味中药对犊牛腹泻大肠杆菌的体外抑菌试验。按照常规法制备中药水提物,采用平板打孔法和微量稀释法测定了22味中药对犊牛腹泻大肠杆菌的抑菌圈直径、最低抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果显示,22味中药中有10味中药对犊牛腹泻大肠杆菌有抑菌作用,其中乌梅、诃子、五倍子和半边莲对犊牛腹泻大肠杆菌的抑菌作用最佳,抑菌圈直径为15 mm以上,为高度敏感;其次是黄连、秦皮、穿心莲、连翘、金银花、石榴皮,抑菌圈直径均大于10 mm,为中度敏感;黄柏、紫花地丁等12味中药对犊牛腹泻大肠杆菌无抑菌作用。对五倍子、乌梅、诃子和半边莲等抑菌作用较好的中药可进一步开展研究。     

14味中草药对鸡大肠杆菌的体外抑菌作用研究

为测定14味中草药对鸡大肠杆菌的体外抑菌效果,筛选出具有较好体外抑菌作用的单味中草药,为临床用药治疗大肠杆菌病以及开发中草药制剂提供依据,试验采用水提法提取诃子、紫花地丁、苏木等14味中草药的有效成分,琼脂平板打孔法测定中草药对鸡大肠杆菌的抑菌圈直径,微量二倍稀释法测定中草药对鸡大肠杆菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果表明:诃子、黄连、乌梅、苏木、五味子这5种药物抑菌效果较好,其中五味子、黄连效果最好,平均抑菌圈直径≥23.0 mm,MIC和MBC在15.63～31.25 mg/mL范围内。说明中草药具有一定的抑菌效果,且不同的中草药抑菌效果也不同。     

中药对产吲哚金黄杆菌的体外抑菌试验

为了探索中药对水貂源产吲哚金黄杆菌的抑菌效果,试验以水貂源产吲哚金黄杆菌临床分离株为试验菌株,采用琼脂平板打孔法测定中药对产吲哚金黄杆菌的敏感性,以水提法提取中药的有效成分,用试管二倍稀释法测定单味中药及中药联合使用对产吲哚金黄杆菌的最低抑菌浓度(MIC)以及最低杀菌浓度(MBC)。结果表明:苏木、诃子、五味子、乌梅、黄连抑菌效果较好,抑菌圈直径在25～35 mm之间,MIC和MBC在3. 92～15. 63 mg/m L之间;苏木和诃子组合、苏木和黄连组合、黄连和射干组合对产吲哚金黄杆菌在抑菌方面表现为相加作用,其他药物组合则表现为颉颃或者无关作用。说明中药水提物对产吲哚金黄杆菌具有一定程度的抑菌作用。     

15种中药水煎法与乙醇回流提取法体外抑菌试验比较

为将水煎法和乙醇回流法对醋五味子等15种中药进行提取,通过琼脂打洞法比较体外抑菌效果研究。试验选用15种中药(醋五味子、千里光、石榴皮、地榆、石菖蒲、吴茱萸、秦皮、姜厚朴、白头翁、升麻、忍冬花、马齿苋、葛根、大青叶、鱼腥草),分别采用水煎法和乙醇回流法提取制备出生药浓度为1 g/mL,以琼脂打洞法测定不同中药对大肠杆菌的抑制作用。结果表明,水煎法除地榆、千里光、忍冬花、石榴皮、醋五味子提取物对大肠杆菌有抑制作用外,其余中药对大肠杆菌均表现为不敏感,所测得平均抑菌圈大小分别为7.33 mm、10.67 mm、8.83 mm、6.5 mm、16.17 mm;乙醇回流提取法中醋五味子、石榴皮、大青叶和千里光对大肠杆菌有抑制作用,所测得的平均抑菌圈直径分别为24.33 mm、11.67 mm、8.33 mm和6.67 mm,其余中药提取物对大肠杆菌表现为不敏感。说明同一种中药分别通过水煎法和乙醇回流提取对大肠杆菌的抑菌效果不同,15种不同中药通过同一种方法提取对大肠杆菌抑菌程度不同,选用中药最优的提取方法和提取工艺来全面有效地发挥中药的抑菌活性。     

秦皮水提取物与部分西药对含fosA3大肠杆菌的联合作用

本试验初步探讨秦皮水提取物与抗菌药联合诱导含fosA3型耐药基因大肠杆菌传代的体外抑菌活性,为耐药大肠杆菌感染疾病提供治疗参考方案。采用二倍微量稀释法体外分别检测秦皮水提取物与抗菌药物的最小抑菌浓度(MIC),并以1/2 MIC的秦皮水提取物与抗菌药联合诱导含(fosfomycin resistance gene,FosA3)型大肠杆菌的传代试验。秦皮水提取物的MIC为1.0g/mL,以0.5g/mL的秦皮水提取物与头孢曲松钠、阿莫西林、诺氟沙星、粘杆菌素、痢菌净、磺胺间甲氧嘧啶、阿米卡星、头孢他啶、头孢噻呋钠、氟苯尼考和磷霉素11种抗菌药联合诱导传代后MIC显著降低。结果显示:秦皮水提取物联合抗菌药诱导耐药细菌体外抗菌活性明显增强,对含fosA3型大肠杆菌具有耐药逆转作用。     

nisin与中药联合应用对禽致病性大肠杆菌体外抑菌效果研究

旨在评价乳酸链球菌素(nisin)与中药联合应用对禽致病性大肠杆菌的体外抑菌效果。采用二倍稀释法分别测定nisin、五味子、诃子、乌梅、枳壳、松针单独用药时对禽致病性大肠杆菌的最小抑菌浓度(MIC),应用棋盘微量稀释法分别测定nisin与5味中药联合使用时对禽致病性大肠杆菌的MIC。结果表明,nisin单独使用时对禽源致病性大肠杆菌没有抑菌效果,五味子、诃子、乌梅的MIC均为62.5mg/m L,枳壳的MIC为125.0 mg/m L,松针的MIC为250.0 mg/m L;nisin与松针联合使用时无抑菌作用,与五味子联合使用时MIC分别为1.25 mg/m L和15.625 mg/m L,与诃子、枳壳、乌梅联合使用时MIC均为2.5 mg/m L(nisin)和31.25 mg/m L(中药)。综上提示,nisin与五味子、诃子、枳壳、乌梅联合应用时,可提高这4味中药的抑菌效果。     

白头翁散与其他中药联合对大肠杆菌的体外抑菌效果

研究中药白头翁散各组分(白头翁、黄柏、黄连、秦皮)以及其他6种中药对大肠杆菌的体外抑菌效果。用传统水煎法分别提取10种中药的有效成分;采用试管二倍稀释法测定单味中药、两药联合组成药对及自制白头翁散对大肠杆菌的最低抑菌浓度(MIC)以及最小杀菌浓度(MBC)。结果显示,白头翁散各组分均可有效抑制大肠杆菌,其中黄连的MIC为6.250 mg/mL,抑菌效果最佳。单味中药中对大肠杆菌杀菌效果较好的是黄连、秦皮、诃子,MBC均为200.000 mg/mL;药对中白头翁+黄连、大青叶+诃子对大肠杆菌的MIC均为3.125 mg/mL,抑菌效果最佳;白头翁+黄连对大肠杆菌的MBC为12.500 mg/mL,杀菌效果最佳。自制白头翁散对大肠杆菌的MIC为3.125 mg/mL、MBC为100.000 mg/mL。结果提示,白头翁散4种单药相加的抗菌效果优于单药和部分药对。     

蒲公英水煎液对犊牛源多重耐药大肠杆菌耐药性的消除作用

为了了解内蒙古地区腹泻犊牛中大肠杆菌的污染状况、耐药情况及蒲公英水煎液对多重耐药大肠杆菌耐药性的消除作用。本试验采用革兰染色、生化试验和PCR方法对采集到的107份犊牛源病料进行大肠杆菌的分离和鉴定,采用K-B法检测分离菌株对18种抗菌药物的敏感性,采用PCR方法进行8种耐药基因的检测,采用琼脂稀释法测定蒲公英水煎液对分离菌株的最小抑菌浓度(MIC),通过将菌株与蒲公英水煎液作用后进行耐药消除试验。结果显示,从107份病料中分离鉴定出44株犊牛源大肠杆菌,分离率为41%;大肠杆菌分离株对氨苄西林、头孢噻吩、头孢噻肟、环丙沙星和左氧氟沙星5种抗菌药物的耐药率均达到50%以上;β-内酰胺类耐药基因中bla_CTX-M基因携带率为86%,喹诺酮类耐药基因中qnr(S)基因携带率为32%;蒲公英水煎液对筛选出的耐药菌株的MIC为200 mg/mL;经蒲公英水煎液处理后的大肠杆菌对抗菌药物的敏感性增强,而且更不容易出现耐药。结果表明,内蒙古地区腹泻犊牛中大肠杆菌的耐药情况严重,而蒲公英水煎液对大肠杆菌的多重耐药有一定的消除作用,可降低临床应用抗菌药物的耐药性,增加临床疗效,本...     

24种中药对雏鸡致病性金黄色葡萄球菌地方流行株体外抑菌试验

为分析中药对雏鸡致病性金黄色葡萄球菌地方流行株体外抑菌效果,试验采用水提法提取24种中药有效成分,中药药液的浓缩为1 g生药/mL,利用平板打孔法和试管二倍稀释法分别测定24种中药对雏鸡致病性金黄色葡萄球菌体外抑菌圈直径和最小抑菌浓度(MIC),采用微量肉汤棋盘稀释法测定2种敏感中药组合后的体外抑菌的联用抑菌指数(FICI)。结果显示:五味子、金银花、诃子、蒲公英、鱼腥草等5种中药的外抑菌效果较好,其抑菌圈直径在16.4～19.6 mm之间,其MIC在15.65～31.25 mg/mL之间,对其他药物存在不同程度的敏感性;诃子+金银花、金银花+蒲公英2种中药组合具有显著协同作用;诃子+五味子、金银花+五味子2种中药组合具有协同作用;诃子+蒲公英、诃子+鱼腥草2种中药组合具有相加作用;金银花+鱼腥草组合有拮抗作用。试验结果为进一步中药防治雏鸡致病性金黄色葡萄球菌病提供研究基础。     

中草药对美人鱼发光杆菌的体外抑菌试验

为了测定24味中草药对美人鱼发光杆菌的体外抑菌效果,并筛选出具有较好体外抑菌作用的单味中草药,试验采用水提法提取中草药的有效成分,琼脂平板打孔法和微量二倍稀释法分别测定24味中草药对美人鱼发光杆菌的抑菌圈直径和最小抑菌浓度(MIC)。结果表明:诃子、知母、黄芩、女贞子、青皮5种药物抑菌效果较好,其中诃子、知母的抑菌效果最好,抑菌圈直径平均30 mm以上,MIC为31.25 mg/m L。     

单味中药水提物对鸡源耐药性E.coli地方株的体外抑菌活性研究

为了研究单味中药水提物对河北地区鸡源耐药性大肠埃希氏菌(Escherichia coli,E.coli)地方流行株QH15(O_2)、QH16(O_(38))、QH17(O_(89))的体外抑菌活性。利用平板琼脂打孔法和改良微量二倍稀释法分别测定抑菌圈直径和最小抑菌浓度(MIC)。结果表明:诃子、五味子、五倍子、黄连、黄芩、苦参6种中药均对3株鸡耐药性E.coli地方株高度敏感,抑菌圈直径在15~24 mm之间,MIC在7.825 mg/mL~31.25 mg/mL之间,其他的药物存在不同程度的敏感性。     

38味中药对猪大肠杆菌的体外抑菌活性

筛选对临床分离多重耐药猪大肠杆菌有抑菌、杀菌作用的中药,并分析部分中药的联合抑菌效果。选用标准菌株ATCC83707作为对照菌株,采用纸片法测定分离菌株对临床常用抗生素的敏感性。微量2倍稀释法和平板法测定各味中药的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。微量棋盘稀释法测定2种中药的联合抑菌效果。结果表明,临床分离大肠杆菌对阿米卡星、庆大霉素、左氟沙星、青霉素G、链霉素、阿莫西林都耐药,仅对多黏菌素B呈现敏感。临床分离大肠杆菌对黄连等12味中药表现为中度敏感,对其他中药表现为不敏感;ATCC83707对黄连等10味中药中度敏感,对其他药物不敏感。黄连-芦荟、黄连-诃子、山楂-芦荟、山楂-诃子、山楂-诃子、芦荟-乌梅、诃子-白头翁等联合应用时,对临床分离大肠杆菌菌株呈现协同作用;黄连-山楂、黄连-乌梅、黄连-白头翁、山楂-香薷、芦荟-五味子、乌梅-香薷、乌梅-诃子、黄芩-诃子、诃子-五味子等联合应用时,对临床分离大肠杆菌菌株呈现相加作用;黄连-香薷、黄连-五味子等联合应用时,对临床分离大肠杆菌菌株呈现无关作用;其余药物联合应用时,对临床分离大肠杆菌菌株呈现拮抗作用。临床分离大肠杆菌对常用抗生素呈现了多药耐药趋势,但对中药仍然保持一定的敏感性;抗菌方面,中药之间存在着复杂的相互作用,部分中药间有协同作用,临床用药时须谨慎筛选。     

8种中草药对大肠杆菌的体外抑菌试验

为了寻找抗生素的替代品,试验采用琼脂平板打孔法、牛津杯法和试管两倍稀释法检测了黄芩、黄连、黄柏、鱼腥草、穿心莲、五味子、连翘、艾草8种中草药对大肠杆菌的抑制作用。结果表明:黄连、鱼腥草、五味子、艾草对大肠杆菌的抑菌效果为高度敏感,五味子和艾草的最小抑菌浓度(MIC)为62.5 mg/m L,黄连和鱼腥草的MIC为125 mg/m L,大肠杆菌对其他4种中草药均不敏感。说明部分中草药对大肠杆菌具有一定的抗菌作用。     

11种中药对致犊牛腹泻大肠杆菌的体外抑菌试验

采用水提醇沉法提取中药中的有效成分,通过测定骆驼蓬子、黄连和没食子等11种中药对致犊牛腹泻大肠杆菌的抑菌圈直径、最低抑菌浓度(MIC)值和最低杀菌浓度(MBC)值,比较各中药对致犊牛腹泻大肠杆菌的体外抑菌效果。结果表明,11种中药提取物中骆驼蓬子、没食子、黄连和小檗实对致犊牛腹泻大肠杆菌抑菌效果最明显,抑菌圈直径分别为:25.63 mm、21.89 mm、21.82 mm、19.32 mm,MIC值分别为3.91 mg/mL、31.25 mg/mL、62.5 mg/mL、62.5 mg/mL,而石榴花、红花、阿魏、柽柳实和甘草提取物对致犊牛腹泻大肠杆菌没有显示抑菌作用。     

艾叶提取物对禽源大肠杆菌耐药性消除作用的研究

为了探究艾叶对3株禽源大肠杆菌(编号为DRE1、DRE2、DRE3)的耐药消除作用及抑菌效果,采用琼脂稀释法测定最小抑菌浓度(MIC);利用亚抑菌浓度的艾叶提取物进行耐药消除试验,用平板影印法筛选耐药性消除的菌株,比较耐药消除率;用纸片扩散法检测艾叶作用后消除子对抗菌药物的敏感性。结果显示:艾叶水提物对3株耐药株的MIC值为62.50、31. 25、62.50 mg/mL,艾叶醇提物对3株耐药株的MIC值均为12.50 mg/mL;艾叶醇提物和水提物对菌株的耐药性有不同程度的消除作用,随着培养时间增长,消除率增高,醇提物消除率最高可达28.50%,水提物最高可达24.34%;艾叶提取物作用后的消除子抑菌圈有不同程度的增大,DRE2恢复了对庆大霉素(GEN)、氨曲南(AZN)、头孢他啶(CAZ)、头孢噻肟(CTX)、头孢吡肟(FEP) 5种抗菌药物的敏感性,DRE3恢复了对美罗培南(MEM)、阿莫西林/克拉维酸(AMC)的敏感性。提示:艾叶提取物一定程度上能够消除禽源大肠杆菌的耐药性,恢复对抗生素的敏感性,其醇提物组分作用效果更佳,可用于防控耐药大肠杆菌的传播。     

苗药白接骨醇提物对耐药性猪源大肠杆菌体外抑菌效果观察

采用管碟法、微量稀释法和琼脂平板计数法,测定抑菌圈直径、最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC),分析临床分离的大肠杆菌菌株的耐药性,并观察苗药白接骨醇提物对标准大肠杆菌菌株和临床分离的具有耐药性的猪源大肠杆菌菌株的抑菌效果。结果显示,临床分离的大肠杆菌菌株对甲氧苄啶/磺胺甲恶唑、头孢曲松、环丙沙星均无抑菌圈产生,表现多重耐药。而白接骨醇提物对两株细菌的抑菌圈直径分别达到33.20±0.82 mm和33.78±0.38 mm;MIC均为0.78 mg/m L;MBC均为1.56 mg/m L。苗药白接骨醇提物对具有耐药性的猪源大肠杆菌在体外有较好的抑菌效果。     

中药对藏香猪源致病性大肠埃希菌地方流行株体外抑菌效果试验

为了分析20味中药对藏香猪源致病性大肠埃希菌地方流行株SCCD201712体外抑菌效果,试验采用水提法制备了中药药液,浓缩为1 g生药/mL;采用牛津杯法和微量二倍稀释法分别测定20味中药对藏香猪源致病性大肠埃希菌地方流行株体外抑菌圈直径和最小杀菌浓度(MBC),采用微量肉汤棋盘稀释法测定两种敏感中药组合的联用抑菌指数(FICI)。结果显示,藏香猪源致病性大肠埃希菌地方流行株SCCD201712对黄连、诃子、白头翁、五味子、五倍子5种药物高度敏感;其抑菌圈直径在16.3 mm～19.8 mm之间,MBC在15.65～31.25 mg/mL之间;诃子+黄连、诃子+白头翁2种中药组合具有协同作用,诃子+五倍子、五味子+黄连、五味子+白头翁3种中药组合具有相加作用,五味子+五倍子中药组合有拮抗作用。为中药防治藏香猪源致病性大肠埃希菌病提供研究基础。     

20味中药对貉源绿脓杆菌地方流行株的体外抑菌活性研究

为了研究20种中药对貉源绿脓杆菌地方流行株HBP-G1的体外抑菌活性,试验采用管碟法和试管二倍稀释法分别测定20种中药对貉源绿脓杆菌地方流行株HBP-G1的抑菌圈直径大小和最小杀菌浓度(MBC)。结果表明:金银花、黄柏、板蓝根、诃子、五味子5种药物对貉源绿脓杆菌地方流行株HBP-G1体外抑菌效果好,抑菌圈直径在17. 4～19. 3 mm之间,MBC在7. 825～15. 65 mg/mL之间;其他药物存在不同程度的敏感性。说明此20种中药对貉源绿脓杆菌地方流行株有不同程度的抑菌活性。     

中药提取物恢复耐药大肠杆菌对氨基糖苷类药物敏感性的研究

为考察五倍子、黄芩、黄连、艾叶、鱼腥草5种中药提取物恢复耐药大肠杆菌对氨基糖苷类抗生素敏感性的作用,采用1/2 MIC中药提取物对耐药菌株进行耐药性消除,通过影印培养法筛选出耐药性消除菌落,观察耐药消除率和消除子MIC值变化,并检测质粒及耐药基因rmt B的携带情况。结果表明:5种中药提取物对耐药大肠杆菌均有一定的抑制作用,耐药菌经1/2 MIC作用48 h后,五倍子、黄芩、黄连、艾叶、鱼腥草的耐药消除率分别为20.67%、21.33%、17.33%、16.67%、9.33%;消除子对庆大霉素(GEN)、卡那霉素(KAN)、阿米卡量(AMK)、新霉素(NEO)的MIC值均由高度耐药(512μg/m L)降至敏感(2~4μg/m L);5种中药提取物不能使耐药菌质粒丢失,却能导致耐药基因rmt B丢失。5种中药提取物可能是通过使高度耐氨基糖苷类药物的细菌丢失耐药主效基因来恢复对药物敏感性的。     

黄芩对安普霉素耐药大肠杆菌的耐药消除研究

【目的】探讨黄芩对安普霉素耐药大肠杆菌的耐药消除作用。【方法】制备黄芩醇提物,采用琼脂稀释法检测黄芩醇提物对耐药大肠杆菌的最小抑菌浓度(MIC),通过耐药消除试验和影印法检测耐药消除率。进而采用微量肉汤稀释法和纸片扩散法检测消除前后大肠杆菌耐药性的变化,扫描电镜法观察细菌形态的变化,实时荧光定量PCR法检测耐药相关基因相对表达量的变化。【结果】黄芩醇提物对安普霉素耐药大肠杆菌的MIC为41.25 mg/mL,对耐药大肠杆菌的耐药消除率为11.7%～17.0%。黄芩醇提物处理后,大肠杆菌的MIC值由256μg/mL降至16～32μg/mL;扫描电镜观察发现,黄芩醇提物处理组细菌表面受损,菌体形态异常;实时荧光定量PCR检测结果显示,黄芩醇提物极显著提高了大肠杆菌中ompF、fimA、phnE和fhuF基因mRNA的相对表达量(P<0.01)。【结论】黄芩醇提物能提高ompF、fimA、phnE和fhuF基因的表达水平,破坏细菌表面,提高大肠杆菌敏感性,发挥对安普霉素耐药大肠杆菌的耐药消除作用。