鸡传染性支气管炎HA和HI试验方法的研究

用传染性支气管炎(IB)红细胞凝集抑制(HI)试验对SPF鸡血清、健康鸡血清、用SPF鸡制备的IBV标准阳性血清、感染鸡血清和自然发病鸡血清及野外样品测定结果证明,本法操作简便、特异性强、敏感性高、需时短、结果易判定。IBV HI抗体于感染后3周开始出现,然后持续上升,二个月后仍呈上升趋势.本法可定性或定量检测鸡IBV抗体,特别适用于现地诊断和免疫监测。     

新城疫HA-HI试验中可用豚鼠醛化红细胞代替鸡新鲜红细胞

在鸡新城疫血凝（HA）和血凝抑制（HI）试验中,将豚鼠红细胞用戊二醛醛化处理后配制成2%细胞悬液,与2%新鲜豚鼠红细胞、1%新鲜鸡红细胞获得的检测结果基本一致.经醛化的豚鼠红细胞在4℃或室温条件下也能长时间保存而不溶血.结果表明,在新城疫HA-HI试验中可以用豚鼠醛化红细胞代替鸡新鲜红细胞.     

猪流感病毒的分离鉴定

用SPF鸡胚从我国东北地区猪群中分离出 3株H3 N2 猪流感病毒 (SIV) ,分别命名为A/Swine/Heilongjiang/ 1/ 2 0 0 0、A/Swine/Heilogjiang/ 2 / 2 0 0 0和A/Swine/Heilogjiang/ 3/ 2 0 0 0。SIV分离株第 8代病毒液对 0 .5 %豚鼠红血球的血凝价分别为2 0 48log2 、2 0 48log2 、40 96log2 ;将其制成琼扩 (AGP)抗原与禽流感标准阳性血清均出现清晰白色沉淀线 ;与流感病毒H3 亚型标准阳性血清的血凝抑制 (HI)价分别为 8log2 、7log2 、7log2 ,但不能被鸡新城疫阳性血清抑制。这 3株SIV都为热不稳定型 ;均能凝集驴、绵羊、鸡、兔、豚鼠、小鼠、大鼠、人O型血红血球 ,对马、牛红血球均不凝集 ;感染一个病毒最小致死量的鸡胚平均死亡时间分别为 86 .4、12 9.6和 91.2小时 ;每 0 .2ml病毒液鸡胚半数感染量分别为 4.75lg、4.5lg、和 6 .0lg ;对鸡的静脉内接种致病指数和脑内接种致病指数各为 0 .5 6、0 .32、0 .5 2和 0 .77、0 .38、0 .5 2 ;对小鼠的半数致死量分别为 2 .6lg、2 .0lg和 2 .5lg ;试验感染小鼠、豚鼠和猪均可发病并出现死亡。存活动物接种后第 6天和第 14天的血清 ,其HI价均在 8log2 以上 ,而AGP均为阴性。     

水禽禽流感HI抗体检测方法的探讨

2003年国家质量监督检验检疫总局出台了<高致病性禽流感诊断技术>(GB/T18936-2003)[1],标准中要求采用鸡红细胞作为血凝与血凝抑制试验的指示细胞监测禽流感抗体,这对于免疫鸡血清中的相应抗体水平监测比较合理[2-4],但对鸭、鹅及其他免疫禽类进行HI抗体水平监测时,常出现非特异性凝集现象[2-3],对检测结果的判定影响较大.有鉴于此,本试验拟对禽流感疫苗免疫后的水禽血清HI抗体检测方法进行探讨,研究适合免疫水禽禽流感HI抗体检测的方法.     

血凝抑制试验中常见问题的分析

正血凝抑制试验(HI)是基层兽医实验室常用的检测禽流感及新城疫抗体效价的试验方法,步骤简单,但在操作中由于一些细节把控不到位,经常出现试验失败或结果判定不准确的问题。笔者就血凝抑制试验中常出现的问题总结如下。1基本操作步骤血凝抑制试验(HI)常分为三个阶段来完成,一是准备阶段,主要是准备PBS液、阿氏液及1%鸡红细胞悬液;二是血凝试验(HA)阶段,主要是配制4单位抗原;三是血凝抑制试验(HI)阶段,主要是测     

鸡减蛋综合症免疫斑点诊断法的研究

本研究以鸡减蛋综合症(EDS-76)为模型,对常规的免疫斑点(IB)试验做了改进,在对各主要参数进行系统测定的基础上。建立了可用于检测EDS-76的IB诊断法。在该方法中,病鸡血清呈“ ”形染色,健康鸡血清呈“-”形染色,从而使检测结果与判定符号实现了统一。对16种鸡病的标准阳性血清、EDS-79病毒人工感染鸡血清、临床健康鸡血清和SPF鸡血清的检测结果及与现行的EDS-76血凝抑制(HI)试验和琼脂扩散(AD)试验比较表明,IB试验不仅特异、敏感,而且简便、快速。本研究在禽病系列诊断试剂盒的研制方面是一个有益的偿试。     

注射猪细小病毒灭活疫苗的豚鼠的抗体反应

18批AEI灭活疫苗免疫53只PPV HI阴性豚鼠,每批2～3只,免疫后全部产生抗体反应。这些豚鼠全部产生抗体的时间是第一次免疫后4周,平均HI价2442。免疫豚鼠HI抗体的持续时间大于10个月。5批灭活苗对16只HI阴性豚鼠和16头HI阴性猪的免疫比较试验结果,免疫后HI阳性率均为100％,HI抗体全部出现的时间猪为第一次免疫后1周,豚鼠为第一次免疫后3周。免疫后3～5周的平均HI价猪为3925,豚鼠为1360。     

醛化鸡红细胞在EDS-76病毒HA和HI试验中的应用

用醛化鸡红细胞进行 EDS-76病毒的血凝(HA)及血凝抑制(HI)试验结果与用新鲜鸡红细胞检测的结果相同或低一个滴度,图象清晰、稳定、结果易于判定。醛化鸡红细胞具有保存期长、使用方便、无自凝性等优点.     

鸡新城疫红细胞凝集抑制试验不同操作方法的比较

<正> 鸡新城疫康复鸡、隐性感染鸡和免疫后的鸡血清中都含有抗鸡新城疫病毒的抗体,有抑制鸡新城疫病毒凝集红细胞的特异作用,因此可以应用红细胞凝集抑制试验(简称HI)来诊断鸡是否患过鸡新城疫病和进行鸡群免疫状态的监测。目前HI试验有几种不同的做法,为了解这几种做法的HI效价是否存在明显差异,特对这几种方法进行比较。     

NDVLaSota、V4疫苗免疫鸡及免疫攻毒鸡的主要特异性血清抗体动态变化规律比较

本研究应用间接ELISA方法对新城疫LaSota和V4疫苗免疫SPF鸡及免疫后攻毒SPF鸡的血清中新城疫病毒（NDV）特异性HI抗体、IgM和IgG抗体水平的动态变化进行了检测。结果表明，V4较LaSota疫苗免疫鸡HI抗体提前3天左右出现，但除高峰期（1周左右）外，其HI抗体水平均低于LaSota免疫鸡。LaSota免疫鸡。LaSota疫羁免疫鸡血清中NDV特异性IgM和IgGr抗体高峰较V4免疫鸡提前约2周出现，攻毒后，LaSota免疫鸡血清中特异性IgG和IgG回忆应答显著，而V4免疫鸡IgM和IgG回忆应答不明显。     

鸡减蛋综合症免疫斑点诊断法的研究

本研究以鸡减蛋综合症（EDS－76）为模型，对常规的免疫斑点（IB）试验做了改进，在对各主要参数进行系统测定的基础上，建立了可用于检测EDS－76的IB诊断法。在该方法中，病鸡血清呈“＋”形染色，健康鸡血清呈“－”形染色，从而使检测结果与判定符号实现了统一。对16种鸡病的标准阳笥血清、EDS－79病毒人工感染鸡血清、临床健康鸡血清和SPF鸡血清的检测结果及与现行的EDS－76血凝抑制（HI）试验和琼旨扩散（AD）试验比较表明，IB试验不仅特异、敏感，而且简便、快速。本研究在禽病系列诊断试剂盒的研制方面是一个有益的尝试。     

鸡新城疫基础低抗体与基础高抗体免疫效果研究

鸡新城疫(ND)是由副粘病毒属的新城疫病毒(NDV)引起的一种严重危害养鸡生产的烈性传染病.鸡新城疫微量血清凝集抑制试验(微量HI试验)结果与鸡对NDV的抵抗力有正相关性,目前大都使用微量HI试验测定鸡血清中ND抗体水平.     

鸡新城痘基础低抗体与基础高抗体兔痘效果研究

鸡新城疫（ND）是由副粘病毒属的新城疫病毒（NDV）引起的一种严重危害养鸡生产的烈性传染病。鸡新城疫微量血清凝集抑制试验（微量HI试验）结果与鸡对NDV的抵抗力有正相关性，目前大都使用微量HI试验测定鸡血清中ND抗体水平。     

影响鸡新城疫抗体水平测定结果的因素

鸡新城疫抗体水平高低常用血凝试验(HA)和血凝抑制试验(HI)进行检测。该方法操作简单、判定方便,但往往因操作不规范而影响试验结果。笔者对影响试验结果的因素进行初步分析。     

豚鼠醛化红细胞的制备及其在新城疫和禽流感HA/HI试验中的应用

目前,在新城疫(ND)和高致病性禽流感(HPAI)的疫情免疫监测中,血凝/血凝抑制试验(HA/HI)依然是基层畜牧兽医部分最主要的检测方法,β-微量法以其操作简便、迅速、易判定、能准确表达结果等优点被广泛应用。在HA/HI试验中,需要使用1%鸡新鲜红细胞作指示剂。但鸡新鲜红细胞存在着以下几个缺点:一是健康非免疫公鸡较难获得,尤其是不同鸡或同一羽鸡不同时期采的红细胞,用于实验可能存在较大的差异;二是新鲜鸡红细胞质脆易碎,保存期短,需临用时现采现配;三是新鲜鸡红细胞易吸附免疫球蛋白等物质,洗涤不彻底易影响实验结果。由此导致了血凝/…     

传染性支气管炎病毒(M41株)HI试验抗原的特异性和敏感性试验

采用本研究室制备的3批传染性支气管炎病毒(IBV,M41株)HI试验抗原,分别对100份和80份不同鸡血清进行IBV HI抗体检测,同时用IBV ELISA抗体检测试剂盒进行检测,比较两种不同方法检测的特异性和敏感性。结果显示,特异性试验中80份SPF鸡血清,自制抗原检测均为阴性,IBV ELISA检测79份为阴性,10份其他鸡病血清,两种方法检测9份均为阴性,10份IBV阳性血清两种方法检测均为阳性;敏感性试验中,74份已知IB疫苗免疫或IBV M41株感染鸡血清IBV HI检测72份为阳性,阳性检出率为97.3%(72/74),IBV ELISA检测74份均为阳性,阳性检出率为100%(74/74),SPF鸡血清及其他鸡病血清,两种方法检测均为阴性,两种检测方法总符合率为97.5%,差异不显著(P0.05)。试验结果证明,本研究室自制抗原具有良好的特异性,特异性为100%,抗原同时具有良好的敏感性,但IBV ELISA方法的敏感性要高于IBV HI方法。     

鸡醛化红细胞在血凝和血凝抑制试验中的应用

应用鸡醛化红细胞 (FoRBC)代替新鲜配制红细胞 (FrRBC) ,进行血凝试验 (HA)和血凝抑制试验 (HI) ,以检测病毒滴度及其对应抗体效价。结果 :0 75 %FoRBC与 1 %FrRBC所测病毒HA和相应抗体HI效价一致。表明 0 75 %FoRBC可以替代 1 %FrRBC ,且具有不易破裂 ,保存期长 ,使用方便 ,无自凝 ,图象清晰、稳定 ,结果易判定等优点     

用鸽鸡红细胞进行禽流感血凝抑制试验的比较

分别用1％鸽红细胞和1％鸡红细胞,对经H5亚型禽流感疫苗免疫过的鹅、鸽、鸡的血清,按照不同血清处理方法,进行禽流感血凝抑制试验.结果表明,鸽红细胞作指示细胞,检测鸽免疫血清HI抗体效价效果优于鸡红细胞,但不适于检测鹅、鸡的免疫血清的HI抗体效价.     

猪细小病毒(BJ-2株)灭活疫苗免疫效力试验

用实验室制备并经初步检验合格的猪细小病毒灭活疫苗免疫豚鼠和试验猪,测定免疫豚鼠和猪的HI抗体效价,并对免疫的怀孕母猪进行攻毒,探索HI抗体效价与攻毒免疫保护的相关性.结果显示免疫后一个月所有经免疫的豚鼠、猪的HI抗体效价均达到1∶256以上,高水平的抗体可持续一个月以上;初产母猪免疫后攻毒试验显示攻毒后免疫组不出现病毒血症,且免疫攻毒组的平均窝产仔数和产活仔数均明显高于未免疫攻毒组,且胎猪的体长、体重等指标存在显著差异,试验结果充分说明该疫苗的免疫效果是非常确实的.     

鸭源H9亚型禽流感病毒的分离与鉴定

从广东各地鸭群的392份泄殖腔样本中分离到3株病毒。用琼脂扩散试验(AGP)及血凝抑制试验(HI)证实3个分离株均为H9亚型禽流感病毒(AIV)。3个AIV分离株都能凝集人、鸡、山羊、豚鼠、兔的红细胞,但不能凝集猪红细胞;所有分离株血凝素(HA)对热不稳定;60℃加热处理10 m in后,病毒失去对鸡胚的感染性;3个AIV分离株的半数鸡胚感染剂量(E ID50)分别为107.2/0.2 mL、105.8/0.2 mL和106.1/0.2 mL。