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犬Ⅱ型腺病毒的分离鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
在做犬腺病毒分子流行病学调查的过程中,从送检的犬粪便中分离出多株犬腺病毒,并对其中1株进行了系统鉴定。经形态学、理化学、血清学交叉中和试验、动物感染试验与分子生物学鉴定,证明为1株犬传染性喉气管炎病毒的强毒,即犬Ⅱ型腺病毒。 相似文献
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在犬腺病毒分子流行病学调查过程中,从昆明某犬场发生的一起临床上表现犬传染性肝炎的病犬脏器中,分出了1株病毒(CAV-1-KM),并对其进行了病毒形态学、理化学、血清学交叉中和试验、动物感染试验与分子生物学系统鉴定,证明为一株犬传染性肝炎强毒,用特异性的抗犬生肝炎免疫血清对处于危险中的犬,进行了紧急预防注射,有效地控制了疾病的流行。用犬Ⅱ型腺病毒疫苗作预防注射,一年多来该犬场再未发生该病。 相似文献
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研究旨在通过对采集自辽宁省辽阳某犬专业合作社犬传染性肝炎患犬病料进行分离和鉴定,了解犬腺病毒(CAV)的生物学特性。试验通过分子生物学鉴定、病毒分离、抗性测定、电镜观察、病毒特异性鉴定和动物回归试验等对分离毒株的生物学特性及致病力进行研究。结果显示,通过PCR扩增可得到1 019 bp的特异性的核酸片段,命名为CAV A22株。通过核苷酸序列分析,分离株与GenBank上登录的国内外已发表CAV参考序列的核苷酸序列同源性最高达100%。由遗传进化树可知,分离株与U77082亲缘关系较近,处于同一分支;该分离株可在MDCK细胞上连续传代,病毒含量可达105.5TCID50/0.1 mL以上;电镜观察可见圆形、无囊膜、直径约80 nm的典型病毒粒子。病毒特异性鉴定表明分离株为犬2型腺病毒(CAV-2)。病毒回归试验表明,分离株致病力较弱,加以驯化可成为一株良好的疫苗毒株。 相似文献
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为研究犬腺病毒(CAV)致弱疫苗的免疫原性,本研究将病犬的组织样品接种于MDCK细胞内,进行病毒分离及鉴定。鉴定结果显示,分离的病毒在MDCK细胞内产生明显的细胞病变(CPE),电镜下可见典型的腺病毒粒子;回归动物试验显示,该分离株可导致犬出现明显的CAV感染症状;PCR鉴定结果表明分离的病毒为CAV,命名为CAV-H株;将CAV-H株接种MDCK细胞连续传代至110代,在传代过程中,病毒滴度由初始105.0 TCID50/0.1 mL上升至107.0 TCID50/0.1 mL,而CAV对犬的致病力逐渐降低;免疫效力试验结果表明,CAV-H可对同源强毒攻击的犬提供完全的免疫保护作用,可作为理想的疫苗候选毒株。 相似文献
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本研究旨在分离犬腺病毒(CAV)的北京地区流行株,采集北京地区某宠物医院2~4月龄发生咳嗽等呼吸道症状犬的鼻咽拭子,经胶体金和PCR检测,初筛为犬腺病毒阳性。经过处理后,将其处理液接种于MDCK细胞,进行连续传代培养,出现变圆、脱落、葡萄串样等特征性细胞病变。通过形态学观察、PCR鉴定及动物回归试验等方法对其进行鉴定。PCR扩增片段测序结果表明,该分离株为犬腺病毒Ⅱ型,遂将其命名为CAV-BJ02(GenBank:MN744708)株。用Reed-Muench法测得CAV-BJ02株的TCID50为106.7·(100 μL)-1。电镜下可清晰地观察到呈正六边形的二十面体、直径在86 nm左右的犬腺病毒颗粒。遗传进化分析结果表明,本株病毒为CAV-Ⅱ型。动物回归试验结果表明,CAV-BJ02株可引起犬发热等轻微临床症状,以口鼻分泌物为主要排毒方式,排毒期为5~6 d,不导致犬死亡。上述研究结果为深入了解北京地区CAV的流行情况,为犬腺病毒病的诊断、防治及后续相关研究奠定了理论基础。 相似文献
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核酸探针检测犬冠状病毒方法的建立和初步应用 总被引:2,自引:0,他引:2
以^32P标记犬冠状病毒特异性RT—PCR及产物制成核酸探针,与CCV NL-18株、犬瘟热病毒、犬细小病毒、犬副流感病毒、犬腺病毒、狂犬病病毒反转录产物、正常CRFK细胞以及做10~10000倍稀释的CCV NL-18株反转录产物杂交,进行核酸探针的敏感性和特异性试验。结果表明,该探针仅与CCV HLl8株反转录产物呈阳性杂交,与对照病毒和正常细胞反转录产物均呈阴性反应。初步应用试验结果,该探针可与国内CCV分离病毒YSl、CI1株杂交,且可从8份腹泻犬粪便中检出5份CCV阳性病料。本研究为在我国开展犬冠状病毒感染的分子流行病学调查和临床诊断提供了一种敏感、特异的检测方法。 相似文献
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对未经犬腺病毒免疫的两月龄左右杂交狼犬,随机分为6组每组5只,另设5只对照,用作者分离鉴定和致弱驯化的犬喉气管炎病毒的第60代DK细胞培养物(SYCAV-2-DK60)对犬进行免疫试验,在免疫第4周采血分离血清,测定犬腺病毒的血凝抑制抗体(HI)效价,结果30只试验犬全部产生了HI抗体,表明SYCAV-2可通过口服或饵料的途径对犬实施免疫,为犬口服联合疫苗以及犬2型腺病毒为勒体的口服狂犬 -腺病毒 相似文献
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犬2型腺病毒SY株的致弱驯化 总被引:1,自引:1,他引:0
作者对分离和系统鉴定的一株犬传染性喉气管炎病毒(犬2型腺病毒)SY(沈阳)株,用犬肾传代细胞MDCK进行了致弱驯化,每驯化15代做一次初步的犬的安全性试验。用大剂量不同代次病毒对易感犬进行人工感染试验,每天观察犬的临床症状及白细胞总数,并于接毒后的第5d安乐死,作病理解剖学和病理组织学检查,易感犬的感染试验结果表明,SY株在犬贤细胞上传15代时对犬的致病力已降低,30代时对犬已不引起发烧,精神沉郁和厌食等症状,仅引起轻度的鼻炎,中度的咽炎,剖检肺表现正常,仅见支气管淋巴结肿大,45代时无临床症状,剖检除扁桃体肿大外没有见到其它症状,60代毒已完全失去致病力,未见任何临床症状及病理变化。 相似文献
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根据GenBank中已发表的CAV纤突基因序列,设计合成4对8条引物,用已建立的PCR方法,对犬2型腺病毒沈阳分离株第5代强毒经蚀斑克隆驯化的第60代毒弱毒(SY-V60)和犬1型腺病毒长春犬株(CCC-V6)的纤突基因进行了扩增,PCR产物经纯化后进行基因序列测定,测定结果经拼接后得到一个由1632和1629个核苷酸组成的纤突蛋白全基因序列,分别编码543和542个氨基酸。犬2型腺病毒(SY-V60)与犬1型腺病毒(CCC-V6)的纤突基因的同源性达到80.48%。犬2型腺病毒(SY-V60)与犬1型腺病毒(CCC-V6)纤突基因的同源性达到80.48%;根据犬的腺病毒与人2型腺病毒纤突蛋白的序列同源性比较结果,推测了犬腺病毒纤突蛋白的尾(tail)、轴(shaft),结(knob)三个功能区的氨基酸序列,2个型之间的尾区同源性为76.9%;轴区同源性为78.59%;其结区同源性为83.24%,而同型毒株之间结和尾区同源性较高,轴区同源性较低。 相似文献
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为了解湖北省犬腺病毒2型(CAV-2)的基因遗传变异特征,本试验从武汉市某比格犬养殖场采集免疫过犬四联活疫苗的临床发病犬的眼、鼻和肛拭子,将经PCR检测为CAV-2阳性的病料接种犬肾细胞(MDCK细胞)进行病毒分离,对CAV-2分离株进行电子显微镜观察和间接免疫荧光鉴定,E3、Fiber、Penton和E1b基因PCR扩增和测序分析以及致病性试验。结果显示:经分离和鉴定共获得3株CAV-2,分别命名为HB404株、HB405株和HB078株。3株CAV-2分离株的E3、Fiber、Penton和E1b基因与国外疫苗毒株相似性分别为98.4%~99.6%、99.3%~99.9%、99.8%~99.9%和99.5%~99.7%;3株分离株的E3、Fiber和Penton基因与国内流行毒株相似性分别为96.6%~97.5%、98.5%~99.7%和99.4%~99.9%。且3株CAV-2分离株与国外疫苗毒株在同一分支,与国内流行毒株不在同一分支。HB405株能使犬出现精神不振、食欲减退、眼鼻有分泌物、打喷嚏和咳嗽等临床症状。结果表明,3株分离株的亲缘关系与国外疫苗毒株较近,HB405株为强毒... 相似文献
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