巴贝斯虫病和边虫病常规亚单位苗的研制进展

巴贝斯虫病和边虫病常规亚单位苗的研制进展Ｓ．Ｍ┐Ｊａｍｅｓ等著李国清摘译谭国校１引言巴贝斯虫病（ｂａｂｅｓｉｏｓｉｓ）是家畜和野生动物经蜱传播的血液原虫病。至少有１８种病原对家畜、实验动物和人有致病性，双芽巴贝斯虫（ＢａｂｅｓｉａＢｉｇｅｍｉｎａ）、...     

牛巴贝斯虫病的诊断进展概况

牛巴贝斯虫病的诊断进展概况周金林，沈杰（中国农科院上海家畜寄生虫病研究所）牛巴贝斯虫病（ＢＳｂｅＳＩＯＳＩＳ）是由巴贝斯虫（Ｂａｂｅｓ！ａｓＰＰ．）寄生于牛的红细胞内而引起的一种世界性动物原虫病。目前，已经报道的牛巴贝斯虫有８种［‘’，但被公认的只有...     

应用两种药物预防奶牛巴贝斯虫病的探讨

应用两种药物预防奶牛巴贝斯虫病的探讨向湘春，黄流明（广州市凤凰公司）巴贝斯虫病（Ｂａｂｅｓｉａｓｉｓ）是寄生于血液的一种原虫病，该病特点之一是具有带虫免疫现象，但奶牛容易受到某些因素影响而使体质下降（如产后因素），导致临床发生巴贝斯虫病。据作者统计，...     

寄生于中国水牛Bubalus Vbubalis的巴贝斯虫一新种(梨形虫目:巴贝斯科)

经作者等深入研究，发现湖北省水牛巴贝斯虫病病原不是牛巴贝斯虫Ｂａｂｅｓｉａｂｏｖｉｓ与双芽巴贝斯虫Ｂ．ｂｉｇｅｍｉｎａ，而是一新种——东方巴贝斯虫Ｂａｂｅｓｉａｏｒｉｅｎｔａｌｉｓｓｐ．ｎｏｖ．。病牛红细胞中的虫体呈梨形（单梨形多于双梨形）、椭圆形、指环形、边虫形及杆状。以梨形虫体居多，病的初期其长度均小于红细胞半径，其平均大小为２．２×１．３μｍ，双梨形虫体尖端相连多排列成钝角或一字形，位于红细胞偏中央处。病的后期（出现虫血症后５～６ｄ）及体外培养７２ｈ，有少部份（１～２％）虫体直径大于红细胞半径。新种的传播者为镰形扇头蜱Ｒｈｉｐｉｃｅｐｈａｌｕｓｈａｅｍａｐｈｙｓａｌｏｉｄｅｓｈａｅｍａｐｈｙｓａｌｏｉｄｅｓ经卵传递（由第二代成蜱传给健康牛）。在成蜱的血淋巴中的虫样体（裂殖子）呈圆锥状、一端钝圆、尾部直而尖，不形成钩。新种对黄牛不能感染致病，只能使水牛致病。以１９９培养基加黄牛血清进行体外培养（微气静相培养技术）不能生长繁殖     

在中国新发现的一种羊的巴贝斯虫(Babesia)未定种

在中国甘肃某地自然感染发病绵羊的血液涂片中，观察到一种大型的巴贝斯虫（Ｂａｂｅｓｉａ）。虫体形态具多形性，有双梨籽形、单梨籽形、圆环形、棒状、不规则形、逗点形和三叶形。典型双梨籽形虫体的大小为１．８～２．５μｍ×０．９～１．８μｍ，平均（２．２１±０．１２）μｍ×（１．１７±０．１８）μｍ。个别红细胞中寄生有４个或８个虫体。该虫种特征性的形态是三叶形。它是相连的双梨籽形虫体两尖端的核质延伸（出芽），并生出原生质，发育成一个完整的梨籽形虫体，与母体共同排列形成三叶形的。该虫种可引起绵羊严重发病和死亡。本研究对自然感染发病羊的临床症状和死亡羊的病理变化进行了观察。该虫种的形态大小和致病力，与莫氏巴贝斯虫（Ｂ．ｍｏｔａｓｉ）和粗糙巴贝斯虫（Ｂ．ｃｒａｓｓａ）明显不同。     

中国犬吉氏巴贝斯虫srRNA的序列测定及其在PCR诊断上的应用

用特异引物ＢＧ－１和ＢＧ－２从南京株吉氏巴贝斯虫ｃＤＮＡ文库中克隆出ｓｓｒＲＮＡ序列，测定了该序列的核苷酸组成。通过基因库同源性查询表明，该序列与美洲株吉氏巴贝斯虫ｓｓｒＲＮＡ具有８７％的同源性。本实验通过优化ＢＧ－１和ＢＧ－２引物对ｓｓｒＲＮＡ基因的扩增反应条件，建立了对吉氏巴贝斯虫的特异、敏感的诊断方法。该方法可广泛用于其他血液原虫的ＰＣＲ诊断     

牛巴贝斯虫和边缘无浆体病的流行病学分析

牛巴贝斯虫和边缘无浆体病的流行病学分析吴三（农业部动物检疫所青岛）牛的血原虫病中，巴贝斯虫病（Ｂａｂｅｓｉｏ－ｓｉｓ）和边缘无浆体病（Ａｎａｐｌａｓｍｏｓｉｓ）在世界范围内有一致的重要性。我国疫情调查资料表明，这些疾病流行区域呈逐年扩大趋势。预测一个...     

鲁西黄牛巴贝斯虫病与附红细胞体病混合感染的诊治

牛的巴贝斯虫病（Babesiosis）又称焦虫病，主要是由巴贝斯科（Babesiidae）、巴贝斯属（Babesia）的双芽巴贝斯虫（B．bigemina）和牛巴贝斯虫（B．bouis）寄生于牛的红细胞内引起的呈急性发作的严重寄生性血液原虫病。该病的发生呈一定的地区性、季节性。     

奶牛巴贝斯虫病的诊断与治疗

牛巴贝斯虫病是由巴贝斯属（Babesia）的多种寄生虫寄生于牛红细胞内所引起的血液原虫病。我国已报道的牛巴贝斯虫有3个种：双芽巴贝斯虫（B．bigemina）、牛巴贝斯虫（B．bovis）和卵形巴贝斯虫（B．ovata）。前2个种流行广泛,传播媒介为微小牛蜱和镰形扇头蜱,危害较大;后1个种只在河南局部地区发现,传播媒介为长角血蜱,危害较小。     

克隆表达的犬吉氏巴贝斯虫重组GST-P130kDa 用于血清学诊断

利用抗体法（picoBlueTMImmunscreening Kit,应用B.gibsoni感染血清）从犬吉氏巴贝斯虫（B.gibsoni）裂殖子mRNA制备的吉氏巴贝斯虫cDNA文库中进行免疫筛选,选出目的基因相cDNA片段（阳性克隆）.测序验证后将该cDNA（基因）克隆至原核表达载体pGEX-4T-3,构建重组质粒,在大肠杆菌E.coli（DH5a）中以GST融合蛋白的形式表达（SDS-PAGE分析证明）;表达产物为130kDa的可溶性融合蛋白.免疫学分析（Western blot和ELISA）结果表明,犬吉氏巴贝斯虫重组GST-P130kDa融合蛋白（rBg GST-P130kDa）能与犬吉氏巴贝斯虫（B.gibsoni）感染血清起反应,且与犬巴贝斯虫（B.canis）无交叉反应.本试验利用犬吉氏巴贝斯虫重组BgGST-P130kDa融合蛋白（作为重组抗原）检测巴西（n=310）、日本（n=100）和中国（n=114,n=30）等国随机采集的自然感染狗血清,其结果为巴西狗血清阳性率为55%、日本为8%、中国为1～9%;其结果与间接荧光抗体法（IFAT）结果为一致（作为验证）.结果表明重组BgGST-P130kDa融合蛋白具有较强的免疫原性和特异性,可用于吉氏巴贝斯虫病的诊断,这为吉氏巴贝斯虫病的早期诊断和深入研究犬吉氏巴贝斯虫病的特异性重组抗原及重组疫苗奠定基础.     

中国犬吉氏巴贝斯虫ssrRNA的序列测定及其在PCR诊断上的应用

用特异引物ＢＧ－１和ＢＧ－２从南京株吉氏巴贝斯虫ｃＤＮＡ文库中克隆出ｓｓｒＲＮＡ序列，测定了该序列的核苷酸组成。通过基因库同源性查询表明，该序列与美洲株吉氏巴贝斯虫ｓｓｒＲＮＡ具有８７％的同源性。本实验通过优化ＢＧ－１和ＢＧ－２引物对ｓｓｒＲＮＡ基因的扩增反应条件，建立了对吉氏巴斯虫的特异、敏感的诊断方法。该方法可广泛用于其他血液原虫的ＰＣＲ诊断。     

巴贝斯焦虫的DNA重组疫苗

澳大利亚联邦科学与工业研究组织热带动物生产部的I．G．Wright等人已研制出牛巴贝斯焦虫(Babesia bovis)的DNA重组疫苗。研究表明，牛巴贝斯焦虫的粗提抗原可诱发易感牛获得相当于天然感染后的保护性免疫。将粗抗原作系列分离，并在成年牛体进行了一系列免疫／攻击试验。     

犬巴贝斯虫病的流行病学及诊治措施

犬巴贝斯虫病是由巴贝斯虫（原称焦虫）引起,经蜱传播,寄生于犬血液红细胞内的寄生虫病.犬巴贝斯虫病的病原主要有3种,即犬巴贝斯虫、吉氏巴贝斯虫、韦氏巴贝斯虫.1 流行病学巴贝斯虫是通过中间宿主蜱感染的.蜱叮咬患巴贝斯虫的病犬,巴贝斯虫就随血液红细胞进入蜱的消化道,在蜱消化道内虫体从红细胞内逸出,侵入蜱肠上皮细胞进行多数分裂,形成很多细长虫体,进入蜱的成熟卵内发育.分类号：S858.292 文献标识码：B文章编号：1005-7307（2013）06-0038-002     

巴贝斯虫体外培养技术及其应用的研究进展

体外培养巴贝斯虫的工作起始于1978年，由Frp等采用悬浮培养（Suspensionculture，又称旋转培养SpinnerflaskmethodSFM）成功地进行了牛巴贝斯虫的体外培养，但培养中红细胞染虫率不高。1980年，Levy等仿照Trager（1976）培养恶性疟原虫的技术建立了微气静相培养技术（MicroaerophilousstationaryphasecultureMASP），实现了牛巴贝斯虫的体外连续培养并得到了理想的结果。之后，该方法被迅速应用于双芽巴贝斯虫、分歧巴贝斯虫、大巴贝斯虫、犬巴贝斯虫、隐藏巴贝斯虫、马巴贝斯虫等多种巴贝斯虫的体外培养均获成功。目前，该方法已被…     

莫氏巴贝斯虫和羊巴贝斯虫在我国的分离及形态学观察

在甘肃省庆阳地区的发展及病愈的小尾寒羊血液中分离出２种巴贝斯虫并进行了形态学观察，初步证实该地区“坏肠子”病的病原为巴贝斯虫。一种小型虫体鉴定为羊巴贝斯虫，另一种为大型虫体，鉴定为莫氏巴贝斯虫，含羊巴贝斯虫的血液注射给除脾羊后，第１４ｄ血涂片中红细胞的染虫率达最高点（为０．５％），之后逐渐下降，感染羊自然耐过，含有混合虫种的血液注射给易感除脾羊后，红细胞染虫率迅速上升到３０．０％，感染后第６ｄ羊因     

一例肉牛巴贝斯虫病的诊治

正牛巴贝斯虫病旧称牛焦虫病,是由数种巴贝斯虫寄生于红细胞内引起的原虫病。临床上以高热不退、牛体迅速消瘦、贫血、黄疸、排恶臭的褐色粪便及血红蛋白尿为主要症状。该病多为急性型,如不治疗或治疗不当,病程一般为4~8 d,死亡率高达50%~90%。现将一例肉牛巴贝斯虫病病例的诊治情况报道如下。     

牛巴贝斯虫C51A重组质粒在大肠杆菌中的转化技术

我们在应用光敏生物素直接标记牛巴贝斯虫C51A质粒DNA探针检测牛巴贝斯虫DNA的研究基础上，研究了牛巴贝斯虫C51A重组PUC18导入并建立大肠杆菌DH52转化株的技术，为研制牛巴贝斯虫核酸探针建立了必要的技术条件。材料和方法】．材料（l）牛巴贝斯虫（BQbesiabovis）基因C51A重组质粒PUC18为澳大利亚CSIROB．P．D8iPyyPle博士惠赠的冻干品。该基因已于1992年收人国际基因库。（2）试剂：蛋白陈为日本进口品；EcoRI酶和x／EcoRI＋mudIll均购自华美工业公司。2．方法（1）导入试验：挑取大肠杆菌DH52单菌落移植到smlLB液体培…     

甘肃省河西区域牛羊梨形虫病病原及媒介蜱分子流行病学调查

巴贝斯虫（Babesia spp.）和泰勒虫（Theileria spp.）是世界范围内流行的蜱传播梨形虫病病原体。为评价梨形虫病传播情况,为甘肃省河西区域梨形虫病防治提供流行病学资料,采集该区域部分县区的牛羊抗凝血样品和环境游离蜱虫进行梨形虫病病原检测,分析样品中病原体的存在和分布情况,利用MEGA 6.06软件和NCBI GenBank数据库的BLASTn工具,对阳性样品中的巴贝斯虫和泰勒虫18S rRNA基因进行序列分析和遗传进化树构建。通过基于18S rRNA的巢氏PCR方法,检出梨形虫病病原1目2科9种,包括莫氏巴贝斯虫、双芽巴贝斯虫和隐藏巴贝斯虫3种巴贝斯虫,东方泰勒虫、中华泰勒虫、分离泰勒虫、吕氏泰勒虫、狍泰勒虫和环形泰勒虫6种泰勒虫。牛羊抗凝血样品梨形虫病病原总感染率为8.84%（16/181）,阳性样品分布于武威市（感染率14.94%）和张掖市（感染率3.45%）;检出携带梨形虫病病原的蜱9只,蜱病原携带率为2.52%（9/357）。检出的梨形虫病病原分属泰勒虫属和巴贝斯虫属2大类,每种病原跟国内外检出虫株的同源性均较高,处于各虫株相应分支上,提交序列相似率达99%～...     

犬吉氏巴贝斯虫的人工感染及治疗试验

为进一步证实犬吉氏巴贝斯虫（Ｂａｂｅｓｉａｇｉｂｓｏｎｉ）的致病作用,筛选较为理想的治疗药物,将１２只杂种狼犬均分为摘脾组与不摘脾组,进行了吉氏巴贝斯虫人工感染试验。人工感染犬临床症状与自然感染犬无明显差异,表现为体温升高、红细胞减少、Ｈｂ降低及虫血症等,摘脾组较不摘脾组虫血症和症状的出现早１～２ｄ。将此１２只人工感染犬及６７只自然感染犬随机分成４组,分别以贝尼尔（Ｂｅｒｅｎｉｌ）、阿卡普林（Ａ－ｃａｐｒｉｎｕｍ）、蒿甲醚（Ａｒｔｅｍｔｈｅｒｉｎ）和磷酸伯氨喹（Ｐｒｉｍａｑｕｉｎｅｐｈｏｓｐｈａｔｅ）４种药物进行治疗比较试验,结果以蒿甲醚疗效最好,用药后第２天虫体转阴率达７０％,第３天Ｈｂ由２８ｇ／Ｌ上升到６４ｇ／Ｌ,奏效迅速。     

识别牛巴贝斯梨形虫的特异性DNA探针

用质粒ＰｕＮ１２１从墨西哥虫株Ｍ建立牛巴贝斯梨形虫ＤＮＡ的基因族，并克隆于大肠杆上，选择几个与标记的牛巴贝斯梨形虫基因ＤＮＡ杂交的重组质粒，进一步分析，发现ＰＭｕ－Ｂ１敏感性较高，能检测出２５ｐｇ纯净的牛巴贝斯梨形虫ＤＮＡ。１０μｌ感染全血中３００个梨形虫或０．０００２５％虫血症，ＰＭｕ－Ｂ１含有６．０ｋｂ牛巴贝斯梨形虫ＤＮＡ插人物，该插人物不与双芽巴贝斯梨形虫，伊氏锥虫，恶性疟原虫，边缘边虫，微