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1.
吴崇源  毛楠  郭川  刘楠  杨高文  张英俊 《草地学报》2023,(11):3251-3257
甲烷(CH4)是1种主要的温室气体。为了探究温性草甸草原放牧系统的CH4通量特征,本研究设置了围封(CK)、持续放牧(CG)、早期休牧(R1)、中期休牧(R2)以及晚期休牧(R3)等多个处理,通过监测放牧季的土壤CH4通量并测定放牧绵羊的CH4排放量,计算了草地土壤的CH4“碳汇”贡献度。结果表明:草地土壤在不同日期吸收CH4的通量范围是25.37~79.46μg·m-2·h-1,吸收值在不同处理之间差异极显著(P<0.001),且CG,R1,R2和R3处理均高于CK处理;放牧绵羊的CH4排放量在R3处理中最高而在R2处理中最低(P<0.001);草地土壤吸收CH4-C的贡献度在不同处理之间也具有极显著的差异(P<0.001),CG处理最高而R1处理最低。综上所述,季节性休牧既可以增加草地土壤对CH4的吸收,也会减少绵羊的CH  相似文献   

2.
采用免疫组织化学SABC法,研究了外源性孕酮对妊娠小鼠着床早期子宫内膜转化生长因子β1Ⅰ型受体(TGFβRⅠ)表达的影响。结果显示:(1)孕4d,注射2mg孕酮组,子宫表面上皮、腺上皮及基质中TGFpRI表达增加,与对照组和注射孕酮4mg组差异显著(P<0.01)。注射孕酮4mg组,表面上皮TGFβRⅠ表达无显著增加;腺上皮细胞TGFβRⅠ表达稍有下降,但与对照组差异不显著;基质细胞TGFβRⅠ表达明显增加,与对照组差异显著(P<0.01)。(2)孕5d,试验组表面上皮和腺上皮TGFβRⅠ随着孕酮剂量的加大,其表达下降;基质细胞TGFβRⅠ表达则随孕酮剂量的增加而增多,且3组间差异显著(P<0.01)。(3)孕6d,注射2mg组,表面上皮及基质细胞TGFβRⅠ表达增加,与对照组差异显著(P<0.01),而腺上皮TGFβRⅠ表达呈下降趋势。注射4mg组,表面上皮、腺上皮及基质表达变化趋势同孕5d。结论:外源性孕酮对妊娠小鼠着床早期子宫内膜转化生长因子β1型受体表达有一定影响,即孕酮可显著提高基质TGFβRⅠ表达,但对腺上皮TGFβRⅠ的表达有下调作用;对表面上皮TGFβRⅠ的表达作用不定,2mg使表面上皮TGFβRⅠ表达增多,4mg使TGFβRⅠ表达降低。  相似文献   

3.
为探究H240R和MGF505-7R基因对非洲猪瘟病毒(ASFV)复制水平的影响,本研究采用PCR扩增ASFV HLJ/18株H240R基因和MGF505-7R基因阅读框前后各1 000 bp的同源臂,分别克隆至p BS-EGFP及p BSMcherry载体中,构建同源臂质粒p BS-GFP-H240R和p BS-Mcherry-MGF505-7R,采用PCR和测序鉴定正确。根据CRISPR/Cas9系统sg RNA设计原则设计分别靶向H240R和MGF505-7R基因的小向导RNA (sgRNA),并克隆至p X330载体中,构建重组质粒p X330-sg H240R和p X330-sg MGF505-7R,经测序鉴定正确后,将线性化的同源臂质粒p BS-GFP-H240R与p X330-sg H240R共转染猪肺泡巨噬细胞(PAM),再以ASFV感染,通过观察荧光并采用噬斑筛选纯化,构建H240R基因缺失病毒ASFV-ΔH240R;采用上述类似的方式构建MGF505-7R基因缺失病毒ASFV-Δ7R;在ASFV-ΔH240R的基础上,将线性化的同源臂质粒p BS-Mcherry-M...  相似文献   

4.
为了解克克霉-Q型和肉桂精油两种添加剂对苜蓿青贮品质的影响,试验分别将1 mL/kg(K1组)、1.5 mL/kg(K2组)、2 mL/kg(K3组)的克克霉-Q型和60μL/kg(R1组)、90μL/kg(R2组)、120μL/kg(R3组)的肉桂精油添加到苜蓿原料中进行青贮,另设不加青贮添加剂的空白对照(CK)组,于青贮第42天取样测定营养品质,第1,3,7,14,28,42天取样测定发酵品质。结果表明:青贮第42天时,K1组粗蛋白含量最高,显著高于CK组(P<0.05);R3组干物质及乳酸含量最高,显著高于CK组(P<0.05),与K1组差异不显著(P>0.05);R3组pH值及乙酸、丙酸含量均最低,显著低于CK组(P<0.05)。等权关联度和加权关联度排序相同,不同添加剂处理下苜蓿青贮的关联度表现为R3组>K1组>K3组>K2组>R2组>R1组>CK组。说明肉桂精油可应用于苜蓿青贮实际生产中,且添加120μL/kg时青贮品质最好。  相似文献   

5.
旨在探究TAS1R3基因通过mTOR对从江香猪自噬相关基因表达的影响。本试验选择30日龄健康雄性从江香猪3头,采集睾丸组织并培养出睾丸间质细胞。将构建成功的干扰载体和空载体转染至细胞中,利用qRT-PCR检测其对TAS1R3基因表达影响,运用qRT-PCR和Western blot检测TAS1R3基因干扰后对味觉受体第一家族一号受体(TAS1R1)、细胞外信号调节激酶1(ERK1)、细胞外信号调节激酶2(ERK2)、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、BECN1和微管相关蛋白1轻链3β(MAP1LC3B)表达的影响。结果表明,当TAS1R3基因被干扰后,相较于shRNA-NC对照组,TAS1R1、ERK1、ERK2、mTOR基因mRNA表达量均极显著降低(P<0.01),自噬因子BECN1和MAP1LC3B表达量极显著升高(P<0.01)。Western blot结果表明当TAS1R3基因被干扰后,与shRNA-NC对照组相比,蛋白T1R3、T1R1、p-mTOR、p-S6K1、p-ERK12均极显著降低(P<0.01),而自噬蛋白Beclin 1表达量极显著升高(P<...  相似文献   

6.
为确定在新疆地区紫花苜蓿(Medicago sativa)上发生的疑似丛枝病的病害种类,本研究提取了193个疑似紫花苜蓿丛枝病植株的总DNA,并以报道的植原体检测通用引物R16mF2/R16mR1和R16F2/R16R2为引物对其进行了巢式PCR扩增。其中23个样品获得了1.2kb的特异片段,检出率为16.8%,确定该病害为紫花苜蓿丛枝病。构建的系统发育树结果表明,该植原体为16SrⅤ-B亚组成员,与榆树黄化植原体组(Elm Yellows Group,16SrⅤ)中卫矛白化(Euonymus Whitening)植原体的同源性高达99.1%。本研究首次采用分子生物技术确定了新疆紫花苜蓿丛枝病的病原是植原体,明确了其分类地位,该结果可为该病害的早期诊断、检测提供理论依据。  相似文献   

7.
猪黑素皮质激素受体-4(melanocortin-4 receptor,MC4R)基因是影响猪生长肥育的主效基因之一,为了进一步研究MC4R基因的生物学功能,制备高成活率转基因猪,通过采用条件性诱导表达载体系统,PCR方法扩增了猪MC4R基因完整编码区,四环素诱导表达系统(Tet-on)的启动子调控区与转录调节元件。采用双酶切和连接等方法将上述元件连接到pcDNA3.1(+)上,构建了重组质粒pcDNA3.1(+)-rtTA-PTight-MC4R。经双酶切和测序鉴定,结果显示片段正向连接且片段全长测序正确。试验成功构建了四环素诱导的pcDNA3.1(+)-rtTA-PTight-MC4R真核表达载体, 并能在时间特异性方面调控MC4R基因的表达。  相似文献   

8.
以三江源玛多县不同退化程度高寒草原土壤为研究对象,采集 0~30 cm 土层的 90 个土壤样品,测定土壤样品的光谱反射率和有机质(SOM)含量,分析不同光谱数据转换方式与土壤 SOM 含量的相关性,据此挑选 P<0. 001 水平的显著波段作为特征波段,并与土壤 SOM 含量建立多元逐步回归 (MLSR)、支持向量机(SVM)、决策树(DT)、随机森林(RF)模型。结果表明:1)高寒草原土壤 SOM 含量属中等变异,且与土壤原始反射率呈负相关,与倒数对数呈正相关;2)光谱数据的数学转换扩大了光谱的吸收特征,log(1/R)、R’、[log(1/R)]’与土壤 SOM 含量相关系数绝对值的最大值比 R 分别提高了 0. 099、0. 156、0. 160;3)RF 反演模型精度高于其他反演模型,Log(1/R)‐RF 模型的预测效果较好,其建模组和检验组的决定系数(R2 )、均方根误差(RMSE)分别为 0. 949 1、0. 252 69 和 0. 717 23、0. 496 9,可以准确估算高寒草原土壤 SOM 的含量。  相似文献   

9.
有报道证实,缺失重要功能基因EP152R的非洲猪瘟病毒(ASFV)不能有效复制。为了筛选靶向ASFV EP152R基因的小向导RNA (sgRNA),分析EP152R基因对ASFV复制的影响,本研究利用簇状规则间隔的短回文重复序列及其相关蛋白9 (CRISPR-Cas9)核酸酶系统(CCTop)并利用猪的基因组作为脱靶对象设计并筛选靶向ASFV EP152R基因(72387nt~72845nt)的sg RNA,并采用非随机整合报告系统(TIDE)计算各对sg RNA的编辑效率确定最佳sg RNA。结果显示,筛选了5对靶向敲除ASFV EP152R基因的sg RNA,其中3对sg RNA对EP152R基因的编辑效率达30%~42%,另外两对sg RNA的编辑效率低于10%。将筛选的3对sg RNA退火后分别克隆至p-LentiCRISPRv2载体中,构建3个重组慢病毒质粒p-LentiCRISPRv2-gREP152R-1/2/3,并采用菌液PCR及测序鉴定正确后分别与2个辅助质粒共转染HEK293T细胞,72 h后获得各慢病毒并分别感染野猪肺细胞(WSL细胞),通过嘌呤霉素筛选表达各s...  相似文献   

10.
云南省种羊场于80年代从澳大利亚引入罗姆尼种羊,并配套引入R60型强力环流式喷洗药浴设施一套。80年代末期在R60型的基础上自行设计制造了R30型喷洗设施,供种羊药浴使用(同样也可供牛药浴用)。1999年我们把原先引入的这套R60型喷洗设施再进行改造供短角牛药浴使用(同样也可供羊药浴用),效果较理想。现以R60型设施为例进行简述。  相似文献   

11.
为有效控制蒿板青颗粒的质量,采用高效液相色谱法对蒿板青颗粒中有效成分一枝蒿酮酸和 (R, S) -告依春含量进行了研究。采用C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为乙腈(A)- 0.4%磷酸水溶液(B),梯度洗脱(0 min,5% A;0~10min,5% A→15% A;10~25min,15% A→30% A;25~40min,30% A;40~41min,30% A→5% A;41~45min,5% A),检测波长为245 nm,流速1.0mL/min,柱温35℃。结果表明,在该色谱条件下,辅料对一枝蒿酮酸和 (R,S) -告依春出峰均无干扰,一枝蒿酮酸和 (R, S) -告依春与相邻杂质峰分离良好;一枝蒿酮酸、(R, S)-告依春浓度分别在24~120 μg /mL和4.8~24 μg /mL范围内,峰面积与其对应的含量呈现良好的线性关系(一枝蒿酮酸R2 = 0.9992,3组样品中一枝蒿酮酸的平均回收率分别为98.4%、97.9%和98.1%,RSD分别为1.31%、1.02%和1.33%;(R, S)-告依春R2 = 0.9997,3组样品中(R, S)-告依春的平均回收率分别为98.8%、98.3%和97.5%,RSD分别为0.56%、0.88%和1.14%)。该方法简便、分析快速、准确度高,重复性好,适用于蒿板青颗粒中有效成分一枝蒿酮酸和(R, S)-告依春的质量控制。  相似文献   

12.
提取伪狂犬病毒(PRV)Bartha—K61株基因组DNA为PCR扩增模板,并根据GenBank已发表的PRV Ka—plan株UL区UL25、UL24、UL23、UL22基因序列,选择保守序列设计了两对引物,分别扩增出位于UL23(TK)两侧(含部分TK基因)的可用于同源重组的左臂片段(L)和右臂片段(R),L包括部分UL25、全部UL24、部分TK,R包括部分TK及部分UL22,L和R的拼接片段中TK基因内部缺失270个核苷酸。将L片段和R片段克隆于pBlueseript M13—载体上,获得pSKLR;再将绿色荧光蛋白载体pEGFP—C1上含GFP及其多克隆位点的完整的基因表达盒插人pSKLR的L片段和R片段之间构成转移载体pSKLRG。提取pSKLRG质粒,经单酶切线性化后用脂质体与PRV Bartha—K61株共转染143TK^-细胞,在细胞培养液中有5—溴脱氧尿嘧啶(BrdU)存在的条件下筛选出表达绿色荧光蛋白的重组PRV Bartha—K61毒株:PRV rBGFP。  相似文献   

13.
试验旨在研究繁殖期鸽嗉囊组织形态学及生长因子含量动态变化规律。选取52对白羽王鸽肉种鸽(60周龄,公母配对),于孵化期第2(I2)、4(I4)、6(I6)、10(I10)、14(I14)、17(I17)天和哺育期第1(R1)、4(R4)、7(R7)、10(R10)、15(R15)、20(R20)、25(R25)天取嗉囊组织进行测定(每个时间点雌、雄鸽各4只)。嗉囊组织形态、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)及表皮生长因子(EGF)检测结果:繁殖期,雌雄鸽嗉囊上皮厚度与嗉囊IGF-1及EGF含量呈正相关,三者均于R1时期存在最大值;雌雄鸽嗉囊内壁相邻褶皱距离均于R1时期减少至最小值;与I2时期相比,R1时期雌雄鸽嗉囊上皮嗜酸性细胞形态增大,形状为粗糙的多边形。雌鸽嗉囊上皮厚度、嗉囊内壁相邻褶皱距离、嗉囊IGF-1和EGF浓度分别于R1、R10、I14和I17时期显著大于雄鸽。试验表明,繁殖期种鸽嗉囊生长因子可能参与调控嗉囊形态学变化过程,且存在性别差异。  相似文献   

14.
扎伊尔型埃博拉病毒(EBOV)的感染会引起人类以严重出血和发热为主要症状的传染病,死亡率高达90%,对公共卫生构成严重威胁。EBOV囊膜蛋白(GP)是病毒主要的免疫原性蛋白。本团队前期的研究表明,以新城疫病毒(NDV)为载体构建表达EBOV GP蛋白的重组病毒rLa-EBOVGP改变了 NDV的侵入方式。为了研制出安全性更高的埃博拉候选疫苗株,本研究将EBOV GP蛋白的融合域I~(532)突变为R后插入NDV LaSota疫苗株(rLa)基因组中,通过反向遗传学操作拯救表达EBOV GP(I~(532)R)蛋白的重组NDV,并将经PCR鉴定正确的重组病毒在鸡胚中连续传代检测了其的体外遗传稳定性。RT-PCR鉴定结果显示,EBOV突变的GP(I~(532)R)蛋白基因正确插入了 NDV基因组中,表明获得了重组病毒rLa-EBOVGP (I~(532)R);在鸡胚中连续传20代后,经RT-PCR扩增EBOV GP(I~(532)R)基因后经测序鉴定,结果显示rLa-EBOVGP(I~(532)R)能够保持良好的遗传稳定性。利用蔗糖梯度超速离心法纯化rLa、rLa-EBOVGP和rLa-EBOVGP(I~(532)R)病毒,分别进行western blot检测。结果显示,EBOV GP和GP (I~(532)R)蛋白均能够正确表达;将rLa、rLa-EBOVGP和rLa-EBOVGP (I~(532)R)分别感染BHK-21细胞后,利用激光共聚焦试验分析EBOV GP(I~(532)R)的表达和定位,结果显示GP(I~(532)R)能够表达且位于BHK-21细胞的细胞膜上;对纯化病毒利用免疫电镜观察病毒颗粒,结果可见rLa-EBOVGP (I~(532)R)与亲本病毒rLa结构特征相似,且GP (I~(532)R)蛋白能够嵌合在重组病毒粒子表面;生长动力学试验结果表明,rLa-EBOVGP(I~(532)R)与亲本株rLa在鸡胚中的生长特性基本一致,且能够稳定增殖;分别将重组病毒rLa-EBOVGP和rLa-EBOVGP(I~(532)R)经肌肉注射和滴鼻两种途径免疫小鼠,经稀释血清固定病毒的方法分别检测各组小鼠针对NDV和EBOV GP蛋白的中和抗体。结果显示rLa-EBOVGP (I~(532)R)能够诱导小鼠产生较高的针对NDV和EBOV GP蛋白的中和抗体。以上结果表明rLa-EBOVGP(I~(532)R)具有作为防控EBOV感染的储备性候选疫苗株的潜力。本研究为进一步研究GP(I~(532)R)的生物学功能奠定了基础。  相似文献   

15.
本文对高效表达鸡马立克氏病(MD)血清Ⅰ型疫苗毒株CVI988/Kispem gB基因的重组鸡痘病毒(rFPV—gB/R)和火鸡疱疹病毒(HVT)组成MD二价冻干疫苗时MD超强毒株(vvMDV)Md5和RB1B攻击后的免疫保护效果,实验室免疫效力试验的结果表明,HVT rFPV—gB/R二价冻千苗时超强毒株Md5和RB1B攻击时的免疫保护效果明显优于HVT冻干苗,接近CVI988/Rfispens的水平,本研究证明HVT rFPV—gB/R二价冻干疫苗是一种安全、方便、高效的疫苗。  相似文献   

16.
试验选用5头手术安装瘤胃、十二指肠和回肠末端T型瘘管的杂交改良阉牛,采用5×5重复设计,每期饲喂以玉米、棉粕、豆粕和氨化稻草为原料而配制的日粮,测定了十二指肠、回肠中内容物的干物质、粗蛋白和各种氨基酸的流量,并计算了各种氨基酸在十二指肠前端的理论浓度和实测浓度之间的回归方程。结果表明,到达十二指肠前端的粗蛋白实测流量(g/d,y)与理论流量(g/d,x)存在强相关,回归方程为:ycp=0.9647xcp+5.2998(R2=0.9636,n=5);各种氨基酸的实测浓度(y)与理论浓度(x)之间存在强相关(Ala、Val除外),它们分别为yAsp=0.7275xAsp+2.8943(R2=0.9964,n=5)、ySer=-3.1577xSer+20.864(R2=0.8474,n=5)、yGlu=0.9993xGlu-1.0355(R2=0.995,n=5)、yThr=0.8055xThr+0.7977(R2=0.8381,n=5)、yGly=0.5563xGly+3.6117(R2=0.8692,n=5)、yArg=1.5039xArg-3.0157(R2=0.8366,n=5)、yAla=-0.9182xAla+14.018(R2=0.5247,n=5)、yTyr=6.9071xTyr-22.162(R2=0.8235,n=5)、yPro=0.7962xPro+1.0732(R2=0.9207,n=5)、yVal=0.0758xVal+4.3453(R2=0.5597,n=5)、yPhe=-0.6437xPhe+8.6589(R2=0.9308,n=5)、yIle=4.4403xIle-17.329(R2=0.9509,n=5)、yLeu=1.8759xLeu-8.4109(R2=0.8723,n=5)、yHis=16.142xHis-35.564(R2=0.8962,n=5)、yLys=0.27  相似文献   

17.
为揭示行距和播量对河北滨海盐碱地苜蓿光合特性及产量的影响,本研究以‘中苜一号’为材料,设置了15 cm(R1),20 cm(R2),25 cm(R3)3个水平的行距和7.5 kg·hm-2(S0),15 kg·hm-2(S1),22.5 kg·hm-2(S2),30 kg·hm-2(S3),37.5 kg·hm-2(S4)5个水平的播量,共15个处理,研究了苜蓿叶片色素含量、荧光参数、光合曲线及产量的变化规律。结果表明:随着行距的增大苜蓿叶片叶绿素含量(Chlorophyll content, ChlM)和氮-黄酮醇指数(Nitrogen flavonol index, NFI)均呈下降趋势,R1S2处理的苜蓿叶片NFI最高。通径分析表明,行距和播量配置通过调节叶片ChlM,花青素含量(Anthocyanin content, AnthM),黄酮醇含量(Flavonol content, FlvM),最大光合效率(Maximal photochemical efficiency...  相似文献   

18.
为探究鸡TLR1A基因正选择nsSNP位点与沙门氏菌易感性的关联,挖掘其潜在的功能性位点,本研究利用多种生物信息学方法对ChTLR1A的21个nsSNP位点及基因的选择压力进行综合分析,筛选ChTLR1A正选择nsSNP功能性位点,深入分析其与鸡沙门氏菌易感性之间的相关性。结果显示,rs739087452(I388L)和rs313678806(C815R)在种上及种内均受到正选择作用,且rs739087452(I388L)位点的变异使其蛋白稳定性降低。rs313678806(C815R)与鸡沙门氏菌的易感性显著相关(P<0.001),C/C基因型为沙门氏菌抵抗型,表明rs313678806(C815R)可能是影响鸡沙门氏菌易感性的重要功能性SNP。本实验结果可为TLR1A基因标记在鸡抗病育种中的利用提供参考依据。  相似文献   

19.
探讨肝缺血再灌注损伤(HIRI)介导肝纤维化进程中基质金属蛋白酶-13(MMP13)和基质金属蛋白酶组织抑制剂2(TIMP2)的动态变化及作用。将70只C57雄性小鼠随机分为假手术组(Sham组)及肝缺血再灌注组(I/R 0 h组、I/R 3 h组、I/R 6 h组、I/R 72 h组、I/R 7 d组及I/R 15 d组)。夹闭肝门静脉、左叶和中叶的肝动脉,缺血90 min后开夹,分别再灌0、3、6、72 h、7 d及15 d,处死小鼠。检测小鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)的水平;测定肝组织中羟脯氨酸(Hyp)的含量;免疫组化法检测肝组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达量;RT-PCR检测肝组织MMP13和TIMP2 mRNA的表达水平;HE染色观察肝纤维化程度。结果显示,与Sham组相比,I/R 0 h、I/R 3 h及I/R 6 h组血清ALT、AST升高(P<0.05),I/R 72 h、I/R 7 d及I/R 15 d组下降(P<0.05)。I/R各组肝组织Hyp含量随再灌注时间延长逐渐升高,其中I/R 72 h、I/R 7 d、I/R 15 d组显著高于Sham组(P<0.05)。免疫组化显示,肝组织α-SMA的蛋白表达量随再灌注时间延长而逐渐增加。RT-PCR显示,I/R各组MMP13 mRNA的表达水平呈先高后低的趋势,与Sham组相比,I/R 0 h、I/R 3 h组显著升高(P<0.05)。而TIMP2的表达为先低后高,与Sham组相比,I/R 72 h、I/R 7 d及I/R 15 d组显著升高(P<0.05)。HE染色结果与上述变化趋势相一致。结果表明,在HIRI介导肝纤维化形成过程中MMP13与TIMP2呈动态的协同作用,共同促进肝纤维化的发生发展,是肝纤维化形成的关键因素。  相似文献   

20.
正蛋氨酸是家禽或猪的第一或第二限制性氨基酸。MetAMINO~(R)是一种固体商业氨基酸,而非液体类似物。快速而又完全的吸收确保MetAMINO~(R)高效的营养价值:良好的理化特性使得MetAMINO~(R)在饲料的生产中操作安全,容易精确添加,混合均匀。在饲料配方中使用MetAMINO~(R),可以降低蛋氨酸的安全系数,同时增加利润。MetAMINO~(R)是您理想的商业蛋氨酸源。  相似文献   

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