鸡新城疫不同免疫程序鸡群强毒感染的监测

本试验应用快速检测NDV强毒的RT-PCR方法对鸡新城疫4种不同免疫程序的鸡群NDV强毒的感染进行监测。每7d采一批样品，共采3批样品，用检测NDV强毒的RT-PRC进行检测。检测结果显示，鸡新城疫弱毒疫苗和油乳剂灭活疫苗同时接种的免疫鸡群感染NDV强毒的感染率最低。     

鸡新城疫免疫鸡群强毒感染与HI抗体水平关系的研究

应用RT-PCR方法对鸡新城疫4种不同免疫程序鸡群NDV强毒的感染进行监测。结果显示,鸡新城疫弱毒疫苗和油乳剂灭活疫苗同时接种的免疫鸡群NDV强毒的感染率最低。同时应用HA-HI试验对这4群鸡进行平行抽样检测其抗体效价,发现鸡群免疫水平整齐且平均HI效价在11 log2以上时,免疫鸡群基本不感染鸡NDV强毒。     

基于新城疫病毒V蛋白鉴别鸡群感染与免疫的间接ELISA方法的建立

本研究以新城疫病毒(NDV)V蛋白羧基端结构域(Vc)的重组蛋白为包被抗原,建立了用于检测NDV V蛋白抗体的间接ELISA方法,并采用该方法检测了鸡群免疫或接毒后血清中的V蛋白抗体水平。结果显示:两组不同NDV灭活疫苗组在免疫后的3周内检测结果均为阴性;两组灭活疫苗免疫3周后再人工感染NDV强毒的鸡群,攻毒后第7、14和21 d,NDV阳性率分别为60%、80%、70%和50%、80%、70%;两组不同的NDV弱毒疫苗免疫组鸡群,仅在免疫后第21 d阳性率分别为20%和10%。以上结果表明,NDV疫苗免疫组与强毒感染组的V蛋白抗体阳性率存在明显差异,本方法可在群体水平上区分新城疫疫苗免疫与强毒感染鸡群,为NDV血清学诊断和流行病学调查提供了一种新的检测手段。     

用单抗夹心ELISA自免疫鸡群检测新城疫强毒

本研究用单抗夹心ELISA检测人工感染新城疫病毒(NDY)Muktoswar、B_1、F、LaSota疫苗毒株和F_4~8E_8强毒株鸡的两周内各脏器病毒的动态分布。发现4种疫苗接种鸡的口腔和泄殖腔棉拭样品均查不到病毒抗原。而强毒感染鸡的相同样品均显示阳性,用本法检测从疑有NDV强毒感染的免疫鸡中采集的泄殖腔棉拭样品1312份,共检出阳性样品581份:对206份阳性样品进行平行病毒分离,经血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验证明均含有NDV;选择从不同地区阳性样品得到的8个NDV分离物作进一步生物学鉴定,结果均为强毒。本法为ND的确诊、免疫鸡群强毒感染的监测和流行病学研究提供了新的有力手段,将在ND的控制中发挥重要作用。     

新城疫单抗酶联免疫试剂盒的完善及其应用

对初步研制的新城疫 (ND)单抗酶联免疫 (EL ISA)试剂盒进行了完善。以 2 .5 m g/ L 的抗 NDV腹水单抗 M2 2 包被酶标板 ,4 % FCS- PBS溶液为阴性对照 ,聚乙二醇 (PEG 10 0 0 0 )浓缩 L a Sota病毒液为阳性对照 ,P/ N≥ 2 .5为临诊样品阳性判定标准 ,对纯化的新城疫病毒 (NDV)蛋白的检出限为 2 μg/ L。用该试剂盒跟踪监测免疫鸡群中个体感染ND强毒后排毒动态 ,并平行测定血凝抑制 (HI)抗体。跟踪采集 2免疫鸡群泄殖腔棉拭和血液一一对应样品 2 317份 ,2实验鸡群棉拭样品 36 30份 ,血液样品 14 4 0份。结果表明 ,HI效价在 2～ 14之间的个体均可检出强毒 ,但 HI在 6以下的个体检出率最高 ,而排毒个体的高水平抗体是强毒感染刺激所致。个体感染强毒后一般排毒 1～ 3周 ,其中 HI抗体水平低者排毒时间相对较长 ;个体在感染后 3～ 6 d和 11～ 14 d出现 2个排毒高峰。强毒一旦侵入鸡群便可在群内巡回传播 ,长期维持下来。 HI抗体在感染初期先下降 ,然后迅速上升 ,且感染前低者上升速度较快 ,幅度亦较大     

鸡毒支原体对NDV La Sota株免疫应答的影响

以鸡毒支原体NB72株或和R株对鸡先行人工感染,然后,与无支原体感染的对照鸡同样接种NDV La Sota株,观察NDV免疫应答动态。结果,支原体感染鸡群血清和气管中的NDV血凝抑制抗体效价,虽然比未接种支原体的鸡群低.但二者差异不显著(P>0.05).随后,通过攻击NDV强毒,不论先前经过或未经过支原体人工感染,ND免疫鸡全部被保护,且血清中NDV HI抗体效价均大幅度升高;未经ND免疫接种的对照鸡全部发病死亡,因此,鸡毒支原体NB72株或R株感染的鸡对NDV La Sota株的免疫应答无明显改变。最后就体内试验的结果进行了讨论。     

新城疫病毒的进化及其新型疫苗的研制

新城疫病毒（NDV）虽然只有一个血清型,但其强毒已进化出现了九个基因型。近年来,ND疫苗在世界范围内得到了广泛使用,但免疫鸡群中ND强毒感染仍然常见。常用疫苗株LaSota对不同基因型的ND强毒流行株虽能产生完全的临床保护,但并不能防止流行株在免疫鸡中的感染复制和排出。国内外研究结果显示：当疫苗株与流行株的基因型一致时,其不仅能提供理想的临床保护,而且能显著降低免疫鸡的强毒感染率和排毒量,在临床上可有效控制免疫鸡群中非典型ND的发生。当前我国NDV的优势流行株属基因VII型,因此该型ND疫苗在控制我国ND的流行中将具有非常广阔的应用前景。     

新城疫分离株免疫保护试验

对经过鉴定的新城疫病毒穴NDV雪分离株,按国家兽医生物制品质量标准制备油乳剂灭活疫苗,在隔离器中接种SPF鸡,设标准LaSota疫苗株作对照,进行免疫保护实验。免疫后,每7d采血监测NDV抗体。免疫后3周,利用ND强毒分离毒和F48E9分别进行交叉攻毒实验,同时设SPF鸡对照。每天观察,及时剖检发病鸡,检察鸡群病变,以确定疫苗的保护性,以便对常规生产中的免疫失败进行原因分析。     

免疫鸡群的慢性新城疫——一个危险的隐患

新城疫病毒(NDV)强毒可引起未免疫鸡群严重的急性广泛性感染,致死率几乎达100%。在已免疫的地区,鸡群的免疫水平可能足以降低 ND 的致死率,并改变其临诊和病理反应,但常常并不能完全控制病毒,这     

我国家禽新城疫流行现状

1鸡新城疫仍然是最重要的直接危害 虽然我国各地所有鸡群对鸡新城疫采取了强化的免疫预防措施,包括多次使用弱毒疫苗和灭活油乳苗,但鸡新城疫仍然在各地不同程度的流行.可以这样说,几乎很难说有哪一个鸡群真正消灭了鸡新城疫病毒(NDV)强毒感染.然而,在不同类型的鸡群,NDV强毒感染发生和流行的特点各不相同.     

强毒鸡新城疫病毒的分离鉴定及免疫防制研究

从陕西发病鸡群中分离出8株病毒，分离毒大多为速发型NDV强毒株，对经典NDV La Sota株免疫的雏鸡及52周龄高抗体母鸡仍有强的致病力，采用NDV SH1－SH8病株制备成多价油乳剂灭活苗，免疫鸡群有良好的保护力。     

新城疫分离株免疫保护试验

对经过鉴定的新城疫病毒(NDV)分离株，按国家兽医生物制品质量标准制备油乳剂灭活疫苗，在隔离器中接种SPF鸡，设标准La Sota疫苗株作对照，进行免疫保护实验。免疫后，每7d采血监测NDV抗体。免疫后3周，利用ND强毒分离毒和F48E。分别进行交叉攻毒实验，同时设SPF鸡对照。每天观察，及时剖检发病鸡，检察鸡群病变，以确定疫苗的保护性，以便对常规生产中的免疫失败进行原因分析。     

Immune protection assay of Newcastle disease live vaccine （LaSota Strain） against a genotype VII NDV isolate

从山东省发病鸡群分离鉴定了一株新城疫病毒（NDV）,命名为SDLY01。经蚀斑纯化后进行毒力测定和序列分析表明分离株SDLY01属于基因VII型NDV强毒。20只7日龄SPF鸡免疫新城疫活疫苗LaSota后14d分别用NDV标准强毒F48E8和分离株SDLY01攻毒,同时设同日龄SPF鸡为对照组,未免疫任何疫苗。攻毒后观察10d,免疫组在攻毒后食欲、精神均正常;对照组在攻毒后2～4d发病死亡,并表现ND典型的临床症状和病理变化。攻毒后第3、5、7、9d对免疫组试验鸡取喉头、泄殖腔棉拭进行病毒分离,F48E8攻毒组病毒分离均为NDV阴性,SDLY01攻毒组第5d病毒分离NDV阳性,第3、7和9d病毒分离阴性。本研究结果表明LaSota活疫苗对F48E8和SDLY01均能提供100％免疫保护,但不能完全抑制基因VIINDV分离株在体内的复制和排毒。     

新城疫LaSota活疫苗对基因Ⅶ型分离株的免疫保护性试验

从山东省发病鸡群分离鉴定了一株新城疫病毒(NDV),命名为SDLY01。经蚀斑纯化后进行毒力测定和序列分析表明分离株SDLY01属于基因Ⅶ型NDV强毒。20只7日龄SPF鸡免疫新城疫活疫苗LaSot a后14 d分别用NDV标准强毒F48E8和分离株SDLY01攻毒,同时设同日龄SPF鸡为对照组,未免疫任何疫苗。攻毒后观察10 d,免疫组在攻毒后食欲、精神均正常;对照组在攻毒后2～4d发病死亡,并表现ND典型的临床症状和病理变化。攻毒后第3、5、7、9 d对免疫组试验鸡取喉头、泄殖腔棉拭进行病毒分离,F48E8攻毒组病毒分离均为NDV阴性,SDLYO1攻毒组第5 d病毒分离NDV阳性,第3、7和9d病毒分离阴性。本研究结果表明LaSot a活疫苗对F48E8和SDLY01均能提供100%免疫保护,但不能完全抑制基因Ⅶ NDV分离株在体内的复制和排毒。     

新城疫病毒弱毒株对鹅的免疫效力试验

用新城疫病毒(NDV)疫苗株La Sota和NDV基因Ⅶ型致弱株AND/Ⅶ为免疫原,分别以活苗和灭活苗的形式免疫2周龄试验鹅,免疫后第7、14天和21天采血分离血清用于抗体效价测定.免疫后3周以基因Ⅶ型强毒分离株JS2-06进行攻毒,攻毒后每天观察各组鹅的发病情况,并于第2、4天和7天分别采集喉气管和泄殖腔棉拭样品,用于病毒的分离.试验结果表明,活疫苗免疫后不能产生有效的免疫应答,而灭活苗免疫鹅对强毒的感染具有较强的抵抗能力,但基因Ⅶ型致弱株AND/Ⅶ能更有效抑制鹅体的排毒,其免疫效力明显高于疫苗株La Sota.     

雏鸡新城疫的母源抗体和初次免疫时间的确定

新城疫（ND）是危害养禽业最严重的一种传染病。非免疫鸡群若感染新城疫病毒（NDV）强毒株,死亡率可达90%以上,生物安全措施和免疫预防存在缺陷的养鸡场,发生非典型ND几乎难以避免,对养禽业的危害与影响极为严重。 免疫预防是控制ND发生的有效手段，而初次免疫时间的确定则是做好免疫工作的关键。影响初免时间确定的主要因素是来自种蛋卵黄中针对NDV的抗体，即母源抗体，是一种具有双重性的物质。ND母源抗体既能对雏鸡抵御NDV感染产生     

鸡新城疫病毒强毒株的分离鉴定及生物学特性研究

从黑龙江省某地发病鸡群中分离出一株病毒APMV1/chicken/China/HLJ-2/02,分离毒为速发型NDV强毒株,对经典NDV La Sota株免疫的雏鸡及高抗体母鸡仍有很强的致病力.本研究对分离株进行了生物学特性研究,并对部分基因进行了序列测定,序列已经发送Gene Bank,序列号为AY208695.采用NDV分离毒株制备成多价油乳剂灭活苗,免疫鸡群有良好的保护力.     

新城疫La Sota疫苗对山东分离株的免疫保护试验

用标准疫苗株La Sota活疫苗在隔离器中接种SPF鸡,进行免疫保护试验.免疫后,每7 d采血监测NDV抗体,免疫后2周,利用经过鉴定的新城疫病毒(NDV)潍坊毒SGM01、昌乐毒SCL03、东营毒HY、日照毒SRZ03、莘县毒SSX03和标准强度F48E9分别进行攻毒试验,同时设SPF鸡对照.每天观察,及时剖检发病鸡,检查鸡群病变,确定疫苗的保护性.结果表明,La Sota疫苗能对除SGM01和HY以外的病毒攻击的SPF鸡提供较好的保护.     

新城疫病毒单抗酶联试剂盒与RT-PCR方法检测新城疫强毒感染的比较

新城疫 ( ND)是威胁我国养禽业的头号疾病 ,病原是新城疫病毒 ( NDV)。 NDV只有一个血清型 ,其抗原性一致 ,但毒力差异很大。强毒毒株可引起易感鸡群高发病率和高死亡率的典型 ND,在免疫鸡群则引起低死亡率的非典型 ND;弱毒株不致病 ,有的弱毒株还被用作弱毒疫苗。由于弱株在自     

鸡新城疫重组鸡痘病毒活疫苗的免疫持续期和加强免疫研究

本研究旨在评价表达新城疫病毒（NDV）血凝素-神经氨酸酶（HN）基因的重组鸡痘病毒（rFPV-12LSHN）活疫苗的免疫持续期和加强免疫对疫苗免疫效力的影响。用rFPV-12LSHN活疫苗免疫14日龄SPF鸡,103PFU/羽,7d即可检测到NDV HI抗体应答,对NDV强毒F48E8株攻毒保护率达100%。一次免疫18周后,对NDV强毒攻击依然提供完全保护。鸡痘病毒（FPV）疫苗免疫4周,再接种rFPV-12LSHN活疫苗,攻毒保护率降低至50%。相反,rFPV-12LSHN免疫4周,随后二次免疫可显著提高对NDV的体液免疫应答水平（P〈0.01）,对NDV强毒攻击的保护率仍然为100%。结果表明,表达NDV HN基因的重组鸡痘病毒（rFPV-12LSHN）活疫苗,能够快速建立坚强免疫力,免疫持续期至少可达18周,rFPV-12LSHN的二次免疫可以提高疫苗的免疫力。