桑树叶蛋白提取及蛋白粉制备工艺

桑叶蛋白质的氨基酸种类齐全,是营养均衡的优质蛋白质资源。以桑叶粉为原料提取蛋白质并制备蛋白粉,选择桑叶干燥方法、桑叶蛋白浸提剂种类、桑叶蛋白提取液中的蛋白质沉淀分离方法等工艺条件进行单因素试验。结果表明,将桑叶自然晾干粉碎,以5 g/L Na OH溶液作为浸提剂,设定料液质量浓度为40 g/L,经超声波处理20 min后在40℃下浸提1 h获得桑叶蛋白提取液,再以1 mol/L HCl沉淀分离蛋白质,可使桑叶蛋白质的提取率达到14.42%,其中粗蛋白的质量分数可达49.58%,冷冻干燥获得的桑叶蛋白粉中总黄酮与多糖的质量比分别达到60.97 mg/g和12.32 mg/g。采用上述优化的工艺技术条件,可以提高桑叶蛋白质的提取率和制备出品质较优的桑叶蛋白粉。     

桑叶中黄酮化合物的提取工艺及不同品种不同时期的含量变化

探讨了不同单因子对桑叶中黄酮成分浸提效果的影响。用80%乙醇作溶剂,原料质量浓度50.00 g/L,于70℃、pH 8的条件下浸提3 h并抽提2次的提取效果较好。以毛细管电泳仪测定、分析了不同品种、不同时期桑叶中的芦丁、槲皮素等成分,湖桑9001叶片中的芦丁含量高,湖桑32号的槲皮素含量高,10月份采摘桑叶中的芦丁和槲皮素的含量最高。芦丁、槲皮素等成分在桑叶中的动态变化:以10 mmol/L磷酸二氢钠-20 mmol/L的硼砂溶液(pH 8.62)作缓冲液,在25℃,20 kV的压力下电泳,245 nm波长处检测,线性关系良好,在8 m in内完全分离。     

15个桑品种不同季节桑叶的游离氨基酸含量及主成分分析

为了满足桑叶保健食品生产对优质桑叶原料的需求,以15个桑品种在5月份、10月份采摘的桑叶为材料,测定桑叶样品中的游离氨基酸含量,并采用主成分分析法评估15个桑品种桑叶中游离氨基酸的综合品质。15个桑品种不同生长时期的桑叶中均含有17种游离氨基酸,其中以5月份采摘桑叶中的各种游离氨基酸含量较高,且不同桑品种间的17种游离氨基酸含量大多存在显著差异(P0.05)。5月份采摘桑叶样品以早生桑1号桑叶干物中的γ-氨基丁酸含量(质量比1.950 mg/g)最高,以澧24×苗33桑叶中的游离蛋白质组成氨基酸含量(质量比18.837 mg/g)最高;10月份采摘桑叶样品以早生桑1号桑叶中的γ-氨基丁酸含量(质量比1.520 mg/g)最高,以伦教40号桑叶中的游离蛋白质组成氨基酸含量(质量比12.011 mg/g)最高。对2个季节采摘供试桑品种桑叶中的各种游离氨基酸含量的相关性进行分析,以10月份采摘桑叶样品中各种游离氨基酸含量之间的相关性较强,而5月份采摘桑叶样品中各种游离氨基酸含量之间的相关性较弱。进一步通过主成分分析选定可以反映10月份采摘桑叶样品中17种游离氨基酸综合品质86.140%信息的4个主成分,用以综合评价15个桑品种桑叶中游离氨基酸品质较优的是伦教40号和农桑14号,这2个品种可以作为桑叶药食产品生产的专用桑品种。     

桑叶杀青与烘干工艺条件优化

桑叶粉是桑叶食品和药品加工的常用原料,桑叶的杀青与烘干工艺对桑叶粉的品质有重要影响。以桑叶中过氧化物酶和多酚氧化酶失活以及桑叶的外观、气味和质地等感官审评评分为考核依据,通过单因素试验优化桑叶杀青主要工艺条件为杀青温度180~250℃、投叶量2.5 kg、杀青时间5 min。以桑叶粉中总生物碱、多糖、总黄酮和多酚的含量为考核依据,通过正交试验并采用多指标综合评分方法优化桑叶烘干工艺条件为烘干温度60℃、投叶量2 kg、烘干时间2 h。采用以上杀青、烘干工艺加工的桑叶粉,外观色泽淡绿,质地均匀,香气浓郁,生物碱、多糖和多酚的质量分数分别为0.36%、8.91%、2.36%,总黄酮质量比为8.17 mg/g。优化后的桑叶杀青与烘干工艺条件不仅改善了桑叶粉的感官品质,而且提高了生物活性物质的含量。     

富含GABA的食用桑树(Morus alba L.)品种筛选

为了筛选出制备富含GABA桑叶食品的桑树(Morus alba L.)品种,提高桑叶产品的口感品位,研究从GABA桑树品种资源库中筛选出含量高的18个品种,调查了影响桑嫩叶产量的指标发芽数,并且测定了影响产品口感品位的指标总氨基酸含量和总糖含量。结果表明各品种发芽数差异显著,枝条的平均发芽数在4个-12个之间,其中有10个品种平均发芽数超过8个;桑嫩叶的氨基酸含量在0.54 mg/g-6.12 mg/g之间,其中苍溪49和丰国等两个品种达6.0 mg/g以上;总糖含量在8.49 mg/g-75.90 mg/g,其中有4个品种的总糖含量达40 mg/g以上。经统计分析比较,丰国各指标均较高,作为食用桑树品种有优势。     

桑叶植酸的提取条件优化及桑叶和蚕粪中的植酸含量检测

建立高效提取桑叶植酸的方法,并应用于检测分析不同品种、不同成熟度桑叶中的植酸含量和蚕粪中的植酸含量,有助于进一步开展降低桑叶中的植酸含量及提高桑叶营养利用率的研究。运用Design-Expert 8.0.4 Trial软件的Box-Behnken模型,分析不同提取条件因子对桑叶植酸提取效果的影响作用为原料质量浓度>提取液中盐酸的浓度>浸提时间,确定最佳提取条件:提取液为1.25%盐酸+0.1 g/mL硫酸钠,浸提时间为2.18 h,原料质量浓度为0.05 g/mL。在此优化条件下提取桑叶和蚕粪中的植酸,并应用比色法测定5个桑品种春季成熟叶、嫩叶以及秋季成熟叶、嫩叶中的植酸平均质量比分别为3.98、3.55、3.75、3.52 mg/g,5龄幼虫蚕粪中的植酸含量为3.78 mg/g,与桑叶中的植酸含量接近。检测结果说明桑叶中的植酸随着桑叶的成熟其含量不断增加,家蚕不能吸收利用植酸态的磷。     

不同家蚕品种对桑叶中1-脱氧野尻霉素的富集能力调查

家蚕体内的1-脱氧野尻霉素(DNJ)来源于桑叶,为筛选对食下桑叶中DNJ有较强富集能力的家蚕品种用于功能性食品及药物的开发,以18个家蚕品种和6个桑树品种为材料,采用反相高效液相色谱-紫外检测法测定供试家蚕品种5龄第3天幼虫制备全蚕粉中的DNJ含量。不同地理系统家蚕品种对食下桑叶中DNJ的富集能力存在明显差异,其中日系品种与欧系品种对桑叶中DNJ的富集能力有显著差异(前者DNJ质量分数平均为0.3007%,后者为0.2469%),中系品种的DNJ质量分数平均为0.288 0%,与日系品种与欧系品种之间无显著差异;不同眠性(三眠与四眠)家蚕品种间对桑叶中DNJ的富集能力差异不明显。18个供试家蚕品种中,中系品种797对桑叶中DNJ的富集作用最强,其全蚕粉中的DNJ质量分数达0.4345%。选择6个家蚕品种分别取食不同桑树品种的桑叶,分析全蚕粉中的DNJ含量和桑叶中DNJ含量的相关性,其相关系数为0.826 0,全蚕粉中DNJ含量最高的家蚕品种与桑品种组合为家蚕乌2与陕桑403,其次为家蚕武功土种与甜桑、家蚕798与陕桑403。     

梅花鹿茸水溶性蛋白质的浸提及含量测定

建立考马斯亮蓝显色法(Bradford法)测定梅花鹿茸水溶性蛋白质含量的方法,研究鹿茸不同规格和部位水溶性蛋白含量的变化;比较干燥和超微粉碎加工法对梅花鹿茸水溶性蛋白含量的影响。采用建立的Bradford检测法,以水溶性蛋白含量为指标,对梅花鹿茸的浸提方法,超声波次数,超声波方式进行比较选择,确定最佳浸提条件为0.1 g的鹿茸粉,加入pH 7.4的PBS(0.01 mol/L)4 mL,37℃浸提30 min,4℃冷浸24 h,超声波130 W 4 min处理3次,4℃,6 800 r/min离心8 min。结果表明:梅花鹿茸二杠茸水溶性蛋白为59.275~648.225μg/mL,梅花鹿三杈茸水溶性蛋白为55.878~683.721μg/mL。二杠茸高于三杈茸;烘干二杠茸不同部位的含量变化为粉片高于蜡片,腊片高于纱片和骨片,纱片和骨片相近;冻干茸高于烘干茸;3种超微粉碎鹿茸间水溶性蛋白含量差异不显著。     

不同的蛋白沉淀和干燥工艺对桑叶蛋白粉营养价值的影响分析

比较分析了不同的蛋白沉淀方法和干燥方法对桑叶蛋白粉的氨基酸含量与组成及营养价值的影响。结果显示,不同蛋白沉淀方法对桑叶蛋白粉氨基酸含量及组成有一定影响,而蛋白干燥方法则不影响桑叶蛋白粉氨基酸含量及组成。桑叶蛋白粉的氨基酸比值系数分(SRC)可达69.29。桑叶蛋白粉的5种必须氨基酸(亮氨酸、异亮氨酸、赖氨酸、苏氨酸和缬氨酸)含量符合FAO/WHO要求,蛋氨酸是桑叶蛋白粉的第一限制性氨基酸;非必需氨基酸中天冬氨酸、脯氨酸和谷氨酸含量分别达到43.1mg/g、42.2mg/g和53.6mg/g。     

饲料桑叶蛋白提取工艺的优化

叶蛋白生产是缓解我国蛋白质饲料资源不足的有效途径。饲料桑蛋白质含量高,单位土地面积生物量大,是生产叶蛋白的优质原料。为了优化饲料桑叶蛋白提取工艺,研究了料液比、浸提液浓度、浸提温度和浸提时间4个因素对饲料桑叶蛋白提取率的影响,并通过正交试验对叶蛋白提取工艺进行了优化。结果表明,饲料桑叶蛋白浸提率在不同处理下存在差异;饲料桑叶蛋白最适浸提条件为:浸提温度为40℃,料液比为1∶16,浸提液浓度为0.5%NaOH,浸提时间为25 min,其最大提取率为2.73 g/100 g。     

用实时直接分析质谱法(DART-MS)快速测定桑叶中的γ-氨基丁酸含量

γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)是桑叶中具有多种药理作用的重要组分之一。为了快速、准确测定桑叶中的GABA含量,建立了基于实时直接分析电离源-串联三重四极杆质谱(DART-MS)的桑叶GABA定性和定量分析方法。在DART离子源和质量分析器同为正离子的模式下,采用选择反应监测模式(SRM)并选取m/z 104→87为定量离子对,以其峰面积(y)进行定量分析,所得线性回归方程为y=4 552 210.19x-11 927 811.70,线性系数R~2=0.998,且在GABA溶液质量浓度(x)为2.50~40.00μg/m L范围内的线性关系良好。对3种质量浓度(7.82、4.14、2.78μg/m L)桑叶样品提取液进行测定的相对标准偏差(RSD)分别为3.98%、5.60%、2.28%,表明该方法的精密度良好;加标回收率在85.60%~97.47%之间。应用DART-MS法对来源于江、浙、皖蚕区的6个桑品种的桑叶样品进行检测,桑叶提取液样品中的GABA质量浓度从高到低的桑品种依次为湖桑32号(7.82μg/m L±0.31μg/m L,江苏海安)、强桑2号(7.44μg/m L±0.21μg/m L,浙江杭州)、强桑1号(7.14μg/m L±0.50μg/m L,杭州)、农桑14号(5.88μg/m L±0.30μg/m L,杭州)、育711号(5.81μg/m L±0.18μg/m L,安徽合肥)、农桑14号(4.25μg/m L±0.29μg/m L,浙江海宁)。建立的DART-MS法用于测定桑叶中的GABA含量,具有简单、快速且灵敏度高等特点。     

桑嫩芽叶粉对提高家蚕人工饲料配方的效果

为提高家蚕人工饲料配方的改进,探讨了桑嫩芽叶粉在人工饲料配方中的含量组成对饲养家蚕的效果。用含20%桑叶粉 20%桑嫩芽叶粉的配方对养蚕效果较好,其疏毛率、2龄起蚕率、2龄眠体重、4龄眠体重比含40%桑嫩芽叶粉或含40%桑叶粉的人工饲料配方优。在人工饲料原料中加入适量的桑嫩芽叶粉,可提高人工饲料的养蚕效果。     

华东蚕区5个栽培桑品种叶片中的主要活性物质含量测定

为了获得药用价值较高的桑叶原料,对华东地区的5个主栽桑品种不同采摘季节、不同叶位桑叶中的总黄酮和总生物碱等主要活性物质的含量进行测定,比较这些活性物质含量在品种之间以及不同季节、不同叶位间的变化规律。测定供试桑品种桑叶样品中的总黄酮质量比在1.94~3.34 mg/g之间;总生物碱质量比在4.23~6.85 mg/g之间,其中,1-脱氧野尻霉素(DNJ)的质量比在1.89~3.06 mg/g之间。同一品种不同叶位桑叶中活性物质的总含量存在明显梯度,即上位叶中的含量中位叶中的含量下位叶中的含量。同一品种在不同季节采摘桑叶中的活性物质含量也存在差异:春季上、中位桑叶中的DNJ和总黄酮含量略高于秋季桑叶;总生物碱含量则是秋季桑叶高于春季桑叶。综合评价不同采样方式桑叶活性物质含量的测定结果认为,春季桑叶样品中,桑品种湖桑32号的上、中位叶及金10的下位叶中活性物质含量较高;秋季桑叶样品中,桑品种新一之上、中位叶及金10的下位叶中活性物质含量较高。     

不同全蚕粉中的1-脱氧野尻霉素含量及其对小鼠血糖浓度的影响

为探讨全蚕粉中1-脱氧野尻霉素(1-deoxynojimycin,1-DNJ)含量与降血糖效果的关系以及蚕体内1-DNJ的来源,测定了7个家蚕品种或杂交组合以及用5个桑品种和不同叶质桑叶饲养5龄蚕制备的全蚕粉中1-DNJ含量,同时测定了由相应的全蚕粉配制的蚕粉复合物对小鼠食后1.5 h血糖值的影响。结果表明,不同家蚕品种以及用不同桑品种和不同叶质桑叶饲养家蚕制备的全蚕粉复合物的降血糖效果均存在显著差异,凡是降血糖效果显著的全蚕粉,1-DNJ含量都处于较高水平,而1-DNJ含量低的全蚕粉其降血糖效果均较差,但降血糖活性与1-DNJ含量之间并不存在显著正相关关系,说明全蚕粉中还存在其它降血糖活性成分。养蚕用桑中的1-DNJ含量与蚕体内1-DNJ含量存在高度正相关性,而且用不含桑叶粉的人工饲料饲养的家蚕幼虫不含1-DNJ,因此证实了蚕体内的1-DNJ来源于桑叶,家蚕本身不能产生1-DNJ。     

不同收割时期、不同干燥方法对饲用桑叶和桑叶枝营养成分的影响

为研究收割时间和加工工艺对饲用桑叶和桑叶枝营养成分的影响,试验测定了不同收割时期及不同干燥方法的桑叶和桑叶枝的营养成分。结果表明:9月份收割的桑叶枝粗脂肪含量显著高于5月份、7月份(P0.05),而中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维含量显著低于5月份、7月份(P0.05);7月份收割的桑叶粗脂肪和粗纤维含量显著高于5月份(P0.05)。3个不同时期收割的桑叶和桑叶枝样品氨基酸含量丰富,氨基酸总含量为13.3%～20.22%。9月份收割的桑叶枝和桑叶维生素E和叶酸含量显著高于5月份、7月份(P0.05)。通过不同干燥方法对桑叶枝处理,结果自然晒干样品蛋白质含量显著高于直接烘干或酸液处理组(P0.05);自然晒干桑叶枝粗脂肪含量显著低于直接烘干(P0.05);酸液处理桑叶枝样品中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维含量显著低于非酸液处理组(P0.05);而直接烘干桑叶中维生素E和亚油酸含量显著高于自然晒干处理组(P0.05)。说明饲用桑叶和桑叶枝收割时间和干燥方式对饲用桑叶及桑叶枝有影响,可视畜禽养殖的营养需求而定。     

不同桑叶粉含量的人工饲料全龄饲育2HG×春54的研究

不同桑叶粉含量的人工饲料,通过全龄人工饲料育方式,对2HG×春54正反交蚕进行了饲育研究,结果是:该品种蚕对低桑叶粉含量的人工饲料配方有较好的适应性,随着桑叶粉含量的增加,疏毛率、起蚕率、眠蚕重成绩呈上升趋势,在含有15%桑绿枝粉及叶柄粉的前提下,稚、壮蚕的饲料中桑叶粉配比可在20%～30%。     

5种桑叶茶中氨基酸成分分析

为开发桑叶资源,采用安徽农业大学桑树品种园中5个主要品种叶片,加工成桑叶茶。利用氨基酸自动分析仪测得5种品种桑叶茶中15种氨基酸。每个桑树品种中,7种人体必需氨基酸约占15种氨基酸总量的40％左右。g-氨基丁酸的含量最你低的湖桑9001为142．75mg／g;最高的广东桑为227．00m／100g。表明桑叶茶中含有较丰富的氨基酸成分。     

攀西地区主要桑品种叶质生物鉴定与桑叶粗蛋白含量的相关分析

自1996年以来,为探明攀西地区主要桑品种桑叶叶质状况,以湖桑32号为对照,对新一之濑、南叶1号、云桑2号进行连续3年的饲育比较试验,并对各桑品种的桑叶粗蛋白含量进行测定和分析,结果表明:参试的3个桑品种饲育成绩与对照差异显著,其中以新一之濑最为突出,而南叶1号与云桑2号饲育成绩较为接近,但均优于对照,各品种饲育成绩与该品种的粗蛋白的含量成正相关.     

不同桑叶粉含量的人工饲料全龄饲育2HG×春54的研究

不同桑叶粉含量的人工饲料,通过全龄人工饲料育方式,对2HG×春54正反交蚕进行了饲育研究,结果是：该品种蚕对低桑叶粉含量的人工饲料配方有较好的适应性,随着桑叶粉含量的增加,疏毛率、起蚕率、眠蚕重成绩呈上升趋势,在含有15%桑绿枝粉及叶柄粉的前提下,稚、壮蚕的饲料中桑叶粉配比可在20%～30%。     

桑叶总黄酮提取工艺优化及其抗氧化活性分析

以桑叶总黄酮提取率为检测指标,通过单因素筛选及正交试验对桑叶总黄酮提取工艺进行了优化;并通过检测分析桑叶总黄酮清除ABTS~+·和DPPH·自由基能力来研究不同桑树品种的桑叶总黄酮体外总抗氧化活性。研究结果显示:桑叶总黄酮的最佳提取工艺为:提取时间120min,提取溶剂乙醇质量分数70%,料液质量浓度30g/L,提取温度80℃,优化后的桑叶总黄酮提取率达到33.97mg/g;不同桑品种的桑叶总黄酮提取液均对自由基ABTS~+·和DPPH·有清除能力,但不同品种间的清除率有极显著差异(P0.01),其中昌盛、湘桑7920、佛堂瓦桑、鲁插1号有较强的ABTS+·清除能力,清除率在90%以上,皖桑2号、鲁插1号、湖桑199有较强的DPPH·清除能力,清除率在90%以上,表明桑叶总黄酮可作为一种良好的天然抗氧化剂来源。