柔嫩艾美尔球虫（E．tenella）感染鸡IsG生成细胞及血清IgG变化

为了探明鸡球虫保护性免疫机制，通过人工复制的鸡球虫病鸡，利用免疫组化技术和斑点酶联免疫吸附试验（Dot-ELISA），分别检测了柔嫩艾美耳球虫（E．tenella）初次感染雏鸡后，盲肠局部和免疫器官中IgG生成细胞数的动态变化，循环血液中特异性IgG水平的动态变化；雏鸡母源抗体的动态变化和不同抗体水平雏鸡的抗球虫能力。结果表明：（1）攻毒后雏鸡盲肠粘膜、脾脏、法氏囊、盲肠扁桃体中的IgG生成细胞早于第2～3d（d）开始增殖，在第9～12d达到峰值，随后即开始下降，盲肠扁桃体中的IgG生成细胞数在第22d仍高于对照组。（2）雏鸡感染E．tenella后第6d即可在循环血液中检测到特异性IgG，于第18d达到峰值，第30d降至感染后第7d时的水平。（3）特异性母源抗体IgG水平高的雏鸡，抗球虫水平高。雏鸡母源抗体IgG水平随日龄增长逐渐下降，同时雏鸡的抗球虫水平也随之降低，母源抗体IgG水平与抗球虫能力有明显的正相关性。     

柔嫩艾美耳球虫（Eimeria tenella）感染鸡IgG生成细胞及血清IgG变化

利用免疫组化技术和Dot-ELISA，分别检测了雏鸡初次感染柔嫩艾美耳球虫（E.tenella)后，盲肠局部和免疫器官中IgG生成细胞数的动态变化、循环血液中特异性IgG水平的动态变化、雏鸡母源抗体的动态变化以及不同抗体水平雏鸡的抗球虫能力。结果表明，（1）感染后2-3d，盲肠粘膜、脾脏、法氏囊、肓肠扁桃体中的IgG生成细胞即开始增殖，9-12d达峰值，随后开始下降，盲肠扁桃体中IgG生成细胞数在22d时仍高于对照组；（2）感染后6d即可在循环血液中检测到特异性IgG，18d达峰值，30d降至感染后7d时的水平；（3）特异性母源抗体IgG水平高的雏鸡，抗球虫能力高，二者呈明显的正相关。     

柔嫩艾美尔球虫实验感染雏鸡体液免疫机制研究

本文通过人工复制的鸡球虫病鸡,利用免疫组化技术等方法,检测了柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)初次感染雏鸡后,盲肠局部和免疫器官中IgG生成细胞数的动态变化。结果表明:攻毒后雏鸡盲肠粘膜、脾脏、法氏囊、盲肠扁桃体中的IgG生成细胞分别于第3、3、3、2d开始增殖,在第12、12、16、9d达到峰值,随后即开始下降,盲肠扁桃体中的IgG生成细胞数在第22d仍高于对照组,且差异显著(P<0.05)。     

柔嫩艾美耳球虫感染鸡的体液免疫机理研究

为了揭示鸡柔嫩艾美耳球虫（E．tenella）病的免疫机制，试验从分子水平、细胞、亚细胞对人工攻毒病鸡特异性抗体、免疫细胞的动态变化及在抗球虫中的作用进行了探讨，试验结果如下：一是雏鸡感染E．tenella后，第6天即可在外周血液中检测出特异性IgG，于第18天达到峰值，第23天开始下降，第30天时降至感染后第7天的水平；二是揭示了雏鸡感染E．tenella后，鸡体IgG生成细胞的动态变化规律为：主要免疫器官胸腺、法氏囊、脾脏、盲肠扁桃体和盲肠局部的IgG生成细胞于第2天和第3天开始增殖，在第9天至第16天达到峰值，然后逐渐下降，盲肠扁桃体中的IgG生成细胞在第18天降至对照组水平，盲肠、脾脏和法氏囊中的IgG生成细胞数在第22天仍高于对照组，且差异显著。     

毒害艾美球虫一次感染雏鸡局部黏膜组织抗体生成细胞的变化

应用免疫酶组织化学法,对毒害艾美球虫(Eimeria necatrix)初次感染雏鸡的哈德尔腺、盲肠扁桃体中IgA、IgM、IgG生成细胞数量的动态变化进行了检测。结果发现,雏鸡初次感染E.necatrix后7~21 d,上述局部黏膜免疫组织的3种抗体生成细胞均不同程度地高于未感染E.necatrix的对照雏鸡,表明雏鸡初次感染E.necatrix后,消化道和呼吸道局部黏膜免疫组织的体液免疫功能增强。     

柔嫩艾美耳球虫感染雏鸡LPO含量和抗自由基酶活性的动力学

通过测定柔嫩艾美耳球虫 (Eimeria tenella)感染鸡的盲肠、肝脏、脾脏和法氏囊组织中脂质过氧化物 (L PO)含量和超氧化物歧化酶 (SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶 (GXH- Px)及过氧化氢酶 (CAT)活性 ,研究雏鸡感染球虫后机体内自由基生成和抗自由基反应。结果表明 ,雏鸡感染 E.tenella后 ,盲肠、肝脏和脾脏组织中的 L PO含量在感染后显著 (P<0 .0 5 )或极显著 (P<0 .0 1)升高 ,T- SOD、Mn- SOD、Cu、Zn- SOD、GSH- Px和 CAT活性水平不同程度下降。试验结果说明在 E.tenella感染后 ,鸡体内的氧自由基生成反应加剧 ,氧自由基参与了球虫的致病过程。     

雏鸡感染毒害艾美耳球虫后血清免疫球蛋白含量的动态变化

采用间接ELISA法检测雏鸡初次及二次感染毒害艾美耳球虫(Eimerianecatrix)后血清免疫球蛋白含量的动态变化。结果表明,雏鸡初次感染E.necatrix 后10 d~ 14 d血清IgG, IgM, IgA 含量开始增加,16 d~18 d达到峰值;雏鸡二次攻击性感染E.necatrix 后2 d~7 d,其血清的上述3种免疫球蛋白含量均不同程度低于初次感染雏鸡,随后开始回升,至10 d~14 d明显高于相应对照及初次感染雏鸡。血清抗体,特别是IgG介导的体液免疫,在雏鸡抵抗E.necatrix初次及二次感染中发挥了重要作用。     

穿心莲片对鸡柔嫩艾美耳球虫感染的防治作用

穿心莲作为清热解毒类中药,具有抑制炎症、抗感染等药理活性,其对鸡球虫感染所致肠道炎症的作用尚不清楚。本文以柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)接种制作雏鸡球虫感染模型,在接种前1d至接种后6d连续口服给予不同剂量的穿心莲片剂(50mg,100mg,200mg)。试验结果表明,200mg组中感染鸡的血便排出推迟了1d,且明显降低了血便记分和粪便卵囊排出量,盲肠病变记分也相应降低。对E.tenella感染引起的增重以及中枢免疫器官(胸腺、法氏囊)指数的下降有回升作用,且表现出一定的剂量效应。不同剂量组的抗球虫指数均低于160。这说明穿心莲片能减轻雏鸡E.tenella的感染程度,但未达到中效抗球虫药的疗效。     

雏鸡感染毒害艾美耳球虫后的体液免疫

采用SPA菌体花环法、间接ELISA法和免疫组织化学法检测毒害艾美耳球虫（E．necatrix）感染雏鸡后，其血液免疫球蛋白含量、B细胞和免疫器官抗体生成细胞数量的动态变化。结果发现：①E．necatrix感染雏鸡后10d血液B细胞数量和IgG、IgM、IgA含量均开始增加，16～18d达到峰值；②感染雏鸡法氏囊、脾脏等免疫器官的抗体生成细胞数量于7～21d不同程度增加，14～18d达最高峰。结果表明，雏鸡体液免疫在抵抗E．necatrix感染中也发挥重要作用。     

感染鸡贫血病毒雏鸡接种新城疫疫苗后局部粘膜免疫功能的变化

雏鸡1日龄感染鸡贫血病毒（CAV），8日龄接种Lasota疫苗，以未感染免疫雏鸡为对照，于免疫后7、14、28d检测其哈德尔腺和盲肠扁桃体T细胞及IgG^ 、IgM^ 、IgA^ 抗体生成细胞数量，泪液、气管液、肠液、胆汁中IgG、IgM、IgA含量以及泪液、胆汁HI抗体滴度的动态变化。揭示了感染CAV雏鸡接种ND疫苗免疫后哈德尔腺、盲肠扁桃体的T细胞和IgG^ 、IgM^ 、IgA^ 抗体生成细胞数量，泪液、气管液、肠液、胆汁中免疫球蛋白IgG、IgM、IgA含量以及泪液、胆汁HI抗体滴度，均较未感染免疫雏鸡明显减少。表明眼部、呼吸道和消化道局部粘膜免疫防御能力减弱。     

柔嫩艾美耳球虫卵囊免疫后鸡盲肠扁桃体IL-2基因表达的动态变化

为检测和评价鸡白细胞介素2(ChIL-2)在抗球虫免疫过程中的作用,以RT-PCR技术从鸡盲肠扁桃体中克隆获得了长度为391 bp的ChIL-2.将实验鸡随机分为对照组和试验组,试验组于12日龄和22日龄时用E.tenella孢子化卵囊进行免疫,分别于设定时间每组取5只鸡的盲肠扁桃体,以鸡β-Actin为参照建立半定量RT-PCR方法检测ChIL-2的表达动态变化.结果表明,试验组在第一次免疫后的第几天和第二次免疫后的第七天ChIL-2的表达量明显升高,提示ChIL-2参与了鸡体的抗球虫感染过程,为进一步探讨ChIL-2的生物学活性及作为鸡球虫病基因工程疫苗佐剂的研究奠定基础.     

雏鸡服用益生素后局部粘膜免疫组织抗体生成细胞的动态变化

用商品益生素和自制益生素分别灌服1日龄雏鸡3天,灌服后1、4、7、10、18 d采用组织切片及免疫组织化学方法检测盲肠扁桃体、派伊尔结、哈德尔腺IgA、IgM、IgG生成细胞数量的动态变化,结果发现服用益生素雏鸡其上述三种粘膜组织的IgA、IgM、IgG生成细胞数量主要在4～7 d明显高于对照组雏鸡.表明益生素能够提高雏鸡呼吸道和消化道局部粘膜免疫组织的抗体生成细胞数量,商品益生素提高的更多一些.商品益生素组与自制益生素组的差异,可能与所含菌种和加工工艺有关.     

柔嫩艾美耳球虫病鸡盲肠上皮细胞凋亡的分析

从细胞凋亡的角度探讨柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)对鸡盲肠黏膜的损伤机理,为鸡球虫病的防治提供理论依据.用E.tenella孢子化卵囊感染雏鸡,于感染后不同时间段取盲肠组织,运用常规病理组织学、超微病理学和原位末端标记技术对感染E.tenella病鸡肓肠黏膜上皮细胞和肠腺上皮细胞进行观察和分析.结果表明:鸡感染E.tenella的第2天,盲肠黏膜上皮细胞凋亡数即开始增加,感染后第4～6天是病变最严重且具有特征性的阶段,主要表现为中、后段盲肠黏膜深层严重出血,大最黏膜上皮脱落,严重者可见整个黏膜几乎完全脱落,肠腺破坏,其表面被覆盖大量脱落的变性、坏死的上皮细胞和红细胞,残存的黏膜上皮细胞和肠腺上皮细胞凋亡速度加快,大多数上皮细胞处于凋亡状态,凋亡指数极显著(P≤0.01)高于空白对照组,凋亡细胞体积缩小,细胞线粒体肿胀,严重时破裂成大空泡,染色质致密边集或断裂成核碎片,形成膜包裹性凋亡小体.结果提示E.tenella感染鸡后盲肠上皮细胞凋亡加重,以裂殖生殖阶段最为明项,且与损伤程度和病程密切相关.     

血清中IBV特异性IgG及总IgG含量变化规律的研究

本研究采用间接酶联免疫吸附试验对人工感染鸡传染性支气管炎病毒的SPF鸡血清中特异性抗体及总IgG含量进行检测并比较其相关性.结果表明感染IBV-M41第1 d、3 d、5 d、7 d、10d、14d、21 d、28 d的血清中特异性抗体水平随感染天数增加而升高,于第14天达到最高,之后略呈降低趋势,与健康对照比较差异显著(P＜0.01);总IgG含量较健康对照组增幅小,差异显著(P＜0.01).同时,两者的消长趋势基本一致.     

鸡柔嫩艾美耳球虫生殖细胞特异性蛋白的免疫保护效果评价

为探讨鸡柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)生殖细胞特异性蛋白(HAP2)对球虫感染的免疫保护作用,将HAP2重组蛋白(rEtHAP2)加弗氏完全佐剂或弗氏不完全佐剂免疫雏鸡后,用E. tenella孢子化卵囊感染雏鸡,以雏鸡增重效果、卵囊排出量、肠道病变记分、血清抗体水平、淋巴细胞转化水平,评估rEtHAP2的免疫保护作用,并设PBS免疫对照组、正常饲养对照组。结果显示:rEtHAP2免疫组雏鸡的平均体重、日增重、血清抗体水平、淋巴细胞转化水平,均显著高于PBS免疫对照组(P0.05);卵囊排出量,肠道病变记分则显著低于PBS免疫对照组(P0.05);抗球虫指数ACI值为176.18,保护效果良好。研究表明生殖细胞特异性蛋白HAP2对柔嫩艾美耳球虫感染具有良好的免疫保护作用,可成为柔嫩艾美耳球虫新型疫苗的候选抗原。     

感染IBDV雏鸡免疫器官组织中抗体生成细胞的变化

无IBDV母源抗体的1日龄健康滨白公雏接种IBDV后,于不同时期检查其法氏囊、胸腺、脾脏、盲肠扁桃体及哈德尔腺中IgG、IgM和IgA生成细胞的数量。结果表明,1日龄IBDV感染鸡全身及局部免疫器官组织中三种抗体生成细胞的数量均明显低于健康对照鸡,呈现体液免疫抑制。     

rChlFN-γ对E.tenella卵囊免疫雏鸡肠道分泌型IgA+细胞数量的影响

本研究初步探讨了重组鸡γ干扰素(rChIFN-γ)对柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)卵囊免疫接种鸡肠道粘膜slgA+细胞数量的影响.分别给7和14日龄雏鸡予以E.tenella孢子化卵囊免疫接种并同时肌注5 000 urChlFN-γ后,于21日龄用同源E.tcnella攻虫.免疫组化检测结果表明rChIFN-γ加强免疫组在21日龄时十二指肠、空肠、盲肠和回肠的绒毛sIgA+细胞数量均高于免疫对照组,在28日龄时,均呈现显著性差异(α=0.05).结果表明rChIFN-γ可提高球虫卵囊免疫雏鸡肠道内的sIgA+细胞数量,增强粘膜免疫水平,具有明显的抗球虫免疫增强效果.     

雏鸡感染马立克氏病病毒后免疫器官组织抗体生成细胞的变化

以马立克氏病病毒（ＭＤＶ）感染１日龄肉用雏鸡，在感染后５、２５、４５ｄ采取法氏囊、脾脏、盲肠扁桃体和哈德尔腺，用彩色免疫金银染色法检查免疫器官组织中ＩｇＧ、ＩｇＭ和ＩｇＡ抗体生成细胞数量的动态变化。结果：ＭＤＶ感染雏鸡的法氏囊、脾脏和哈德尔腺中以ＩｇＧ抗体生成细胞居多，ＩｇＧ、ＩｇＭ和ＩｇＡ抗体生成细胞均较正常对照鸡显著减少；盲肠扁桃体中以ＩｇＡ抗体生成细胞居多，ＩｇＡ、ＩｇＧ和ＩｇＭ抗体生成细胞数量显著低于正常对照鸡。由此表明，ＭＤＶ感染鸡全身免疫器官和消化道、呼吸道局部粘膜体液免疫机能明显抑制。     

益生菌对柔嫩艾美耳球虫感染鸡保护效果研究

接种柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)孢子化卵囊和益生菌,以血便记分、存活率、体增重和抗球虫指数为指标,探讨益生菌的抗球虫活性。在接种第7天后检测结果显示,益生菌抗球虫指数为137,能降低球虫感染鸡的血便记分,减轻鸡盲肠组织病理学结构的损伤,提高球虫感染鸡体增重和存活率,提示益生菌可以辅助应用于临床球虫病的防治。     

内源性NO在雏鸡球虫感染中的作用

以腹腔注射途径给予感染柔嫩艾美耳球虫 (E.tenella)雏鸡细菌脂多糖 (L PS)和地塞米松 (Dex) ,用铜离子活化镉还原法检测血清 NO- 2 水平 ,并通过测定 NBT阳性细胞百分率、雏鸡增重、免疫器官的脏器系数、OPG值以及盲肠病变记分等指标 ,探讨了 NO在雏鸡感染球虫过程中的作用。试验结果表明 ,与空白对照组相比 ,给予 L PS可使 NBT阳性细胞百分率明显升高 (P<0 .0 1) ,并使盲肠病变及球虫感染引起的增重下降有所减轻 ,这提示 L PS对雏鸡具一定的保护作用 ;而给予 Dex不仅降低了感染雏鸡血清 NO- 2 的水平、NBT阳性细胞百分率、增重和胸腺的脏器系数 ,还增加了 OPG值和盲肠病变记分 ,说明在雏鸡感染球虫过程中 ,Dex会减少 NO的生成 ,并使雏鸡抗球虫免疫力下降。