利用全消化道灌注营养技术研究蛋氨酸水平与生长绵羊血浆总蛋白之间的关系

选用4只3~4月龄夏洛莱×无角陶赛特生长期公羊,分别安装瘤胃瘘管和真胃瘘管,利用全消化道灌注营养技术研究蛋氨酸(Met)水平对血浆总蛋白(TP)的影响。试验采用4×3不完全拉丁方设计,4个蛋氨酸水平0.00、1.76、3.52 g/16g N和7.04 g/16g N分别作为试验处理II、II、II和IV。试验进行3期,每期10 d。最后1 d采集血液样品。结果表明:不同处理间上午灌注前的血浆总蛋白没有显著差异(P>0.05)。而下午灌注过程中处理IV的血浆总蛋白显著高于处理I(P<0.05),处理II和处理III的血浆总蛋白与处理I相比有升高的趋势,但差异没有达到显著水平(P>0.05)。蛋氨酸水平(g/16gN)与灌注期间的血浆总蛋白(g/L)之间存在二次曲线关系(P=0.019)。由此得出,蛋氨酸供应水平对生长绵羊的血浆蛋白有重要影响。     

牛奶尿素氮含量不同测定方法比较研究

本研究的目的是比较不同测定方法对牛奶尿素氮含量的影响。分别采用红外法(Foss 4000)、二乙酰-肟法及不同去蛋白处理的尿素氮试剂盒法测定奶样中尿素氮含量(n=50)。结果表明,红外法、二乙酰-肟法、尿素氮试剂盒水溶法的测定结果之间差异不显著(P0.05)。试剂盒法中,三氯乙酸水溶液测定的牛奶尿素氮值显著高于乙醚溶解法的测定结果值(P0.01)。因此,实验室中可以采用二乙酰-肟法和尿素氮试剂盒水溶法测定牛奶尿素氮含量。     

抗犊牛肺炎支原体免疫初乳乳清的制备

为探讨抗犊牛肺炎支原体免疫初乳乳清的制备方法,本试验采用牛支原体灭活佐剂疫苗于经产前2～4周给怀孕母牛免疫接种2次,制备高免初乳,收集产后12 h之内的初乳,分别采用离心沉淀与过滤法制备脱脂初乳,采用不同的酸化法、酶化法、酸和酶结合法制备乳清,通过紫外分光光度计及ELISA方法检测乳清中的总蛋白含量及抗牛支原体抗体滴度。结果显示,4 ℃、3500 r/min离心30 min对初乳的脱脂效果最好,初乳总蛋白含量及抗牛支原体抗体滴度损失最少;酶和酸结合法的乳清析出率最高,维生素C（0.2 g/mL）处理法对脱脂初乳中蛋白损失最小,盐酸处理法对脱脂初乳中抗牛支原体抗体滴度损失最小。结果表明用0.6 mol/L盐酸调pH至4.6,室温下放置30 min,10000 r/min离心20 min是高免初乳乳清制备的适宜方法。     

饲喂燕麦-箭筈豌豆捆裹青贮对绵羊瘤胃pH与氮代谢参数的影响

选用6只装有永久瘤胃瘘管的羯羊作为试验动物,采用3×3拉丁方设计,研究了A(100%燕麦—箭筈豌豆捆裹青贮料,简称青贮料),B(80%青贮料+20%玉米)和C(63%青贮料+37%玉米)3种饲粮处理对绵羊瘤胃内环境的影响。结果表明,瘤胃液pH值为A>B>C,但A的瘤胃液总氮含量平均值显著低于处理C(P<0.05);除食前1 h处理间NH3-N浓度差异接近显著(P=0.085)外,其他时段A,B和C差异显著或不显著(P<0.05或P>0.05);瘤胃液中尿素氮仅B和C食后8 h的测值和平均值显著(P<0.01或P<0.05)高于A;C的瘤胃液蛋白氮含量平均值显著高于A(P<0.05),但3种处理差异不显著。因此,3种饲粮试羊的瘤胃液pH值和微生物蛋白合成状况间没有显著差异。     

环境温度对肉用鸡血液生化指标影响的研究

利用72只32日龄京白904肉仔鸡(公母各半)研究环境温度(简称温度)对血液生化指标的影响。试验采用3×2析因设计。试验鸡在8℃、24℃、30～32℃下处理14d,测定肉用公母鸡在3种温度处理后的第0天、第3天和第14天时的血液生化指标。试验结果表明,温度和性别对血清葡萄糖、尿酸影响不显著(P>0.05)。温度对血清尿素氮影响极显著(P<0.01)。低温组血清尿素氮极显著高于常温组(P<0.01),而常温组及低温组与高温组间差异均不显著(P>0.05)。性别间血清尿素氮差异不显著(P>0.05)。     

不同浓度肽对瘤胃发酵及微生物蛋白产量的影响

利用短期人工瘤胃发酵法研究奶牛瘤胃中肽浓度的变化对瘤胃发酵的影响,并探讨瘤胃适宜肽浓度值。试验按0、10、15、16g/L和20g/L氨基氮的肽浓度分为5个处理,每个处理3个重复,测定pH值、氨态氮值及微生物蛋白产量。结果表明:在各个时间点各组之间的pH均无显著差异(P>0.05)。发酵8h后,15、16g/L和20g/L3组的NH3-N值与对照组相比差异显著(P<0.05)。对于瘤胃微生物蛋白产量(MCP),在第4h和24h时,15g/L和16g/L组与0g/L和10g/L组分别相比,差异显著(P<0.05);在2h时,16g/L组与其他各组相比较,差异均不显著(P>0.05)。本试验条件下,人工瘤胃内适宜的肽浓度为16g/L。     

γ-氨基丁酸对夏季生长肥育猪血清生化指标的影响

将48头体重43kg左右的"杜×长×大"三元杂交猪随机分成两组,饲喂在基础日粮中添加0、10mg/kgGABA的日粮。结果表明:添加GABA使血清中钙、磷、钾、氯4种无机离子浓度提高,差异不显著(P>0.05);总蛋白、白蛋白、尿素氮水平有提高趋势,差异不显著(P>0.05),葡萄糖水平提高13.29%,差异显著(P<0.05);丙氨酸转氨酶、天门冬氨酸转氨酶活性上升,差异不显著(P>0.05),乳酸脱氢酶、肌酸磷酸激酶活性分别下降16.93%(P<0.05)、38.22%(P<0.01);谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)活性均有上升,其中GSH-Px差异极显著(P<0.01),丙二醛含量下降(P>0.05)。     

日粮氨基酸浓度对鲁农2号配套系断奶仔猪氮平衡和血液指标的影响

试验旨在研究日粮氨基酸浓度对鲁农2号配套系断奶仔猪氮平衡和血液指标的影响。试验选择体重(17.35±0.73)kg的健康鲁农2号配套系阉公猪6头。保持可消化赖氨酸/可消化苏氨酸比一致(100:59),设1.10%Dig-Lys+0.65%Dig-Thr,1.00%Dig-Lys+0.59%Dig-Thr,0.90%Dig-Lys+0.53%Dig-Thr3个水平处理组,3×3拉丁方设计进行消化试验。试验采取全收粪法收集粪样、尿样,并测定含氮量;前腔静脉采血测定血清尿素氮和血浆总蛋白含量。结果显示3种水平日粮的氮存留率之间结果差异不显著(P>0.05)。     

鲫鱼肠道对四种蛋白质饲料的体外消化与其酶解液中氨基酸吸收效率的研究

采用离体消化方法测定了鲫鱼肠道对鱼粉、花生粕、菜粕、棉籽粕的体外消化率和氨基酸的生成效率。同时采用同位素示踪法和肠道离体灌流模型分别测定了鲫鱼离体肠道对4种蛋白质饲料体外酶解液中氨基酸的吸收速度。结果表明:鲫鱼肠道对鱼粉、花生粕、菜粕、棉籽粕的体外消化率分别为48.51%、85.52%、60.64%、67.22%,其中以花生粕最高,鱼粉最低,消化率彼此之间的差异均显著(P<0.05)。在酶解过程中氨基酸的生成量逐渐增加,以生成的氨基酸量占饲料量的百分比表示氨基酸的生成效率,在酶解7h时以鱼粉最高为12.23%,其次是花生粕为12.14%、棉籽粕为11.23%、菜粕为6.78%。鲫鱼肠道(每克)对4种蛋白质饲料酶解液中氨基酸的吸收转运速度,以鱼粉最高,在灌流40min时,速度为1.058mg/min,其次为花生粕0.782mg/min、棉籽粕0.679mg/min、最低为菜粕0.451mg/min,差异显著(P<0.05)。如果以单位时间内肠道对氨基酸的吸收转运量占流过肠道的氨基酸总量的比例表示肠道对氨基酸的吸收效率,结果为鲫鱼肠道对4种蛋白质饲料酶解液氨基酸的吸收转运效率间无显著性差异(P>0.05),所以肠道对氨基酸的吸收效率可能并不受饲料种类的影响。量。采用凯氏定氮法对烘干的饲料样品和消化滤渣进行粗蛋白质含量测定,按照公式计算饲料样品的离体消化率:蛋白质离体消化率(%)=(消化前饲料重量×饲料粗蛋白质含量-消化后滤渣质量×滤渣粗蛋白质含量)/(消化前饲料质量×饲料粗蛋白质含量)。1.3酶解液氨基酸总量测定及计算方法按照1.2.2的方法分别对饲料样品进行酶解,于0、1、3、5、7h分别取酶解液0.2ml(同时补充等体积的磷酸缓冲液),加入10%的三氯醋酸0.2ml,待蛋白质沉淀后以6000r/min离心20min后,取上清液0.1ml采用茚三酮法测定OD570值,用亮氨酸作标准曲线计算酶溶液氨基酸的总量,再按照酶解的氨基酸总量(扣除饲料酶解前的游离氨基酸含量)占饲料量的百分比计算氨基酸的消化生成效率。1.4用于肠道灌注的酶解液制备方法按照1.2.2的方法对鱼粉、花生粕、菜粕、棉籽粕进行酶解7h后,取酶解液以10000r/min离心25min,收集上清液为酶解液,于冰箱冷冻保存备用。定量取此酶解液0.2ml加入10%三氯醋酸0.2ml,待蛋白质沉淀后以6000r/min离心20min,采用茚三酮定量测定酶解液氨基酸浓度。1.5灌注试验方法采用叶元土等利用的肠道灌注系统进行蛋白质饲料酶解液的灌注试验。整个灌注系统置于生化培养箱中,控制环境温度在28℃,恒流泵控制灌注液的流量在2.00ml/min,由氧气瓶从灌流开始前5min就向培养液中充入医用氧气以保持肠道组织活性。1.6离体肠道的制备将鲫鱼捣毁脊髓处死,立即解剖取出肠道,在生理盐溶液浸渍下剔除肠道外壁上的脂肪、血污等,在灌流系统中用生理盐溶液冲洗干净肠道内容物,置于生理盐溶液中待用。每次灌注试验用一尾鲫鱼的肠道,每次试验至少重复3遍。用于解剖获取肠道的鲫鱼平均体重为126g,试验前养殖于室内循环养殖系统中,养殖环境温度为25℃左右,投喂粗蛋白质为30%的颗粒配合饲料2周以上。1.7肠道对氨基酸平均转运速度计算方法在灌注液中加入放射性酪氨酸(L-[4,5-3H]-tyr,放射性浓度为0.5毫居里/毫升),从灌注开始(0min)每10min取肠道外培养液0.1ml,持续40min,并取开始时肠道外培养液样品。每次取样品液100μl,取3个平行样品,并补充同样体积的生理盐溶液以保持肠道外培养液总体积恒定。取肠道内灌流液100μl于闪烁瓶内,设3个平行样品,样品液均置于闪烁瓶内,加入闪烁液5ml放置半小时后,在SN-6930液体闪烁计数器中计数(cpm值)。因灌流液的氨基酸浓度是已测知的,所以根据灌流液cpm值和肠道外培养液cpm值,就可计算出肠道外培养液的氨基酸浓度,再根据培养液体积(40ml)计算经过肠道转运到培养液中的氨基酸总量,最后根据吸收转运的时间计算单位质量肠道对氨基酸的平均转运速度。1.8数据的表示与处理由于鱼体大小差异使肠道长度和质量有一定的差异,为减小试验误差,统一比较标准,我们把鲫鱼肠道对试验氨基酸的跨壁运输量表示为单位肠道组织重量(g)对试验氨基酸的跨壁运输量,并以此为基础计算氨基酸吸收转运速度,计算公式如下:转运到肠道外培养液中氨基酸的浓度=灌流液氨基酸浓度×(肠道外培养液cpm值-空白培养液cpm值)/灌流液cpm值;跨壁运输量=(培养液cpm值-空白培养液cpm值)×灌流试验氨基酸浓度×培养液体积/(灌流液cpm值×肠道质量);氨基酸平均转运速度=(培养液cpm值-前10min时培养液cpm值)×灌流试验氨基酸浓度×培养液体积/(灌流液cpm值×肠道质量×10)。在肠道灌注系统中用恒流泵控制肠道酶解液的流过速度为2.00ml/min,通过酶解液中氨基酸的浓度计算单位时间(min)流过肠道的氨基酸量。肠道对氨基酸的吸收转运效率(%)=每分钟氨基酸的平均吸收转运量/每分钟流过肠道内的氨基酸量。数据采用Microsoft-Excel2003作统计处理,采用多重比较的最小显著极差法(LSR法)进行差异显著性分析。2试验结果2.1离体消化率鱼粉、花生粕、菜粕、棉籽粕4种蛋白质饲料在消化前的粗蛋白质含量分别为69.13%、55.06%、44.25%、50.58%。在离体条件下,通过肠道消化酶水解7h,得到鲫鱼对鱼粉、花生粕、菜粕、棉籽粕蛋白质的离体消化率分别为48.51%、85.52%、60.64%、67.22%,花生粕消化率最高,鱼粉最低,消化率彼此之间的差异均显著(P<0.05)。2.2酶解蛋白质饲料氨基酸生成效率     

饲料肽对断奶仔猪生长及血液生化指标的影响

将(21±1)d断奶的皮×杜×长×大仔猪144头随机分为3个处理组,每个处理6个重复。3个处理分别为:添加2%喷雾干燥血浆蛋白粉的对照组和分别添加1%、2%饲料肽等蛋白取代血浆蛋白粉的试验组,试验期21d。结果表明:添加饲料肽的试验组平均日增重、平均日采食量、饲料增重比和腹泻率均和血浆蛋白粉组差异不显著(P>0.05),各处理组的血液生化指标也没有显著差异(P>0.05)。日粮中添加1%～2%饲料肽可以等蛋白取代血浆蛋白粉,对断奶仔猪的生长没有显著影响。     

Predicting urinary nitrogen excretion by milk urea nitrogen in lactating Chinese Holstein cows

The objective of this study was to assess the relationship between milk urea nitrogen (MUN, mg/dL) and urinary nitrogen (UN) excretion (UN, g/day) in lactating Chinese Holstein cows. Twelve mature lactating cows were divided into four groups by their days in milk and milk yield and fed four different crude protein levels diets (13.2, 14.1, 15.0 and 16.2%, dry matter (DM) basis) with a similar net energy content. The experiment was conducted according to a multiple 4 × 4 Latin square design. The entire length of the experimental periods was 56 days, each period consisting of 14 days with days 1–9 for adjustment and days 10–14 for the collection of urine and data. The crude protein content had significant effects on the MUN content and UN excretion (P < 0.01), but little effect on milk yield and composition (P > 0.05). There was a close relationship between MUN and UN excretion (P < 0.001). The following equations were established to predict UN (g/day) excretion based on MUN (mg/dL) in the lactating Chinese Holstein cows: UN = 10.07 × MUN + 47.29. The results obtained in this study suggested that MUN could be used as a parameter to estimate UN excretion, while the equations to predict UN based on MUN might be somewhat different due to the differences in breeds of cow.     

The antinociceptive activity and respiratory effects of fentanyl in sheep

The analgesic activity of fentanyl was measured in sheep using both thermal and mechanical test systems. Fentanyl at a dose rate of 5 μg/kg given intravenously (iv) produced significant analgesia to thermal pain for some 30 mins but no detectable mechanical antinociceptive activity. However, at a dose rate of 10 μg/kg the drug produced both thermal (for 60 mins) and mechanical (40 mins) antinociceptive effects. In one sheep a dose of 20 μg/kg produced thermal analgesia for 110 mins and mechanical antinociception for 60 mins. Following iv injection at 10 μg/kg in five of the sheep, there was a brief period of respiratory depression evidenced by a significant fall in PaCO₂ of the order of 25 per cent and an increase in PCO₂ levels, but these changes were short lived and levels were back to normal at 15 mins after injection.     

Relation between milk urea content and nitrogen excretion from lactating cows

Abstract

Thirty-two Chinese Holstein lactating cows were used to investigate the relationship of milk urea nitrogen (MUN) and nitrogen excretion loading to the environment. Cows were fed a similar amount of forage, and concentrates according to milk production. Total collection of urine and faeces were conducted continuously for three days. The milk urea nitrogen was significantly correlated to total nitrogen excretion (R ²=0.70), urinary nitrogen excretion (R ²=0.85), and nitrogen excretion from faeces (R ²=0.22). The following equation was proposed to predict total nitrogen excretion (TNE) (g/d) based on milk urea nitrogen (MUN) (mg/dl): TNE?=?15.46(±1.83)×MUN?+?193.40(±28.79). The results obtained in this study suggested that MUN might be used to predict TNE from lactating cows.     

泌乳早期乳中尿素氮含量对奶牛繁殖性能的影响

为探索奶牛泌乳早期乳中尿素氮含量对产后繁殖性能的影响,本研究选取海丰奶牛场的头胎荷斯坦牛1932头,于产犊后30d内采集乳样,测定乳中尿素氮含量,并收集试验牛只产后繁殖资料,用多因素方差分析法分析乳中尿素氮对产后繁殖性能的影响。结果表明,试验牛只产犊后1个月内乳中尿素氮含量为9．22±2．78mg／dL;乳中尿素氮含量对个体情期受胎率有显著影响（P〈0．05）,而对产后首次配种天数有极显著影响（P〈0．01）,乳中尿素氮含量大于15mg／dL的奶牛产后第一次配种天数显著高于低于此数值的奶牛,且个体情期受胎率显著低于此数值低的奶牛。同时乳中尿素氮含量与个体情期受胎率呈极显著负相关（P〈0．01）。据此认为,作为反映能氮平衡的关键指标,泌乳早期乳中尿素氮含量可作为预测奶牛产后繁殖性能的指标加以利用。     

复合植物提取物对奶牛产奶量、乳成分和血液指标的影响

本试验旨在研究日粮中添加复合植物提取物对奶牛产奶量、乳成分和血液生理生化指标的影响。选择25～27月龄、1胎、泌乳天数(67±1) d、产奶量(32±5) kg/d且健康的泌乳高峰期荷斯坦奶牛40头,随机分为对照组和试验组,每组20个重复,每个重复1头牛。对照组饲喂基础日粮,试验组饲喂基础日粮+1g/(d·头)复合植物提取物(每克含辣椒油树脂3.5%、肉桂醛5.5%、丁香酚9.5%)。试验预试期3d,正试期60 d。结果表明:与对照组相比,试验组奶牛产奶量提高2.37%(P>0.05);日粮添加复合植物提取物有降低牛奶体细胞数、尿素氮含量的趋势(P>0.05);与对照组相比,试验组奶牛血常规指标、血清生理生化指标差异均不显著(P>0.05)。在本试验条件下,日粮添加1 g/(d·头)复合植物提取物能够在一定程度上提高奶牛产奶量、降低牛奶体细胞数和尿素氮含量,但不影响血液生理状态。     

发酵鸡粪中病原微生物检测方法的探讨

鸡粪发酵后作为再生饲料或有机肥已广泛使用,其中病原微生物检测尤显重要,为此本研究对发酵前后的鸡粪样品中主要病原菌大肠杆菌和沙门氏菌检测方法进行了探讨。结果表明,鸡粪样品中大肠杆菌CFU(菌落形成单位)由发酵前3.67×107个/g减少至6.33×105个/g,经发酵处理的鸡粪样品均未检出沙门氏菌,两者与发酵前样品均存在极显著差异(P0.01),说明所建立的方法可行。     

一株饲用枯草芽孢杆菌CCAM080032固态发酵工艺的研究

为了提高一株饲用枯草芽孢杆菌CCAM 080032的芽孢产量,研究通过单因素试验及正交试验方法,确定了该枯草芽孢杆菌的最优培养基为:稻草粉:麸皮2:8、葡萄糖50 g、胰蛋白胨20 g、NH4NO3 15 g、KH2PO4 10 g、H2O 1 500 g,37℃培养48 h,芽孢产量达到7.90×1010 CFU/g。     

Evaluation of Difloxacin for Shrimp Aquaculture: In Vitro Minimum Inhibitory Concentrations,Medicated Feed Palatability,and Toxicity to the Shrimp Penaeus vannamei

Abstract

Standard in vitro minimum inhibitory concentrations (MICs) were determined for difloxacin and compared with the MICs of several other antimicrobials, against a standardized battery of 13 gram-negative bacterial isolates associated with shrimp disease. The palatability and safety (toxicity) of difloxacin to the shrimp Penaeus vannamei were also evaluated during 15 d of medicated feeding at 1× (100 mg/kg of feed), 2×, and 4× treatment levels to give doses of approximately 5, 10, and 20 mg difloxacin/kg body weight. A significant reduction (P ≤ 0.05) in difloxacin-medicated feed palatability was noted in the 2× and 4× trials. However, differences were still acceptable, because more than 80% of the feeds were consumed in both treatments relative to the control diet. Shrimp mortality rates increased with difloxacin level from 7% for the control treatment to 20% for the 4× treatment. Differences in percent survival were not significant (P > 0.05) by the Williams test; however, analysis of mean survival time indicated that difloxacin significantly (P ≤ 0.05) reduced survival time at the highest dose. Signs of animal stress, characterized by extreme lethargy, were noted in the 4× treatment. An actual therapeutic dose for difloxacin in penaeid shrimp is unknown; however, the 1× treatment (100-mg/kg) was acceptable with respect to both palatability and toxicity, whereas 400 mg/kg of feed or more may be unpalatable and toxic to shrimp.     

乳尿素氮估测奶牛尿氮排泄量的两个模型比较研究

比较了乳尿素氮估测奶牛尿氮排泄量的两个模型(模型1,UN=17.64×MUN;模型2,UN=10.068×MUN+47.29)的差异显著性,并利用24篇有关文献中泌乳奶牛乳尿素氮含量和尿氮排泄量的数据进行了残差图分析,评价了上述两个模型的准确性情况。结果表明,两个模型存在极显著差异(P0.01),且均不能准确估计奶牛的尿氮排泄量。