牛瘤胃乳酸菌的分离与鉴定

为分离筛选用于牛活菌制剂的乳酸菌菌株,试验采用API 50CHL对从牛瘤胃中分离的60株乳酸菌进行生化鉴定,对鉴定出的菌株进行耐酸耐碱、生长温度、耐氧、耐药和抑菌性测定。结果显示,经生化鉴定出的3株菌分别为嗜酸乳杆菌（L.acidophilus）、发酵乳杆菌（L.fermentum）和乳明串珠菌（L.holzapfelii）,分别命名为L1、L2和L3。其中,L1耐酸性最强,L2耐碱性最强,L1在37～40 ℃之间均生长良好且兼性厌氧;L1、L2、L3耐药率为60%～100%;3株乳酸菌对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有不同程度的抑制作用,其中L1抑菌效果最好,抑菌圈直径分别为18.30和16.40 mm。提示,L1、L2可作为抗性乳酸菌活菌制剂的候选菌株。     

番鸭肠道乳酸菌的分离鉴定及抑菌性能

通过革兰染色、菌落形态观察、生化分析鉴定、牛津杯抑菌试验、Caco-2细胞黏附试验对分离到的6株乳酸产生菌进行研究。结果显示:经16SrDNA序列测定,比对分析6株乳酸产生菌与鼠李糖乳杆菌、乳酸乳球菌乳亚种、唾液乳杆菌、乳链球菌、哥伦比亚肠球菌和鼠乳杆菌高度同源。6株乳酸菌抑菌试验检测显示:对大肠杆菌、沙门菌、蜡样芽胞杆菌和金黄色葡萄球菌具有很强的抑菌效应,以CM3菌株的抑菌效果最强。同时,这6株乳酸菌对Caco-2细胞均有一定的黏附能力。结果表明:6株番鸭肠道乳酸产生菌能够黏附于肠道模型Caco-2细胞上并具有较强的抑菌活性,但其黏附性能及保护机制还有待进一步研究。     

具有益生特性的小尾寒羊肠道正常菌群的分离、鉴定及筛选

为了获得适合生产的羊源益生菌株,本试验从健康成年小尾寒羊肠道内分离出5株菌落形态各异、生长良好的菌株。通过革兰染色、生理生化鉴定及16SrDNA分析,5株菌分别为M1(干酪乳杆菌)、M2(植物乳杆菌)、E1(粪肠球菌)、E2(屎肠球菌)、L1(枯草芽孢杆菌)。细菌生长曲线、耐酸、耐胆盐、抑菌试验等益生特性分析结果表明,M1、M2和L1具有生长速度快,耐酸、耐胆盐,明显抑制大肠杆菌、鸡白痢沙门菌和金黄色葡萄球菌等肠道常见致病菌的益生特性,可以作为研制羊用微生态制剂的候选菌株。     

猪源乳酸菌抑制致病性大肠埃希菌研究

为筛选能够抑制猪源致病性大肠埃希菌的优势乳酸菌,采集不同日龄的健康仔猪新鲜粪便,分离纯化得到35株疑似乳酸菌。应用牛津杯法对3株致病大肠埃希菌抑制作用进行研究,筛选出2株有抑菌作用的疑似乳酸菌(11号和14号)。利用生化鉴定和16SrDNA序列同源性分析,该两株菌被鉴定为乳杆菌属唾液乳杆菌;综合牛津杯法和生长曲线、pH的测定结果,筛选出产酸性能和抑菌效果好的14号菌株,为研制仔猪用微生态制剂奠定了基础。     

酸马奶中一株具有高效抑菌活性的乳酸菌的分离与鉴定

乳酸菌作为益生菌对人体健康十分有益,近年来关于益生菌的研究及应用发展较快。为了开发优质乳酸菌资源,试验采用常规的细菌分离鉴定方法,从酸马奶中分离了46株乳酸杆菌和24株乳酸球菌,对抑菌活性较强和生长较快的菌株进行生理生化初步鉴定,并在分子水平上进行保守基因16S rRNA和gyrB基因鉴定。结果表明:分离到的XM-38菌株具有较强的抑菌活性(可抑制大肠杆菌、鼠伤寒沙门菌、单增李斯特菌、枯草芽孢杆菌),XM-48菌株具有生长优势但没有明显的抑菌活性;结合生理生化和分子水平序列聚类分析,发现XM-38为干酪乳杆菌,XM-48为一株新的乳酸菌菌株。     

自然发酵酸菜汁中乳酸菌的分离鉴定及抑菌活性的分析

为了检测乳酸菌的抑菌活性,试验从自然发酵酸菜汁中分离、纯化出10株乳酸菌,通过体外试验筛选出4株产酸力较强的乳酸菌,经生理和生化鉴定分别为植物乳杆菌、干酪乳杆菌、嗜酸乳杆菌和短乳杆菌。牛津杯抑菌试验结果表明:4株乳酸菌对大肠杆菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌均有明显的抑菌作用,而对肺炎克雷伯菌和白色念珠菌无效;产酸量大的菌株抑菌作用也强,推测其抑菌作用与低酸环境有关。说明研究和开发乳酸菌抑菌产品具有广阔前景。     

鸡肠道内乳酸菌的分离鉴定及体外抑菌试验

为获得鸡肠道内抑菌效果好、适应性强的乳酸菌,从健康鸡小肠内容物中分离乳酸杆菌,并对其进行生化鉴定。结果成功从鸡小肠中分离出6株细菌。通过革兰氏染色和生化鉴定,发现这6株细菌分别是微小乳酸菌(L.minor)、约氏乳杆菌(L.johnsonii)、弯曲乳杆菌(L.curvatus)、肠乳杆菌(L.intestinalis)、嗜酸乳杆菌(L.acidlophilus)、植物乳杆菌(L.plantarum)。对分离到的6株乳酸菌进行体外抑菌试验,结果表明肠乳杆菌(L.intestinalis)对大肠杆菌有一定的抑菌作用。该研究为后期开发益生菌制剂奠定了一定的基础。     

笼养成年蛋鸡盲肠中乳酸菌的分离与鉴定

试验从笼养蛋鸡盲肠内容物中分离乳酸菌,采用MRS平板分离乳酸菌,经过革兰氏染色、菌落形态观察及糖发酵生化管鉴定为乳酸菌种属。结果显示,分离出15株革兰氏阳性菌,经抑菌试验选出7株乳酸菌,发酵生化鉴定为绿色乳杆菌、瑞士乳杆菌、果糖乳杆菌、德氏乳杆菌、肠膜明串珠菌葡聚糖亚种、假肠膜明串球菌和肠膜明串珠菌乳脂亚种。     

一株乳酸菌的分离鉴定及生物学特性研究

以鸡肠道和泡菜为分离源,采用常规微生物学方法分离乳酸菌,筛选到一株产酸性能良好的菌株W7。结合对菌株的形态观察、生理生化试验以及16S rRNA基因序列分析,对菌株进行鉴定,并对W7进行特性试验研究。结果表明,W7为植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）,在培养22h时,活菌数最高;耐酸效果好,在pH值为2.0时,存活率仍然为100%;在胆盐浓度为0.30%时,仍然可以生长;抑菌效果较好;黏附率为79.9%。     

四株猪源乳杆菌的分离鉴定及生物学特性研究

本试验旨在筛选优质猪源乳杆菌,为养猪生产过程中微生态制剂的开发奠定基础。通过16S r RNA分析鉴定,本试验从健康成年猪粪中成功分离出四株猪源乳杆菌,并对这四株菌的生长性能、生理生化特性、耐酸、耐高温、耐胆盐和耐药性进行了综合测试。结果表明：ZLgz1227具有最优的综合性能,其耐胆盐性能最强,过胃存活率分别高于其他三种菌株110.56%、44.3%、4.98%。研究表明这四株菌都有制成益生菌制剂的潜能,为实际生产提供一些后备益生菌菌株参考。     

葡萄枝叶自然青贮中优选乳酸菌的分离与鉴定

本研究旨在对葡萄枝叶青贮饲料中天然附着优势乳酸菌进行分离培养和鉴定,为葡萄枝叶资源的饲料化利用提供可靠的乳酸菌资源。利用分子生物学鉴定法(16S rDNA序列分析)与传统的微生物鉴定法对分离出的乳酸菌进行鉴定,最终得到5株乳酸菌菌株,其中Q1菌株鉴定为肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenterica),Q2和Q5菌株鉴定为屎肠球菌(Enterococcus faecium),Q3菌株鉴定为铅黄色肠球菌(Enterococcus casseliflavus),Q4菌株鉴定为海氏肠球菌(Enterococcus hirae)。所筛选出的乳酸菌除L.mesenterica在pH为9时不能生长,其余菌株均能在pH 3～9,4℃～45℃,3%和6.5% NaCl浓度环境下生长;其中E.hirae菌株在培养至24 h后其菌液pH可达到4.11,OD值为1.42,表现出最强的生长及产酸能力。     

杂交构树青贮饲料中优良乳酸菌的分离与鉴定

本试验对杂交构树(Broussonetia papyrifera)青贮饲料中附着的优良乳酸菌进行了分离培养,利用传统微生物培养和16S rDNA序列分析对分离的乳酸菌进行鉴定,以期为提高杂交构树青贮品质提供乳酸菌资源.试验最终分离得到8株优良乳酸菌,其中菌株G4,G7,G9被鉴定为植物乳杆菌(Lactobacillus...     

苜蓿青贮饲料中优良乳酸菌菌株的筛选

本研究从苜蓿（Medicago sativa L.）青贮饲料中分离得到若干株乳酸菌,对所有菌株进行生长曲线和产酸速率测定,发现其中8个菌株产酸速率较快,能于24h内将培养基pH值降至4.0以下。根据形态、生化鉴定及16S rDNA同源性序列分析,鉴定4株为植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）,2株为戊糖片球菌（Pediococcus pentosaceus）,1株为类植物乳杆菌（Lactobacillus paraplantarum）,1株为副干酪乳杆菌（Lactobacillusparacasei）。通过适当的工艺处理其有望作为乳酸菌添加剂单独或混合添加入青贮中以提高青贮饲料品质。     

内蒙古发酵酸乳制品中乳酸菌的分离鉴定

以采集自内蒙古锡林郭勒盟正蓝旗的2份发酵酸乳样品为研究对象,采用传统纯化培养技术、16S rDNA基因序列测定并构建系统发育树的方法,对样品中的乳酸菌进行了分离鉴定,以期解析发酵乳中乳酸菌的多样性,积累食品微生物资源。研究结果显示,共分离15株乳酸菌,被鉴定为3个属9个种,3个属分别为乳酸乳球菌属、明串珠菌属和乳杆菌属,9个种分别为乳酸乳球菌叶蝉亚种（Lactococcus lactis subsp. hordniae,3株）、乳酸乳球菌（Lactococcus lactis,1株）、乳酸乳球菌乳脂亚种（Lactococcus lactis subsp. cremoris,1株）、乳明串珠菌（Leuconostoc lactis,3株）、肠膜明串珠菌肠膜亚种（Leuconostoc mesenteroides subsp. mesenteroides,1株）、肠膜明串珠菌右旋葡聚糖亚种（Leuconostoc mesenteroides subsp. dextranicum,1株）、植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum,1株）、副干酪乳杆菌（Lactobacillus paracasei,3株）和干酪乳杆菌（Lactobacillus casei,1株）。综上表明,该研究采集的酸乳样品中乳酸菌资源丰富,是内蒙古传统乳制品优良发酵剂的研发和产业化生产的潜在微生物资源。     

Screening of antifreeze-thawed lactic acid bacteria and their effects on oat silage fermentation quality and aerobic stability北大核心CSCD

The effects of freeze-thaw conditions on the fermentation quality and aerobic stability of oat silage were investigated. Four strains of freeze-thaw-resistant lactic acid bacteria（LAB）with rapid growth and efficient acid production were screened from 437 strains,which had been isolated from the Qinghai-Tibetan Plateau. Based on physiological and biochemical characteristics and 16S rRNA gene sequence alignment,the four strains were identified as Lactobacillus plantarum 157（LP157）,L. plantarum 160（LP160）,Lactobacillus brevis 248（LB248）,and Lactobacillus pentosus 260（LPE260）. In order to investigate their effects on the fermentation quality,nutrient composition,microbial counts and aerobic stability of oat silage under freeze-thaw conditions,seven treatments were tested as follows：1）LP157;2）LP160;3）LB248;4）LPE260;5）LP160+Lactobacillus rhamnosus 753 mixture （MIX）;6）A commercial bacterial silage additive（COM）;7）The same amount of sterilized distilled water（CK）. All treatments were ensiled for 60 days at a constant temperature of 20 ℃ and under a 20 ℃/-5 ℃ regime alternating every 12 h（freeze-thaw）. LP inoculation improved silage quality：The pH and dry matter loss in silages inoculated with LP157,LP160,LB248 and LPE260 were significantly lower than CK（P<0. 05）and lactic acid and acetic acid contents were significantly higher than CK（P<0. 05）,and the growth of spoilage micro-organisms such as coliform bacteria,yeast and mold were inhibited,both with fermentation at constant 20 ℃ and under freeze-thaw conditions. After aerobic exposure for 5 days,the pH and NH3-N of silages treated with LP157,LP160,LB248 and LPE260 were significantly（P<0. 05） lower than CK,MIX and COM. The aerobic stability of oat silage was improved,especially when inoculated with LP160（70 h vs. CK 11 h）. The results show that the four screened strains can be used as effective LAB inoculants for silage preparation in the freeze-thaw environment of the Qinghai-Tibetan Plateau. © 2022 Editorial Office of Acta Prataculturae Sinica. All rights reserved.     

不同浓度赤霉酸对饲料添加菌生长的影响

为研究不同浓度的赤霉酸对饲料添加菌生长的影响,用2种不同浓度的赤霉酸溶液单独添加饲料乳酸菌（A4+A7）和纤维素分解菌（Nf+Y6）进行培养52 h,其中每4 h作一个单位测定出OD_{600 nm}值并绘制生长曲线,分析不同浓度的赤霉酸对饲料添加菌生长的影响。结果表明,赤霉酸浓度为10 mg/L时,各组OD_{600 nm}值分别为0.64、0.70、0.84、0.78、0.72,其中试验组2的OD_{600 nm}值与对照组和其他试验组相比有明显增高,总活菌数高达11.6×10⁸ CFU/mL,比对照组（1.63×10⁸ CFU/mL）高7倍以上;当赤霉酸浓度增加到20 mg/L时,各组OD_{600 nm}值分别为0.64、0.60、0.59、0.59、0.63,其中各试验组的OD_{600 nm}值与对照组相比无明显差异（P>0.05）,试验组活菌数（1.60×10⁸ CFU/mL）与对照组相比（1.63×10⁸ CFU/mL）无明显差异（P>0.05）。通过试验数据和生长曲线得知赤霉酸浓度在10 mg/L时能促进乳酸菌和纤维素分解菌的生长繁殖;赤霉酸浓度为20 mg/L时乳酸菌和纤维素分解菌的生长速度明显下降。综上提示,适当添加赤霉酸对饲料添加菌生长有明显的促进作用,赤霉酸浓度过高则饲料添加菌的生长量降低。     

青藏高原燕麦附着耐低温乳酸菌的筛选与鉴定

为筛选出能改善燕麦低温青贮发酵品质的潜力乳酸菌菌株,对青藏高原不同海拔地区种植的燕麦表面附着乳酸菌资源进行了采集,通过限制性培养方法筛选耐低温菌株,对其耐酸性和耐盐性、产酸速率和生长速度进行分析比较,并用16S rDNA序列分析方法进行了鉴定。结果表明：从不同海拔地区的燕麦植株上初步分离到232株乳酸菌,经进一步革兰氏染色、镜检观察和过氧化氢酶试验筛选,获得56株菌株,对其进行低温筛选,共得到18株耐低温乳酸菌资源,均能在5~20 ℃、3.0%和6.0% NaCl以及pH为3.0~5.0条件下生长,其中14株为同型发酵乳酸菌,4株为异型发酵乳酸菌。14株同型发酵乳酸菌中,OCPP₃、OL₃、OL₈、OL₂₅、OL₃₆、OL₅₄、OL₇₇和OL₁₂₂的产酸和生长速率较高,3株（OCPP₃、OL₃₆和OL₇₇）为戊糖片球菌,2株（OL₃和OL₅₄）为戊糖乳杆菌,3株（OL₈、OL₂₅和OL₁₂₂）为植物乳杆菌。在培养25 h后,菌株OL₇₇的OD值在所有培养菌株中最高（2.52）,其次为OL₅₄（2.50）。从耐低温、产酸速率和生长速率及多样性角度综合考虑,戊糖片球菌OL₇₇、戊糖乳杆菌OL₅₄和植物乳杆菌OL₁₂₂适宜作为青藏高原地区燕麦低温青贮的备选添加菌株。     

驼乳和牛乳混合干酪的研制

研究了驼乳和牛乳混合干酪的最佳配方,及成熟期间理化和微生物指标的变化。最佳工艺配方为：牛乳的添加比例为40%,发酵剂的添加量为0.06g/L,CaC12的添加量为0.08g/L,凝乳酶的添加量为0.24g/L,凝乳温度为35℃,凝乳pH为6.1。混合干酪成熟期间,蛋白质、脂肪、乳糖、水分含量降低;硬度、咀嚼性增强,黏着性和弹性下降;pH4.6-SN、12%TCA-SN和5%PTA-SN的含量均有不同程度的上升;发酵剂乳酸菌数逐渐下降,非发酵剂活菌数逐渐升高。     

添加不同乳酸菌对燕麦低温青贮发酵的影响

为了分析前期筛选出较耐低温不同乳酸菌（Lactic acid bacteria，LAB）对燕麦青贮发酵的影响，本试验以'陇燕5号’燕麦为原料，设置对照（CK）、商用菌株SLI和较耐低温菌株OL77，OL54及OL122共5个处理，在15℃，10℃和5℃低温下自然发酵45 d后进行营养成分、发酵品质和微生物数量的测定。结果表明：乳酸菌添加及温度对燕麦青贮的营养成分、发酵品质、微生物数量均有极显著影响。随着温度从15℃降至5℃，CK的粗蛋白（Crude protein，CP）降低了18.92%，氨态氮（Ammonia nitrogen，NH₃-N）增加了58.47%；与SLI相比，耐低温菌株OL77在提高干物质（Dry matter，DM）和CP、降低NH₃-N水平方面的效果优于OL54和OL122；添加剂在各温度处理下均提高了燕麦青贮发酵品质，15℃下添加OL77后燕麦青贮的pH值较CK和SLI分别降低了8.94%和1.57%，乳酸分别增加了79.23%和29.41%，乳酸菌数量分别增加了50.24%和15.61%。3个耐低温菌株中，OL77总体表现最优，促进燕麦低温发酵的效果最好。