桑叶中黄酮化合物的提取工艺及不同品种不同时期的含量变化

探讨了不同单因子对桑叶中黄酮成分浸提效果的影响。用80%乙醇作溶剂,原料质量浓度50.00 g/L,于70℃、pH 8的条件下浸提3 h并抽提2次的提取效果较好。以毛细管电泳仪测定、分析了不同品种、不同时期桑叶中的芦丁、槲皮素等成分,湖桑9001叶片中的芦丁含量高,湖桑32号的槲皮素含量高,10月份采摘桑叶中的芦丁和槲皮素的含量最高。芦丁、槲皮素等成分在桑叶中的动态变化:以10 mmol/L磷酸二氢钠-20 mmol/L的硼砂溶液(pH 8.62)作缓冲液,在25℃,20 kV的压力下电泳,245 nm波长处检测,线性关系良好,在8 m in内完全分离。     

高效毛细管电泳同时测定4种氟喹诺酮类抗菌药

建立同时测定4种氟喹诺酮类抗菌物(左氧氟沙星、培氟沙星、沙拉沙星和洛美沙星)的高效毛细管电泳(HPCE)法。考察了缓冲液离子浓度和pH、分离电压、运行温度等电泳参数,确立了最佳的电泳条件:缓冲液为10 mmol/L磷酸二氢钾-20 mmol/L硼砂(pH9.0,内含35mmol/L SDS),紫外检测波长278 nm,分离电压28 kV,运行温度25℃。结果表明,4种药物在8min内得到完全分离,分离度R为1.2以上。方法精密度(RSD)为0.22%~0.26%(迁移时间)和1.36%~2.39%(峰面积),回收率99.60%以上。该法快速、简便、准确。     

饲料中3种四环素类药物的高效毛细管电泳检测方法

作者建立了鸡饲料中四环素、土霉素和多西环素的高效毛细管电泳检测方法。3种药物在40 mmol/L磷酸氢二钠—20 mmol/L柠檬酸(pH 2.6)的电泳缓冲液、30 kV的分离电压、长度64.5 cm、内径75 μm的毛细管内得到完全分离。在1～80 mg/kg范围内3种药物线性良好,R2>0.994;配合饲料和预混料中3种药物的定量限分别为2和4 mg/kg;添加回收试验回收率>80%,方法的日内变异系数和日间变异系数均<10%。     

高效毛细管电泳检测牛奶中氨苄青霉素和阿莫西林残留方法的建立

建立了高效毛细管电泳同时检测牛奶中残留氨苄青霉素和阿莫西林的方法。牛奶样品采用三氯乙酸溶液沉淀蛋白,在30 mmol/L硼砂缓冲液,pH 7.8,检测波长198 nm,运行电压18 kV,温度25℃的电泳条件下,两种药物完全分离。氨苄青霉素在10μg/mL~100μg/mL的浓度范围内线性良好相关系数为0.998 9,阿莫西林在5μg/mL~100μg/mL的浓度范围内线性良好相关系数为0.999 8。两种药物的平均加标回收率范围为80%~92%,变异系数(CV)范围为3.02%~10.11%。该方法检测牛奶中残留的氨苄青霉素和阿莫西林较为快速、简便。     

高效毛细管电泳法测定兽用注射用青霉素钾的含量

研究测定兽用注射用青霉素钾含量的高效毛细管电泳方法,优化了高效毛细管电泳法检测青霉素的电泳条件,缓冲液为pH7.8（6mol/LHCL调节）的30mmol/L硼砂溶液,在分离电压为18kV、温度为25℃条件下青霉素峰形尖锐,浓度与峰面积在40-200μg/mL范围内线性良好,相关系数为0.9971,回收率范围为99.3%-101.5%,日内及日间变异系数均小于4%。     

高效毛细管电泳法同时分离氟喹诺酮类和磺胺类药物的研究

采用高效毛细管电泳建立3种氟喹诺酮类与5种磺胺类药物同时分离的方法,研究了缓冲液离子浓度、pH、有机添加剂以及分离电压、温度等电泳参数,最终通过正交实验得到了最佳分离条件:紫外检测波长262 nm,缓冲液为40 mmol/L磷酸氢二钠-20 mmol/L柠檬酸,pH 8.47,电压为22 kv.结果表明,8种药物在9 min内完全分离,且各组分浓度与峰面积呈良好的线性关系,r为0.999～0.9995.RSD为0.44%～1.15%(迁移时间)和1.12%～2.32%(峰面积).该法快速、简便、准确.     

食用桑叶粗蛋白粉的制备及蛋白质营养与加工特性评价

为了开拓桑叶粗蛋白的食用性,筛选桑叶粗蛋白含量较高、加工性能较好的桑品种,以来自不同原产地的4个代表性桑品种的桑叶为材料,对桑叶干燥方法、粗蛋白浸提剂、粗蛋白沉淀干燥方法等制备工艺的重要参数进行优化。桑叶粗蛋白较优制备工艺是:桑叶自然晾干粉碎,按照料液质量浓度为40 g/L,用5 g/LNaOH溶液并在超声波功率40 Hz条件下常温浸提20 min,然后40℃水浴1 h,收集上清,以1 mol/L HCl在等电点(p H 3)条件下沉淀分离蛋白质。来自4个桑品种的烘干桑叶粗蛋白粉的蛋白粉得率、粗蛋白含量、总氮含量检测结果表明,桑品种大10的桑叶粗蛋白粉品质较佳,其粗蛋白粉得率为15.30%,粗蛋白和总氮的质量分数分别为54.07%、8.65%。相较于烘干桑叶粗蛋白粉,冻干桑叶粗蛋白粉显现出更好的风味特性。对4个桑品种的冻干桑叶粗蛋白粉的加工特性进行比较,挑选出加工特性较好的大10冻干桑叶粗蛋白粉,其溶解指数、持水率、持油率、起泡率、泡沫稳定率、乳化活力指数及乳化稳定率分别为78.7%、64.0%、4.9 m L/g、72.0%、62.3%、4.0 m2/g、43.6%,重金属Pb、Cd含量也低于国家食品卫生标准。研究结果表明,用桑品种大10的桑叶可制备食用级优质植物蛋白粉。     

桑树叶蛋白提取及蛋白粉制备工艺

桑叶蛋白质的氨基酸种类齐全,是营养均衡的优质蛋白质资源。以桑叶粉为原料提取蛋白质并制备蛋白粉,选择桑叶干燥方法、桑叶蛋白浸提剂种类、桑叶蛋白提取液中的蛋白质沉淀分离方法等工艺条件进行单因素试验。结果表明,将桑叶自然晾干粉碎,以5 g/L Na OH溶液作为浸提剂,设定料液质量浓度为40 g/L,经超声波处理20 min后在40℃下浸提1 h获得桑叶蛋白提取液,再以1 mol/L HCl沉淀分离蛋白质,可使桑叶蛋白质的提取率达到14.42%,其中粗蛋白的质量分数可达49.58%,冷冻干燥获得的桑叶蛋白粉中总黄酮与多糖的质量比分别达到60.97 mg/g和12.32 mg/g。采用上述优化的工艺技术条件,可以提高桑叶蛋白质的提取率和制备出品质较优的桑叶蛋白粉。     

饲料中阿散酸的高效液相色谱检测技术的研究

建立了饲料中阿散酸的高效液相色谱-离子交换分离-紫外检测的定量分析方法。用25mmol/L的氢氧化钠溶液作为提取剂,在50℃水浴中提取30min,以40mmol/L磷酸氢二钠-甲醇(960∶40,V/V)为流动相等度洗脱,在阴离子色谱分离柱上进行分离,244nm处检测,12min内分离阿散酸。饲料中阿散酸的平均回收率达到92.4%～99.6%,相对标准偏差小于4.9%。阿散酸的检出限为0.2mg/L,定量限为1mg/kg。     

用实时直接分析质谱法(DART-MS)快速测定桑叶中的γ-氨基丁酸含量

γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)是桑叶中具有多种药理作用的重要组分之一。为了快速、准确测定桑叶中的GABA含量,建立了基于实时直接分析电离源-串联三重四极杆质谱(DART-MS)的桑叶GABA定性和定量分析方法。在DART离子源和质量分析器同为正离子的模式下,采用选择反应监测模式(SRM)并选取m/z 104→87为定量离子对,以其峰面积(y)进行定量分析,所得线性回归方程为y=4 552 210.19x-11 927 811.70,线性系数R~2=0.998,且在GABA溶液质量浓度(x)为2.50~40.00μg/m L范围内的线性关系良好。对3种质量浓度(7.82、4.14、2.78μg/m L)桑叶样品提取液进行测定的相对标准偏差(RSD)分别为3.98%、5.60%、2.28%,表明该方法的精密度良好;加标回收率在85.60%~97.47%之间。应用DART-MS法对来源于江、浙、皖蚕区的6个桑品种的桑叶样品进行检测,桑叶提取液样品中的GABA质量浓度从高到低的桑品种依次为湖桑32号(7.82μg/m L±0.31μg/m L,江苏海安)、强桑2号(7.44μg/m L±0.21μg/m L,浙江杭州)、强桑1号(7.14μg/m L±0.50μg/m L,杭州)、农桑14号(5.88μg/m L±0.30μg/m L,杭州)、育711号(5.81μg/m L±0.18μg/m L,安徽合肥)、农桑14号(4.25μg/m L±0.29μg/m L,浙江海宁)。建立的DART-MS法用于测定桑叶中的GABA含量,具有简单、快速且灵敏度高等特点。     

培养基成分对桑树试管苗黄酮类化合物含量的影响

基于探讨适合桑黄酮类化合物合成的优化培养条件,以桑品种陕桑305为材料,研究了培养基成分及其添加量对桑树试管苗黄酮类化合物含量的影响。结果表明:当培养基中果糖的质量浓度为30g/L,氮元素浓度为60.02mmol/L,氨态氮与硝态氮物质的量比为0.3165,MnSO4·4H2O和ZnSO4·7H2O的质量浓度分别为11.15、4.3mg/L,激素质量浓度为0.1mg/LNAA(α-萘乙酸)、0.5mg/L6-BA(6-苄氨基嘌呤)、0.5mg/LKT(激动素)时,有利于桑树试管苗叶片中黄酮类化合物的合成;Mn2+和Zn2+浓度能影响苯丙氨酸解氨酶活性,当培养基中的MnSO4·4H2O和ZnSO4·7H2O分别为11.15、4.3mg/L时,酶活性最高。     

桑叶中乙醇酸氧化酶活性的研究

桑叶中乙醇酸氧化酶活性是筛选低光呼吸桑品种的重要指标。采用测定乙醛酸苯腙(GPH)变化量的方法,对不同品种桑叶及用Na2S和草酸处理后桑叶中的乙醇酸氧化酶(GO)活性进行测定的结果表明:不同品种桑叶的GO活性存在显著差异,最大差异近3倍;用Na2S处理桑叶可以提高乙醇酸氧化酶活性,0.5~2.0 mmol/LNa2S处理可使GO活性比对照升高100%~130%;用草酸处理桑叶可以降低乙醇酸氧化酶活性,50~200 mmol/L草酸处理可使GO活性比对照下降49.6%~98.9%。     

根施甜菜碱对盐胁迫下桑树幼苗生理生化反应的影响

为探讨桑树的耐盐性栽培措施,对盐胁迫下桑树幼苗根施外源甜菜碱,调查不同处理下幼苗生长发育及相关生理指标的变化。结果表明,根施2.5~10.0 mmol/L甜菜碱,可以提高盐胁迫(100 mmol/L NaC l)下桑树叶片的叶绿素、可溶性糖和脯氨酸含量,保持叶片含水率,调节K+/Na+离子平衡,减少丙二醛含量,从而减轻盐胁迫对桑树生长的抑制作用;根施甜菜碱浓度以2.5~5.0 mmol/L较为合适。     

应用响应面法优化超声波辅助提取桑叶总黄酮的工艺条件

为高效提取桑叶中富有的黄酮类活性成分,在对超声波辅助提取桑叶总黄酮工艺中的主要条件进行单因素试验的基础上,采用响应面二阶设计方法,以桑叶总黄酮提取率为响应值,选择提取时间、乙醇体积分数、原料质量浓度进行3因素3水平优化试验设计,并对结果进行多元回归分析后建立各因素对桑叶总黄酮提取率影响的二次多项回归模型,得到超声波辅助提取桑叶总黄酮的最佳工艺条件为:提取温度50℃,乙醇体积分数80%,原料质量浓度0.025 g/mL,提取时间40 min。在此工艺条件下桑叶总黄酮提取率的预测值为1.60%,验证值为1.59%,表明建立的优化数学回归模型能较好地预测超声波辅助提取桑叶总黄酮的提取率,优化的工艺条件具有实用参考价值。     

溴虫腈在桑叶中的残留毒性与降解动态检测

为了保证桑园喷施杀虫剂溴虫腈后的养蚕用叶安全,采用食下毒叶法测定了溴虫腈对家蚕的残留毒性,用气相色谱法检测了喷药后不同时间桑叶中的药剂残留动态变化。结果表明:桑园内分别喷施250、200、150、100、50mg/L溴虫腈,检测到药剂在桑叶的残留毒性期分别为>5 d、>5 d、3 d、1 d和0 d;200 mg/L溴虫腈在桑叶中的降解动态方程为C=95.335e-0.159 9t(R2=0.906 8),半衰期为4.33 d,此检测方法的最低检出药剂残留质量比为3.97×10-4mg/kg;桑树盛产期喷洒100 mg/L溴虫腈后2 h、1 d、3 d、5 d、7 d、14 d、21 d和28 d,药剂在桑叶中的残留量分别为40.969、39.814、20.226、18.726、9.975、5.522、2.774和0.026 mg/kg;200 mg/L和100 mg/L溴虫腈2次喷施处理桑叶21 d后的最终残留量分别为12.958、4.242 mg/kg。10%溴虫腈悬浮剂用于桑树害虫或害螨防治的建议使用浓度为100 mg/L,采叶安全间隔期为施药后5 d。     

桑枝皮总黄酮提取工艺条件的优化试验

桑枝皮具有多种药用功效,其主要活性成分之一为黄酮类化合物。采用乙醇浸提法提取桑枝皮中的黄酮类化合物,在单因素试验考察提取温度、原料质量浓度、溶剂乙醇的浓度以及提取时间等因素对桑枝皮总黄酮提取效果的影响基础上,采用正交试验优化提取工艺条件。提取工艺条件中各因素对桑枝皮总黄酮提取效果的影响程度依次为乙醇体积分数提取温度提取时间原料质量浓度。确定桑枝皮总黄酮提取的最佳工艺条件为:提取温度80℃,原料质量浓度33g/L,乙醇体积分数70%,提取时间120min。在此条件下,桑枝皮总黄酮的提取率可达1.01%。     

新疆药桑黄酮和多酚的提取与分析研究初报

本文采用有机溶剂提取技术和分光光度法．对新疆药桑桑果、叶片和枝条等不同器官的黄酮、多酚类化合物进行提取和测试分析,研究结果表明：新疆药桑同一株树体桑果、叶片和枝条等不同器官间的黄酮和多酚类化合物的含量存在着显著差异,其中叶片黄酮和多酚类含量最高、枝条次之、桑果中最低;研究目的为新疆药桑桑叶,桑枝,桑椹的药用功效机理研究和开发利用提供理论依据。     

克孢灵(ClO2)叶面消毒对桑叶的药害及营养成分的影响

将主要成分为ClO2的蚕用消毒剂克孢灵用作桑树叶面消毒,当药剂质量浓度在200 mg/L以下时,对桑叶叶质没有不良影响;以100 mg/L以下质量浓度药液对桑叶作浸渍消毒时未发现叶片外观出现异常。经50~100mg/L克孢灵处理的桑叶,其水分、糖、蛋白质、脂肪等含量与对照相比没有明显变化,表明50~100 mg/L克孢灵用作桑树叶面消毒剂,对桑叶叶质没有不良影响。     

SO2湿沉降对桑树叶片的形态和其利用光能的影响

以桑树(Morus alba)为材料,用亚硫酸钠和亚硫酸氢钠的混合溶液模拟SO_2湿沉降,探讨SO_2湿沉降对桑树叶片光合特性的影响。结果表明,与清水对照(CK)相比,100mmol·L~(-1) SO_2湿沉降明显伤害了桑树叶片,表现出叶片失绿发黄、边缘焦枯、含水量下降,细胞皱缩且边缘模糊,气孔数量减少,叶片最大净光合速率显著下降(P0.05)。在50mmol·L~(-1) SO_2胁迫下,桑树幼苗表现出一定的抗性,叶片边缘略呈焦枯状态,叶色浓绿,内部细胞体积减小,密度增大,气孔数量增多,最大净光合速率下降,光呼吸速率、蒸腾速率和水分利用效率增加。说明桑树叶片可通过调整叶片结构,降低呼吸消耗和增大光呼吸及蒸腾速率来适应50mmol·L~(-1) SO_2胁迫。两种浓度SO_2处理的叶绿素荧光与光强的响应参数变化趋势相似,差异不显著(P0.05),当光强大于400μmol·mol~(-1)时,实际光化学效率、光化学淬灭系数和电子传递速率随着光强的增加而显著降低(P0.05),非光化学淬灭系数和非光化学淬灭值均显著增加(P0.05)。说明SO_2湿沉降降低了桑树叶片净光合速率,增强了呼吸消耗,促使叶片早衰。桑树可通过调整叶片自身结构、增加热耗散和提高水分利用效率等多种途径适应SO_2胁迫,且对低浓度SO_2胁迫表现出抗性。