饲粮中添加牛至精油和莫能菌素对荷斯坦犊牛血清生化指标、消化酶活性及瘤胃微生物区系的影响

旨在研究牛至精油(oregano essential oil, OEO)与莫能菌素(monensin, MON)对荷斯坦犊牛血清生化指标、消化酶活性以及瘤胃微生物区系的影响。本试验前期阶段选用了体重相近((41.31±2.23) kg),体况良好的荷斯坦初生犊牛80头,随机分为4组,每组20头,采用单栏饲养。对照组饲喂全脂牛乳和颗粒饲料,其他3个试验组在饲喂全脂牛乳和颗粒饲料的基础上分别添加4 g·kg~(-1)牛至精油、3.6 g·kg~(-1)莫能菌素和7.6 g·kg~(-1)牛至精油和莫能菌素的混合物,饲喂至56、70日龄时,从每组中选取6头体重相近的公犊,颈静脉采血测定血清指标,并通过口腔导管的形式采集犊牛的瘤胃液,检测消化酶活性以及瘤胃微生物区系。结果表明:1)添加牛至精油显著提高了56日龄犊牛血清中TP、SOD、GSH和GSH-Px的浓度(P≤0.05);莫能菌素对56、70日龄犊牛BUN浓度有降低的趋势(P0.10)。2)牛至精油显著降低了56、70日龄犊牛瘤胃中产琥珀酸丝状杆菌的数量(P0.05),显著提高了白色瘤胃球菌的数量(P≤0.05);莫能菌素显著降低了56、70日龄犊牛瘤胃中原虫的数量(P≤0.05),并有降低白色瘤胃球菌数量的趋势(P0.10),在56日龄时,莫能菌素有降低犊牛瘤胃中黄色瘤胃球菌数量的趋势(P0.10);牛至精油和莫能菌素对56、70日龄犊牛瘤胃中溶纤维丁酸弧菌有显著的交互作用(P≤0.05);在56日龄时,牛至精油和莫能菌素对栖瘤胃普雷沃氏菌有交互作用的趋势(P0.10),而在70日龄时则呈显著的交互作用(P≤0.05)。3)牛至精油和莫能菌素对56、70日龄犊牛瘤胃中胃蛋白酶浓度有显著的交互作用(P≤0.05)。综上所述,饲粮中添加牛至精油可提高犊牛的免疫力和抗氧化能力。莫能菌素在抑制瘤胃内原虫数量上强于牛至精油,牛至精油对提高主要蛋白质降解菌数量的作用效果优于莫能菌素。总之,牛至精油可改善犊牛的健康状况以及调控瘤胃微生物区系,牛至精油作为天然植物抗生素可替代犊牛期预防性治疗的其他类抗生素生长促进剂。     

牛至精油和莫能菌素对荷斯坦犊牛瘤胃发酵参数和菌群结构的影响

本试验旨在研究牛至精油和莫能菌素对荷斯坦犊牛瘤胃发酵参数和菌群结构的影响。试验选用了80头新生荷斯坦犊牛,体重(41.31±2.23)kg,随机分为4组,每组20头。牛至精油组开食料中添加4.0 g/kg牛至精油,莫能菌素组开食料中添加3.6 g/kg莫能菌素,混合组开食料中添加4.0 g/kg牛至精油+3.6 g/kg莫能菌素,对照组开食料中不添加任何饲料添加剂。饲喂70 d后,从每组中选取体重相近的试验牛3头,采集12头犊牛的瘤胃液,检测瘤胃发酵参数,并运用高通量测序方法测定瘤胃菌群结构及多样性。结果表明:1)莫能菌素组和混合组的瘤胃液氨态氮含量显著低于对照组(P<0.05);莫能菌素组的瘤胃液丙酸比例显著高于对照组(P<0.05)。2)门水平上,牛至精油组、莫能菌素组、混合组的瘤胃液中变形菌门的相对丰度极显著低于对照组(P<0.01);莫能菌素组的瘤胃液中拟杆菌门的相对丰度有高于对照组的趋势(0.05≤P<0.10)。3)属水平上,牛至精油组、莫能菌素组和混合组的瘤胃液中普雷沃氏菌属的相对丰度有高于对照组的趋势(0.05≤P<0.10);牛至精油组的瘤胃液中丁酸弧菌属的相对丰度有低于对照组的趋势(0.05≤P<0.10);莫能菌素组的瘤胃液中奥尔森菌属的相对丰度显著低于对照组(P<0.05),瘤胃球菌属和丁酸弧菌属的相对丰度均有低于对照组的趋势(0.05≤P<0.10);混合组的瘤胃液中梭菌属的相对丰度有低于对照组的趋势(0.05≤P<0.10)。综上所述,饲粮中添加牛至精油可以调节瘤胃微生物的菌群结构,提高犊牛瘤胃中蛋白质降解菌的相对丰度,降低产丁酸菌属的相对丰度,同时可能避免或者缓冲莫能菌素对有益菌群的破坏。     

两种有机锌源对新生犊牛生长性能及锌代谢的影响

【目的】 探究饲粮中添加两种不同有机锌源对新生犊牛生长性能及锌代谢的影响。【方法】 试验随机选取30头新生荷斯坦母犊牛（体重39.4 kg±0.8 kg）,随机分为3组,每组10头牛,对照组只饲喂牛乳,不添加有机锌;蛋白锌组和蛋氨酸锌组每头牛分别添加522.82 mg/d的蛋白锌和467.88 mg/d的蛋氨酸锌（均相当于80 mg Zn/d）。试验期14 d。在犊牛1日龄及14日龄晨饲前,测量每头犊牛体重,计算平均日增重。每天记录牛乳采食量,用于计算平均日采食量和料重比。每天晨饲前,由专人对犊牛粪便进行评分,计算犊牛腹泻率。在14日龄晨饲前,采集犊牛血清样品,用于测定血清中的钙、磷、锌、铜和铁浓度、碱性磷酸酶和超氧化物歧化酶活性、金属硫蛋白、丙二醛浓度以及总抗氧化能力。【结果】 与对照组相比,添加蛋氨酸锌显著提高了犊牛平均日增重（P<0.05）,添加蛋白锌和蛋氨酸锌均降低犊牛腹泻率并提高血清锌浓度（P<0.05）,且蛋氨酸锌组犊牛的血清锌浓度显著高于蛋白锌组（P<0.05）。添加蛋氨酸锌显著降低犊牛血清铜浓度（P<0.05）,而蛋白锌组犊牛的血清铜浓度与对照组之间无显著差异（P>0.05）。添加有机锌源显著增加了犊牛血清中金属硫蛋白的浓度（P<0.05）,但仅蛋氨酸锌提高了犊牛血清碱性磷酸酶活性（P<0.05）;蛋氨酸锌能够显著提高犊牛血清中超氧化物歧化酶活性及总抗氧化能力（P<0.05）,但是蛋白锌对其无显著影响（P>0.05）;蛋白锌和蛋氨酸锌均可显著降低血清丙二醛浓度（P<0.05）。【结论】 饲粮中添加蛋氨酸锌能够提高犊牛的生长性能,降低腹泻率,改善机体锌代谢水平,且其效果优于蛋白锌,因此建议在犊牛饲粮中以蛋氨酸锌形式添加80 mg Zn/d。     

不同蛋白源日粮添加乳酸链球菌素对育肥湖羊瘤胃发酵及微生物菌群结构的影响

本试验旨在探究不同蛋白源日粮条件下添加乳酸链球菌素（nisin）对育肥湖羊瘤胃发酵及微生物菌群结构的影响。试验采用2×2因子设计,两因子分别为蛋白源[豆粕（SBM）、干玉米酒精糟及其可溶物（DDGS）]和nisin （添加水平为0或30.5 mg·kg^-1 DM）,两两组合,配制4种等氮等能日粮。选取32只体重（23±2） kg的断奶湖羊公羔,按照随机区组设计,根据体重分为2个区组（低体重组,16只;高体重组,16只）,每个区组的湖羊随机分配到4个组并分别饲喂对应日粮,单栏饲喂。试验预饲期1周,正式期9周,试验期结束时每组从高、低体重区组中各随机选取3只湖羊（共24只）进行屠宰,采集瘤胃内容物,提取微生物基因组DNA,利用Illumina MiSeq测序和Real-time qPCR方法分析瘤胃微生物菌群结构。研究结果表明,除Ruminococcaceae NK4A214 group和Unclassified Bacteroidetes相对丰度外,日粮蛋白源与nisin对其他所有测定指标（瘤胃发酵参数、瘤胃菌群数量、瘤胃细菌多样性及相对丰度等）均不存在交互作用（P>0.05）。日粮添加nisin对所有测定指标均无显著影响（P>0.05）。与饲喂豆粕湖羊相比,饲喂DDGS湖羊瘤胃乙酸、氨态氮浓度及总支链脂肪酸（BCVFA）浓度显著降低（P<0.05）。qPCR结果显示,饲喂不同蛋白源日粮湖羊瘤胃总菌、真菌及甲烷菌数量均无显著差异（P≥0.053）,但相对于饲喂豆粕湖羊而言,饲喂DDGS湖羊瘤胃内原虫和嗜氨梭菌（C.aminophilum）数量显著降低（P<0.05）。Illumina-MiSeq测序结果表明,饲喂DDGS湖羊瘤胃内细菌Chao1指数和ACE指数显著升高（P<0.05）。不同日粮处理组在门水平上的优势菌门均为Bacteroidetes及Firmicutes;在属水平各处理组的主要优势菌属为Prevotella 1、Christensenellaceae R-7 group和Ruminococcaceae NK4A214 group。饲喂不同蛋白源湖羊瘤胃细菌在门水平上并未产生显著影响（P≥0.14）;在属水平上,饲喂DDGS湖羊瘤胃Pseudobutyrivibrio和Roseburia丰度均显著高于饲喂豆粕湖羊（P<0.05）,而Butyrivibrio 2以及Ruminococcaceae UCG-005的相对丰度显著低于饲喂豆粕湖羊（P<0.05）。综上所述,使用DDGS作为日粮蛋白源改变了湖羊瘤胃发酵参数及微生物菌群结构,原虫和C.aminophilum数量的降低可能是导致瘤胃氨态氮浓度显著降低的主要原因;日粮添加30.5 mg·kg^-1 DM的nisin对育肥期湖羊瘤胃发酵参数及微生物菌群结构均无显著影响。     

载锌蒙脱石对肉鸡生产性能、免疫功能及肠道组织形态的影响

本试验旨在研究载锌蒙脱石（zinc-montmorillonite,Zn-MMT）对肉鸡生长性能、屠宰性能、免疫功能及肠道形态的影响。选择1日龄健康科宝公雏288只,按体重随机分成6个处理组,每处理6个重复,每个重复8只仔鸡。对照组（CK）饲喂玉米-豆粕型基础日粮,正对照组饲喂基础日粮添加40 mg·kg^-1 ZnSO₄,试验组分别在基础日粮中添加20、40、60和80 mg·kg^-1 Zn-MMT（均以Zn含量计算）,自由采食饮水,试验42 d,采集肠道和脾组织,并测定脾IL-2、TNF-α、IgG、IgA基因表达及肠道绒毛高度与隐窝深度。结果表明：1）与CK和ZnSO₄组相比,Zn-MMT对肉鸡平均日采食量（average daily feed intake,ADFI）无显著影响（P>0.05）,但80 mg·kg^-1 Zn-MMT显著降低了1~21、22~42及1~42日龄的仔鸡平均日增重（average daily gain,ADG）（P<0.05）,且40 mg·kg^-1的Zn-MMT显著降低1~42日龄的料重比（feed to gain ratio,F/G）（P<0.05）。2）相比CK组,添加ZnSO₄和60 mg·kg^-1的Zn-MMT显著提高21日龄法氏囊指数（P<0.05）,且60 mg·kg^-1的Zn-MMT提高42日龄法氏囊指数（P<0.05）。同时,ZnSO₄、20和40 mg·kg^-1的Zn-MMT显著提高42日龄脾IgG的表达（P<0.05）。同时,ZnSO₄组显著提高脾IgA的表达（P<0.05）。相比CK和ZnSO₄组,20 mg·kg^-1的Zn-MMT显著提高脾TNF-α表达,添加40、60和80 mg·kg^-1的Zn-MMT显著提高脾IL-2的表达（P<0.05）。3）与CK相比,Zn-MMT对肉鸡屠宰性能无显著影响（P>0.05）。4）相比CK与ZnSO₄组,添加40 mg·kg^-1的Zn-MMT可以显著提高十二指肠、空肠的绒毛高度（villus height,VH）和绒毛高/隐窝深（villi height to crypt depth ratio,V/C）（P<0.05）,且显著降低十二指肠的隐窝深度（crypt depth,CD）（P<0.05）,但对回肠的CD无显著影响（P>0.05）。同时,相比CK组,40 mg·kg^-1的Zn-MMT显著提高回肠的VH和V/C（P<0.05）,但与ZnSO₄组无显著差异（P>0.05）。添加ZnSO₄对肉仔鸡十二指肠和空肠的VH、CD、V/C及回肠的VH、CD均无显著影响（P>0.05）,但能显著提高回肠的V/C（P<0.05）。结果显示,日粮添加Zn-MMT显著提高饲料转化率、增强机体免疫力,促进肠道绒毛的发育。     

葛根素对饲喂氧化大豆油肉鸡小肠黏膜屏障功能及抗氧化能力的影响

本试验旨在研究葛根素对饲喂氧化大豆油饲粮黄羽肉鸡小肠黏膜形态结构、紧密连接蛋白基因表达及抗氧化能力的影响。试验采用2×2因子设计,因子包括油脂质量（新鲜大豆油和氧化大豆油）和葛根素添加水平（0、750 mg·kg^-1）。选取健康1日龄雌性黄羽肉鸡360只,随机分成4个处理组,分别为新鲜大豆油饲粮组、新鲜大豆油+葛根素（750 mg·kg^-1）饲粮组、氧化大豆油饲粮组和氧化大豆油+葛根素（750 mg·kg^-1）饲粮组,每组6个重复,每个重复15羽。在28和56日龄时,每个重复随机选取1只鸡,取十二指肠、空肠、回肠检测小肠形态结构和测定小肠黏膜紧密连接蛋白基因表达及抗氧化指标。结果表明：1）饲喂氧化大豆油显著降低28日龄肉鸡十二指肠的绒毛高度和绒毛高度/隐窝深度（V/C）、回肠V/C和claudin-1 mRNA表达量以及56日龄肉鸡3个肠段的绒毛高度及V/C （P<0.05）,显著升高56日龄3个肠段的隐窝深度（P<0.05）。饲粮中添加葛根素显著提高28日龄肉鸡空肠绒毛高度和V/C、回肠闭合小环蛋白1（ZO-1） mRNA表达量和56日龄肉鸡十二指肠V/C、空肠和回肠的绒毛高度及V/C （P<0.05）,显著降低3个肠段的隐窝深度（P<0.05）。2）饲喂氧化大豆油显著升高28日龄十二指肠还原型谷胱甘肽（GSH）含量和空肠还原型谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性（P<0.05）,并显著降低28日龄回肠GSH含量、超氧化物歧化酶（SOD）活力和总抗氧化能力（T-AOC）（P<0.05）。饲粮中添加葛根素显著提高28日龄肉鸡十二指肠GSH-Px活性（P<0.05）。饲喂氧化大豆油显著降低56日龄回肠SOD活性和T-AOC （P<0.05）,饲粮中添加葛根素显著提高56日龄肉鸡十二指肠SOD和回肠SOD、GSH-Px活性（P<0.05）,显著降低56日龄肉鸡空肠GSH含量、SOD活性、T-AOC和回肠T-AOC （P<0.05）。综上所述,饲喂氧化大豆油破坏肠道黏膜形态结构、降低紧密连接蛋白基因的表达量和抗氧化能力,添加葛根素可提高肉鸡小肠黏膜紧密连接蛋白基因的表达量,改善氧化损伤条件下肠道黏膜形态结构,提高抗氧化酶的活性而提高其抗氧化能力。     

不同断奶日龄羔羊瘤胃组织显微及超微结构比较

试验通过比较不同断奶日龄的湖羊羔羊瘤胃组织结构的差异，特别是瘤胃乳头超微结构变化，旨在为羔羊适宜断奶日龄的确定提供瘤胃生长发育的依据。选择新生湖羊羔羊24只（初生重：2.80 kg±0.08 kg），随机分为3组，每组8只，分别为30日龄早期断奶组（EEW-30）、45日龄早期断奶组（EW-45）和60日龄常规断奶组（NW-60）。在各断奶日龄及75日龄时每组分别屠宰4只羔羊，测定体重及瘤胃空重，计算瘤胃相对重量；采集瘤胃组织进行显微及超微形态学测定。结果显示：①EEW-30组羔羊断奶体重极显著低于NW-60组（P<0.01），而EW-45组与NW-60组断奶体重无显著差异（P>0.05）；75日龄时3组羔羊的体重无显著差异（P>0.05）。各组羔羊瘤胃相对重量与其体重变化规律相同。②光镜下可见：断奶时，EEW-30组瘤胃壁厚度极显著低于NW-60组（P<0.01），EW-45组与NW-60组无显著差异（P>0.05）；75日龄时，EW-45组羔羊瘤胃壁厚度显著高于NW-60组（P<0.05）。断奶时EEW-30组瘤胃乳头较短小，极显著短于NW-60组（P<0.01），EW-45组也显著短于NW-60组（P<0.05）。断奶时瘤胃乳头宽度和面积在3组间差异均不显著，在75日龄时也无显著组间差异（P>0.05）。③扫描电镜观测结果显示：EEW-30组断奶时单位面积瘤胃微乳头（ruminal micro-papillae）数量极显著低于NW-60组（P<0.01），而EW-45与NW-60组间无显著差异（P>0.05）；75日龄时，3组羔羊单位面积瘤胃微乳头数量无显著差异（P>0.05）。上述试验结果显示，断奶时羔羊瘤胃形态结构在EEW-30与NW-60组间差异明显，而EW-45与NW-60组较为接近，瘤胃微乳头状结构也呈相同变化趋势。提示45日龄时断奶较为适宜。     

日粮添加不同水平芦丁对热应激小鼠睾丸组织的影响

本试验旨在探讨日粮添加不同水平芦丁对缓解热应激小鼠睾丸组织损伤的影响。将30只5周龄体重相近（20～22 g）的ICR系雄性小鼠随机分为5组,各组小鼠分别饲喂基础日粮添加0（CON组）、0（HS组）、250（HS+R250）、500（HS+R500）和1 000（HS+R1000） mg·kg^-1芦丁的日粮,饲养10 d后,除对照组（CON）外,所有小鼠在每天10：00至14：00之间置于42℃恒温箱中连续处理8 d后屠宰取样分析。结果显示：1）与CON组相比,HS组小鼠睾丸指数无显著变化（P>0.05）,而日粮添加250 mg·kg^-1芦丁显著提高热应激小鼠睾丸指数（P<0.05）;小鼠睾丸组织切片结果显示,与CON组相比,HS组小鼠生精小管直径和横截面积显著降低（P<0.05）,生精细胞脱落比率显著增加（P<0.05）;与HS组相比,HS+R250组小鼠生精小管横截面积显著增加（P<0.05）,生精细胞脱落比率显著降低（P<0.05）,HS+R500组生精细胞脱落比率也显著降低（P<0.05）,HS+R1000组小鼠生精小管直径显著增加（P<0.05）;小鼠睾丸指数、生精小管直径及生精小管脱落比率在芦丁处理组与CON组之间无显著差异（P>0.05）,但HS+R250组小鼠睾丸生精小管横截面积显著高于CON组（P<0.05）。2）与CON组相比,HS组小鼠睾丸组织丙二醛（MDA）含量显著升高（P<0.05）,总抗氧化能力（T-AOC）与还原型谷胱甘肽（GSH）含量以及血红素酶-1（HO-1） mRNA的表达量均显著降低（P<0.05）;日粮添加250 mg·kg^-1芦丁显著降低热应激小鼠睾丸组织中MDA含量（P<0.05）,提高T-AOC与GSH含量（P<0.05）,并增强核因子E2相关因子2（Nrf2）、HO-1和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px） mRNA的表达量（P<0.05）,而添加500和1 000 mg·kg^-1芦丁也显著提高了GSH含量（P<0.05）;与CON组相比,除HS+R250组Nrf2 mRNA表达量显著高于CON组（P<0.05）外,芦丁组热应激小鼠睾丸组织抗氧化相应基因与酶活指标均无显著性变化（P>0.05）。3）热应激小鼠睾丸中核因子-κB （NF-κB）、TOLL样受体4（TLR-4）和Bax的mRNA表达量显著增加（P<0.05）,而Bcl-2表达量显著降低（P<0.05）;日粮添加250 mg·kg^-1芦丁显著降低NF-κB、TLR-4、髓样分化因子88（MyD88）、白细胞介素-Iβ（IL-1β）和Bax mRNA表达量（P<0.05）,增强Bcl-2的表达水平（P<0.05）;添加500 mg·kg^-1芦丁显著降低NF-κB和TLR-4表达量（P<0.05）,而1 000 mg·kg^-1芦丁能够显著增加Bcl-2的表达（P<0.05）;小鼠睾丸组织中免疫和增值凋亡相关基因的表达量在添加芦丁组及CON组之间无显著性差异（P>0.05）。结果提示,日粮添加适宜剂量芦丁具有改善热应激小鼠睾丸组织形态及功能的效果,其机制可能与芦丁通过Nrf2信号通路缓解氧化应激,通过TLR-4/NF-κB信号通路抑制炎症反应及调控Bax/Bcl-2 mRNA的表达密切相关。本试验条件下日粮添加250 mg·kg^-1芦丁的效果较好。     

牛瘤胃上皮细胞中挥发性脂肪酸吸收相关蛋白在白细胞介素10诱导下的差异表达研究

本研究旨在探讨炎症因子（白细胞介素10, IL-10）对牛瘤胃上皮细胞中挥发性脂肪酸（VFA）吸收相关蛋白基因表达的影响。试验采用随机区组设计,在瘤胃上皮细胞体外培养条件下,研究50 ng·mL^-1浓度的IL-10对牛瘤胃上皮细胞中核因子（NF-κB）、假定阴离子转运蛋白1（PAT1）、阴离子交换蛋白2（AE2）、单羧酸转运蛋白1（MCT1）、单羧酸转运蛋白4（MCT4）、钠氢离子交换蛋白1（NHE1）基因表达的影响。结果表明,在中性条件下,IL-10添加显著下调了NF-κB、PAT1、MCT1、NHE1基因的表达（P<0.05）,AE2基因的表达显著性上调（P<0.05）,而对MCT4基因的表达没有显著影响。在酸性条件下,IL-10添加组的NF-κB基因表达被显著性抑制（P<0.05）,而PAT1、MCT1、MCT4基因表达显著上调（P<0.05）。pH5.5组与pH7.2组比较,pH5.5组NF-κB基因表达显著性上调（P<0.05）。结果提示,在炎症条件下,白细胞介素10作为一种抗炎因子,可以缓解瘤胃上皮细胞炎症反应从而促进VFA吸收相关蛋白基因的表达。     

秦川牛ACTC1基因的表达特性分析

试验旨在揭示ACTC1基因在秦川牛中的时空表达规律，为进一步研究ACTC1基因在肉牛肌肉发育和脂肪沉积等方面的功能奠定基础。利用实时荧光定量PCR技术检测了ACTC1基因在24月龄成年秦川牛13种组织和4日龄新生秦川牛12种组织中的表达规律，同时研究分析了该基因在秦川牛成肌细胞和前体脂肪细胞不同分化阶段（0、2、4、6、8 d）的表达特性。结果显示，ACTC1基因在秦川牛心脏中的表达量最高，骨骼肌中次之；除瘤胃和肾脏外，24月龄成年牛各组织中的表达量显著或极显著高于4日龄新生牛（P<0.05；P<0.01）；ACTC1基因在成肌细胞中的表达随着分化程度的增加呈现先升高后降低的趋势，在成肌细胞分化第2、4、6和8天ACTC1基因的表达量与第0天相比差异极显著（P<0.01），分别是第0天的2.6、4.7、5.6和4.2倍，这与成肌细胞的分化速率一致；在脂肪细胞中ACTC1基因的表达趋势为先降后升，第2、4天的表达量与第0天相比差异极显著（P<0.01），从分化第2天开始表达量随脂肪细胞分化程度增加而增加。ACTC1基因在不同年龄牛肌肉组织（心肌和骨骼肌）中的表达量最高，且其表达特性与肌细胞分化整体趋势一致；另外，ACTC1基因在脂肪细胞中的表达也有一定的规律。综上所述，推测ACTC1基因可能会影响牛肌肉组织的生长发育和脂肪沉积。     

甲酸处理对苜蓿青贮品质及瘤胃降解率的影响

为研究添加剂甲酸对紫花苜蓿(Medicago sativa L.)青贮品质、有氧暴露后微生物数量以及瘤胃降解特性的影响,分别在新鲜紫花苜蓿中添加0(CK),4(FA1),6(FA2),8 mL·kg^-1(FA3)甲酸后,室温青贮60 d。通过隶属函数法比较青贮品质,筛选出青贮效果最佳的处理,测定其有氧暴露后微生物数量及瘤胃降解率。结果表明：与CK组相比,添加不同水平甲酸均能显著提高紫花苜蓿干物质(Dry matter, DM)、粗蛋白(Crude protein, CP)、可溶性碳水化合物及乳酸含量(P<0.05),显著降低中性洗涤纤维(Neutral detergent fiber, NDF)及酸性洗涤纤维(Acid detergent fiber, ADF)、pH值、氨态氮比总氮(P<0.05)。通过隶属函数法筛选出FA2处理总隶属度最高。FA2组在有氧暴露后第0～6天的pH值、酵母菌和好氧菌计数显著低于CK组(P<0.05)。瘤胃降解特性中,FA2组DM,CP,NDF及ADF有效降解率较CK组显著提高(P<0.05)。综上,添加6 m...     

不同断奶模式对犊牦牛生长发育、血清生化指标及抗氧化能力的影响

【目的】 本研究通过比较不同断奶模式对犊牦牛生长发育、血清生化指标及抗氧化能力的影响,以期探索科学的犊牦牛早期培育模式。【方法】 选取体重相近、健康的新生犊牦牛24头,随机分为3个处理组,每组8头,公母各半。对照组（GF）犊牦牛出生后在天然牧场内随母放牧哺乳;早期断奶组（EW）犊牦牛随母放牧哺乳至15日龄时隔离母犊,逐渐过渡为饲喂代乳粉,提供开食料及天然牧草自由采食,至犊牦牛固体饲料采食量达到0.5 kg/d时停喂代乳粉,90日龄后停喂开食料转入天然牧场放牧饲养;早期断奶＋益生菌组（EWP）断奶过程同EW组,并在代乳粉、开食料中添加复合益生菌（乳酸杆菌、芽孢杆菌、酵母菌,≥9.98×10¹¹ CFU/g）。分别于犊牦牛30、60、90、150日龄时测定体重及体尺指标,于30、60、90日龄晨饲前采集犊牦牛颈静脉血,测定血清中生化指标、激素、免疫球蛋白水平及抗氧化能力指标。【结果】 30日龄时,EW、EWP组犊牦牛体重、体尺,血清葡萄糖（GLU）、甘油三酯（TG）、胆固醇（CHO）,生长激素（GH）、胰岛素样生长因子1（IGF-1）,以及免疫球蛋白A （IgA）、免疫球蛋白G （IgG）水平均显著低于GF组（P<0.05）,EW组皮质醇水平显著高于GF组（P<0.05）;60~150日龄各组犊牦牛体重、体尺均无显著差异（P>0.05）;60日龄时,EW、EWP组犊牦牛血清IGF-1以及谷胱甘肽过氧化物酶（GSH）含量均显著高于GF组（P<0.05）;90日龄时EW、EWP组犊牦牛血清GLU、尿素氮（BUN）、IGF-1、甲状腺素（T₄）及IgA水平均显著高于GF组（P<0.05）,且EWP组血清TG、GH含量及过氧化氢酶（CAT）活性均显著高于GF组（P<0.05）。【结论】 与随母放牧哺乳模式相比,两种早期断奶方式在断奶初期（30日龄）对犊牦牛均产生了一定负面影响,但在断奶后补饲代乳粉与开食料有利于改善犊牦牛后期的生长发育、营养代谢、机体免疫与抗氧化能力,且补充益生菌能够缓解犊牦牛的早期断奶应激,并对犊牦牛生长发育及抗氧化能力的提升有进一步促进作用。     

牦牛瘤胃微生物抗生素抗性基因对3种外源性刺激因子的响应

通过给牦牛投喂硫酸头孢喹肟(CEF)、盐酸二氟沙星(DIF)和黄曲霉毒素B1(AFB1),并进行瘤胃微生物宏基因组测序,旨在揭示这3种外源性刺激因子对抗生素抗性基因(ARGs)种类、抗性类型、抗性机制等的影响,对于深入研究微生物抗性组特征和抗性机制具有重要价值。选取15头牦牛,随机分5组。Cef组和Dif组分别根据说明书推荐剂量按体重计算、灌服CEF 1 mg·kg^-1和DIF 1 mL·kg^-1;E1组和E2组分别按采食量投喂AFB120、60μg·kg^-1;C组为对照组。处理7 d后,采集瘤胃液,提取DNA,Illumina HiSeq测序,对reads counts进行标准化得到TPM值,并进行方差分析。结果显示,对照组共获得132种ARGs,分属30种抗性类型,其中,四环素类tetQ和tetW基因丰度较高;Cef组tetW基因丰度增加(P<0.05),Dif组tetQ丰度增加(P<0.05);Cef组四环素类和头孢菌素类抗性基因丰度增加(P<0.05),Dif组四环素类和氨基香豆素类抗性基因丰度增加(P<0.05),E1组氨基香豆素和青霉烯类抗性基因丰度增加(P<0.05),E2组青霉烯类、头孢菌素类等9类抗性基因丰度均增多(P<0.05);Dif组Erm基因23S核糖体RNA甲基转移酶丰度增加(P<0.05),E2组中ATP结合盒超家族等3种抗性机制相关基因的丰度增加(P<0.05);3种因子均显著增加四环素类ARGs宿主的种类。结论:瘤胃是蕴含丰富ARGs的储藏库,其中,四环素类抗生素抗性基因tetQ和tetW是主要的ARGs。不仅CEF和DIF使部分ARGs的种类、抗性类型以及耐药机制相关酶等的丰度升高,增加瘤胃微生物的耐药性,而且AFB1也具有类似作用,且高剂量AFB1对抗性类型的影响范围较抗生素大。这3种因子还导致携带四环素类ARGs宿主微生物的种类数量增加,从而强化横向转移机制,加快ARGs传播,增强微生物对四环素类的耐药性。     

日粮能量水平对湖羊瘤胃发酵特性和微生物组成的影响

本试验旨在探究不同能量水平对湖羊瘤胃发酵特性和微生物组成的影响。选取湖羊公羊48只（体重为（17.77±1.15） kg）随机分为2组：1）对照组（C组）,代谢能ME=8.83 MJ·kg^-1;2）高能组（H组）,ME=10.84 MJ·kg^-1。每组6个重复,每个重复4只羊。试验期105 d,其中预试期15 d,正试期90 d。试验结束后,采集瘤胃液测定瘤胃发酵参数,同时对微生物细菌V3-V4区进行16S rRNA高通量测序以检测瘤胃微生物组成。结果显示：1） H组和C组在瘤胃pH、总挥发性脂肪酸、乙酸、丙酸、异丁酸、丁酸、异戊酸、戊酸及乙丙比、氨态氮和微生物菌体蛋白浓度差异均不显著（P>0.05）;2）物种多样性结果显示,H组的Chao 1、Observed species、PD whole tree和Shannon指数均显著低于C组（P<0.05）;3）物种注释发现,拟杆菌门（Bacteroidetes）和厚壁菌门（Firmicutes）占比最高,但两者的相对丰度在H组和C组间差异均不显著（P>0.05）,H组的瘤胃球菌属（Ruminococcus）和厌氧弧菌属（Anaerovibrio）相对丰度均显著高于C组（P<0.05）。在本试验条件下,提高日粮能量水平对瘤胃发酵特性影响不显著,但是会降低瘤胃微生物的丰富度和均匀度,并改变部分菌属的相对丰度。     

基于同质园实验的两种典型荒漠植物叶片功能性状变异研究

植物叶功能性状的变异及影响因素对了解植物利用资源和适应环境具有重要意义。本研究以同质园中不同地理种源白刺(Nitraria tangutorum)和红砂(Reaumuria soongorica)为研究对象，测定叶片形态性状和化学计量指标，并对其进行单因素方差分析、相关性分析和冗余分析。结果表明：同质园中各地理种源白刺叶片肉质化程度、含水量、组织密度、氮含量、氮磷比有显著差异(P<0.05)，表明白刺叶功能性状表现出的种间差异可能与遗传分化有关；白刺和红砂的比叶面积和组织密度呈极显著负相关关系(P<0.01)，氮含量与氮磷比呈显著正相关关系(P<0.05)，而红砂叶片碳氮比与碳磷比呈极显著正相关关系(P<0.01)，表明两种植物对环境的适应策略有所差别，红砂叶片具有较高的碳同化能力；白刺叶片肉质化程度、含水量、组织密度和红砂叶片比叶面积和磷含量受海拔显著影响(P<0.05)，表明海拔是影响两种植物生长的主导环境因子。     

Performance,rumen fermentation and blood metabolites of dairy calves fed starter mixtures supplemented with herbal plants,essential oils or monensin

This study evaluated the supplementation effects of three herbal plants (thyme [THY], eucalyptus [EUC] and celery [CEL]), a commercial phytogenic additive ?containing essential oils (PFA‐EO, Digestarom^® P.E.P.) and monensin (MON) in calf starter on performance, rumen fermentation and blood metabolites during pre‐ (days 3–55) and post‐weaning (days 56–70). Sixty‐six Holstein dairy calves (3 days of age, 41.2 ± 3 kg of BW) were allocated to one of six starters supplemented with: (i) no additives (CON), (ii) MON (30 mg/kg), (iii) THY (23 g/kg), (iv) CEL (23 g/kg), (v) EUC (23 g/kg) and (vi) PFA‐EO (3 g/kg). All the calves were offered starters ad libitum plus 6 L of whole milk daily. Starter intake tended to be the highest in calves fed PFA‐EO and THY; intermediate in calves fed CON, MON and EUC; and the lowest in those fed CEL. Average daily gain (ADG) and feed efficiency (FE) remained unaffected by dietary treatments during the pre‐weaning. During the post‐weaning period, ADG and FE ?were greatest in calves fed EUC followed by those fed CON, MON, PFA‐EO and THY, and then in those fed CEL. No differences were observed among the treatments in skeletal growth, faecal score, rumen pH or ammonia‐N concentration. Compared to calves fed CON and MON, those fed the herbal plants or PFA‐EO tended to recorded higher molar proportions of acetate and butyrate, and the acetate: propionate ratio. Blood malondialdehyde level did not differ among treatments, but calves on CON had the highest glucose concentration, and those fed PFA‐EO recorded the highest value for β‐hydroxyl butyrate on day 70. In conclusion, the results indicate that the three herbs and PFA‐EO are capable of modulating some of the rumen fermentation parameters and blood metabolites as well as eucalyptus could potentially be a better alternative to monensin for improving post‐weaning performance.     

腹泻犊牛与健康犊牛粪便菌群结构组成与功能研究

本研究旨在探究腹泻与健康犊牛粪便微生物的结构组成与分布特征,筛选出一些可作为评价犊牛腹泻参考指标的特异性菌群。试验采集10份腹泻和10份健康夏南牛犊牛的粪便样本并提取粪便总DNA,运用16S rRNA高通量测序技术,比较腹泻组和健康组在微生物多样性方面（组成及结构）存在的差异,获得两组间具有统计学差异的Biomarker,并对差异功能基因进行注释。结果表明,腹泻犊牛粪便微生物的多样性小于健康犊牛;在门水平上,与健康组相比,腹泻组犊牛粪便中微生物相对丰度显著升高的是变形菌门和梭杆菌门,螺旋菌门显著降低（P<0.05）;在属水平上,与健康组相比,腹泻组犊牛粪便微生物中埃希氏-志贺菌属、梭杆菌属、乳杆菌属和梭状芽孢杆菌属相对丰度明显升高,不可培养拟杆菌目S24-7群、拟普雷沃菌属和普雷沃氏菌科的菌属显著降低（P<0.05）。通过对COG功能预测分析,腹泻组在翻译、核糖体结构和起源类群明显降低。通过KEGG代谢途径分析,腹泻组粪便中显著升高的代谢通路是碳水化合物代谢和外源性物质降解和代谢,显著降低的代谢通路分别是细胞增殖和死亡、复制和修复、翻译和转录（P<0.05）。本研究分析了腹泻组和健康组之间的优势菌群,筛选出可以作为犊牛腹泻参考指标的10个Biomarker,并对功能差异基因进行注释,为进一步研究犊牛腹泻的治疗及预防奠定了基础。