高效液相色谱柱的管理、维护、再生及修复技术

为加强和规范高效液相色谱柱的管理和维护,延长色谱柱的使用寿命,提高检测分析的工作效率,文章对高效液相色谱柱的实验室规范性管理进行了探讨。首先对色谱柱类型作了简要介绍,从流动相、样品及固定相3个方面详细分析了影响色谱柱使用寿命的原因。再从色谱柱档案的建立、分类存放、领用、启用、柱效评价、故障判断、适用范围信息积累、维护和再生、修复以及报废共10个方面建立了色谱柱实验室管理工作的一般流程。     

氨基色谱柱测定蜂蜜中4种糖方法研究

《中国药典》(2015年)蜂蜜中规定:用Prevail Carbohyrate ES色谱柱,以乙腈-水(75:25)为流动相,示差折光检测器测定蜂蜜中的果糖、葡萄糖、蔗糖及麦芽糖。此次试验证明用普通氨基色谱柱替代Prevail Carbohyrate ES色谱柱,待测组分与其他组分分离良好,精密度试验满足要求,回收率试验结果大于93%,结果准确、可靠,普通氨基柱可替代Prevail Carbohyrate ES色谱柱,用于蜂蜜中糖类物质的测定。     

HPLC法测定乳制品中的氨基酸含量

方法采用柱前衍生法，用C18反相色谱柱分离试样，经HPLC测定乳制品中十六种氨基酸的含量。方法通过测定水稻粉营养成分标；住物质（SB8801）含量来确定样品前处理条件与色谱分离条件，测定结果与标准值比较，绝对差值不超过算术平均值的10％，变异系数在3．9％～10％，方法操作简便，重现性好。色谱分离时间短且分离度好．     

常规高效液相色谱仪—壳核填料色谱柱快速测定黄曲霉毒素M1

作者使用常规高效液相色谱仪大体积进样技术2.6 μm壳核填料色谱柱快速测定黄曲霉毒素M₁。结果表明,在常规液相色谱仪上使用壳核填料色谱柱比传统全多孔填料色谱柱更加快速有效。与常规全多孔3 μm （4.6 mm×150 mm）和5 μm（4.6 mm×250 mm）填料色谱柱相比,相同仪器条件下使用洗脱强度低于流动相的溶剂定容上机,2.6 μm（4.6 mm×100 mm）核壳结构色谱柱的分析时间分别为后两者的51.5%和21.3%,峰高分别为后两者的183.9%和490.5%,峰方差分别为后两者的34.7%和6.2%。因此,常规HPLC上使用壳核填料色谱柱可以在大幅减少分析时间和成本的同时增加检测的灵敏度和准确性。     

高效液相色谱法测定底泥中土霉素含量

为有效测定底泥中土霉素残留量，建立了底泥中土霉素残留的提取方法和高效液相色谱检测方法。底泥样品中的土霉素可以用EDTA缓冲溶液进行有效提取，经过HI。B萃取小柱纯化和浓缩等步骤，底泥样品中土霉素的回收率为65．3％～70.1％。控制流动相为乙腈-0．01mol／L草酸溶液（12：88，V／V）；柱温为25℃；流速为1．0ml／min；350nm，紫外检测；以HypersilC18，BDS色谱柱对药物进行分离，在此色谱条件下土霉素的出峰时间为16．28min，该方法的最低检测限为0．01mg／kg。     

UPLC和HPLC法检测猪肉中磺胺类药物残留的比较

比较了超高效液相色谱法与高效液相色谱法测定猪肉中磺胺类药物残留的结果。采用农牧发[2001]38号动物源食品中磺胺类药物残留的检测方法有关标准,将原高效液相色谱方法转换并优化为超高效液相色谱方法。高效液相色谱方法色谱柱为Waters Symmetry C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相:乙腈-甲醇-水-乙酸(2∶2∶9∶0.2),流速:1 mL/min,进样量:50μL;超高效液相色谱方法色谱柱为Waters Acquity UPLC BEH RP18柱(2.1 mm×50 mm,1.7μm),流动相:乙腈-甲醇-水-乙酸(2∶2∶10∶0.2),流速:0.4 mL/min,进样量:5μL。结果表明超高效液相色谱方法能够替代高效液相色谱分析方法测定猪肉中磺胺类药物残留,既加快了分析速度,达到了样品分析的高通量,减少有机溶剂的使用,又得到更高的分析灵敏度。     

高效液相色谱柱前衍生化法检测牛奶中莫能菌素的残留

高效液相色谱是目前应用最多的色谱分析方法,具有速度快、分辨率高、灵敏度高、样品量少、容易回收和色谱柱可反复使用等优点.笔者阐述了用高效液相色谱检测牛奶中莫能菌素残留的方法,并介绍了相关色谱条件及检测标准.     

免疫亲和色谱-气相色谱/质谱法(IAC-GC/MS)检测猪肝中的沙丁胺醇与克伦特罗

制备出抗沙丁胺醇的抗血清，提取、纯化IgG制备免疫亲和色谱柱，针对沙丁胺醇与克伦特罗的动态柱容量分别为400ng／mL基质和416ng／mL基质。猪肝样品匀浆后用稀盐酸提取，经免疫亲和色谱柱纯化，再用GC／MS检测，即为IAC-GC／MS法。对沙丁胺醇的检测限为0．5ng／g，定量限为2ng／g，对克伦特罗的检测限为0．8ng／g，定量限为2．5ng／g。空白组织按照1、5、10、20ng／g的浓度添加药物，沙丁胺醇在空白肝中的添加回收率为78．4％～106．9％，克伦特罗的添加回收率为77．1％～102．9％。本研究建立的检测猪肝中沙丁胺醇与克伦特罗的IAC-GC／MS法乃国内首次报道。     

高效液相色谱法测定饲料中维生素B2

高效液相色谱荧光检测法测定维生素Ｂ２，采用ＹＷＧ－Ｃ１８柱，荧光检测器检测。实验证明：荧光检测法是一种快速、简单、准确、灵敏度和精密度较好的测定方法，可用于食品和饲料中维生素Ｂ２的分析。     

高效液相色谱电化学检测法测定兔血浆单胺递质及其相关化合物

采用苯基柱电化学检测法直接测定兔血浆单胺递质及其相关化合物去甲基肾上腺素、肾上腺素、多巴胺、5-羟色胺。优化了色谱条件，流动相向20mmol柠檬酸三钠（pH4.50）-甲醇（95:5)；柱温为25℃，该方法稳定可靠、简单易行，可以在临床上应用。     

高效液相色谱法测定饲料中的黄曲霉素B1

试验建立了免疫亲和色谱-高效液相色谱法（HPLC）测定饲料中黄曲霉素B1，采用甲醇-水提取饲料中的黄曲霉素B1，用免疫亲和色谱柱净化，以甲醇和水为流动相，反相高效液相色谱荧光检测法进行测定，激发波长为365nm，发射波长为435nm。方法的检测限为0．01μg／kg，定量限为0．03μg／kg，平均回收率为77．5％，变异系数为0．03％。     

高效液相色谱法测定乙酰甲喹注射液含量

建立了乙酰甲喹注射液含量测定的液相色谱分析方法。液相色谱柱为ThermoC18色谱柱,100mmX4．6mm,5μm,柱温30℃,流动相为乙腈-0．2％甲酸溶液（20：80）,检测波长375nm,流速1．0ml／min。此条件下乙酰甲喹的线性范围是5～100mg／L,回收率为97．0％～98．0％。     

液相色谱-质谱法分析禽蛋中的苏丹红

建立了禽蛋中苏丹红的液相色谱-质谱联用（LC—MS）检测方法。液相色谱柱为Waters SunfireTM C18150mm×2．1mm，3．5μm，柱温30℃，流动相A为乙腈，B为0．2％甲酸和乙腈的混合溶液，梯度洗脱，流速0．25mL／min；质谱选择电喷雾离子源（ESI^＋）。此条件下苏丹红Ⅰ和苏丹红Ⅱ的线性范围是0．1—500μg／L，检测限0．1μg／kg；苏丹红Ⅲ和苏丹红Ⅳ的线性范围是0．5—500μg／L，检测限0．5μg／kg。四种苏丹红的回收率为60％-80％。     

伊维菌素纳米乳中伊维菌素含量HPLC检测方法的建立

建立了伊维菌素纳米乳中伊维菌素含量的高效液相色谱检测方法(HPLC)。采用C18色谱柱(4.6 × 250 mm，5 μm)，以甲醇-乙腈-水(40∶55∶5)为流动相，流速1.0 mL/min，检测波长254 nm，进样量10 μL，柱温25 ℃。伊维菌素浓度在4.6～92.0 μg/mL时，其峰面积与浓度线性关系良好(r²=0.9996)，回收率高，平均回收率为98.25%~98.76%。精密度良好，RSD均小于2%，色谱峰图无杂质干扰，稳定性高，本操作方法简便，分析快速，结果准确，适用于伊维菌素纳米乳剂的含量测定。     

氧氟沙星免疫亲和色谱柱的研制

本试验将氧氟沙星与载体蛋白偶联成人工抗原,用合成的免疫原免疫家兔,制备出高效价抗OFL血清。经纯化后研制出针对OFL特异性吸附的免疫亲和色谱柱,并对色谱柱进行了评价,偶联率为93%,动态柱容量为2204ng/mL,分别添加5mL200ng/mL、300ng/mL和400ng/mL氧氟沙星标准工作液,5mL甲醇洗脱,高效毛细管电泳检测,连续测定6次,测得其回收率为94%、92.67%、95.5%,变异系数为5.32%、3.17%、3.84%。     

阿维菌素残留检测中不同SPE柱净化效果的比较研究

目的评价阿维茵素残留检测中不同SPE柱的净化效果。方法样品经乙腈提取,经碱性氧化铝SPE柱和C_(18)SPE柱净化,用多拉菌素作内标,经1-甲基咪唑和三氟乙酸酐衍生化后,用高效液相色谱-荧光检测器进行测定。结果经碱性氧化铝SPE柱净化后,阿维菌素和内标无干扰,且峰形尖锐对称;经C_(18)SPE柱净化后,阿维菌素存在杂质干扰。结论碱性氧化铝SPE柱比C_(18)SPE柱净化效果理想。     

柱后衍生阳离子交换色谱法测定动物源性饲料原料及饲料中的生物胺

试验采用柱后衍生阳离子交换色谱技术建立同时测定动物源性饲料原料及饲料中组胺、腐胺、尸胺、亚精胺、精胺和酪胺的分析方法.样品以2％磺基水杨酸溶液提取,4％磺基水杨酸溶液和二氯甲烷净化提取样液,采用氨基酸分析仪用阳离子交换色谱柱(LCA K17)、以柠檬酸K液为流动相分离6种生物胺,茚三酮溶液衍生后,可见光检测器于570 ...     

饲料中洛克沙胂的固相萃取--高效液相色谱法检测技术研究

建立了固相萃取(SPE)——高效液相色谱(HPLC)法测定饲料中洛克沙胂的分析方法,优化了提取方法、净化参数、萃取容量、流速和洗脱溶剂等条件。饲料采用20g/l的磷酸氢二钾溶液作提取液,用阴离子交换柱萃取净化的方法;色谱条件为:在266nm波长下检测,色谱柱为SymmetryShieldTMRP18柱(150mm×4.6mm),流动相为含0.1%甲酸的0.05mol/l磷酸二氢钾溶液-甲醇(体积比95:5),流速为1ml/min,洛克沙胂的浓度在0.2～10.0mg/l范围内含量与峰面积呈良好的线性关系,相对标准偏差为0.5%~1.07%,回收率为87.5%~96.7%。饲料中洛克沙胂的定量检出限为5mg/kg。     

乳与乳制品中山梨酸、苯甲酸的液相色谱检测方法

乳制品中的山梨酸、苯甲酸从偏碱性的样品水体系中通过沉淀的方法去除脂肪和蛋白质后,先用甲醇稀释,然后过滤.采用液相色谱方法,在反相色谱柱和紫外检测器于227nm处进行分离测定.     

气相色谱氮磷检测器测定饲料中呋喃丹的研究

本研究应用配有氮磷检测器的毛细管气相色谱检测饲料中呋喃丹残留量的方法。样品经丙酮提取．弗洛里硅土填充柱净化．然后采用毛细管柱气相色谱分离．氮磷检测器测定。对色谱分离条件和样品前处理条件进行了优化．研究了饲料基体及氨基甲酸酯类和有机磷类农药对呋喃丹的干扰。呋喃丹在浓度0．2～20μg／mL范围内线性良好．相关系数高于0．990：在不同浓度范围内，平均加标回收率高于70．3％：相对标准偏差低于14．9％。该方法简便、快速、灵敏、净化效果好。可满足不同饲料中呋喃丹农药残留量的检测需要。