含鸡传染性贫血病毒VP1、VP2基因重组火鸡疱疹病毒的构建

采用PCR方法，以传染性贫血病毒(CIAV)DNA为模板，扩增并克隆了CIAV的VP1、VP2基因，并进行了序列分析。经基因修饰，将这两个基因分别加上表达元件后连接作为目的基因。通过同源重组技术，将目的基因插入到火鸡疱疹病毒(HVT)gC基因区，构建了一株含CIAV VP1、VP2基因表达单元的重组HVT(VP1VP2-rHVT)：体内、体外传代结果表明该重组病毒性状稳定。采用PCR扩增及Southem blot杂交检测，证实了CIAV VP1、VP2基因的插入。     

鸡传染性贫血病毒VP1、VP2基因在杆状病毒表达系统中的表达

将鸡传染性贫血病毒M9905株VP1、VP2基因分别或同时克隆到杆状病毒转移载体pFastBacDUAL中，然后转化到DHIOBAC感受态细胞中与Bacmid杆状病毒穿梭载体进行转座重组，最后将重组子转染Sf9昆虫细胞，得到分别或同时含VP1、VP2基因的重组杆状病毒rBacVP1、rBacVP2及rBacVP1—2。PCR扩增结果证实VP1、VP2基因重组到杆状病毒基因组中；SDS-PAGE电泳分析和间接免疫荧光试验结果表明VP1、VP2基因在重组病毒中得到了表达。     

猪繁殖与呼吸综合征免疫学研究进展

猪繁殖与呼吸综合征(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome,PRRS)是80年代后期新发现的一种严重危害养猪业的传染病。临床上以妊娠母猪流产、死胎、木乃伊胎、弱仔等繁殖障碍以及仔猪的呼吸道症状和高死亡率为特征。PRRS于1987年在美国首次发现临床     

山羊关节炎-脑炎荧光抗体制备及初步应用

山羊关节炎-脑炎(CAE)是年80年代新发现的一种由反转录病毒科慢病毒亚科成员引起的山羊慢病毒传染病。由于该病与马传染性贫血(EIA)、绵羊进行性肺炎(OPP)以及人类艾滋病(AIDS)等慢病毒密切相关而引起极大重视,相继建立了CAE琼脂扩散试验和酶联免疫吸附试验等诊断方法。流行病学普查结果表明,美洲CAE感染率为83％,欧洲为61％,我国在1985年从进口萨能氏奶山羊检出CAE阳性羊。迄今为止,     

山羊关节炎－脑炎与其相关病的血清学关系

用琼脂扩散法检测，山羊关节炎－脑炎病毒（ＣＡＥＶ）抗原与马传染性贫血（ＥＩＡ）阳性血清不发生反应，ＥＩＡＶ抗原与ＣＡＥ阳性血清亦不发生反应．ＣＡＥＶ抗原与绵羊进行性肺炎（ＯＰＰ）阳性血清不发生反应．但ＯＰＰＶ抗原与ＣＡＥ阳性血清发生反应．     

禽流感间接ELISA诊断试剂盒的研制及应用

将成熟的禽流感音接ELISA快速诊断技术试剂盒化，确定其外包装、规格、盒内组成，对盒内各组分的性状、保存、质量控制以及诊断试剂盒的特异性、敏感性，可重复性、符合率、与国外同类产品比较，保存期等进行了全面、详细的研究。试剂盒由9种成套试剂组成，在－15℃至－20℃保存540天各项性能仍然很好。该试剂盒与离流感间接ELISA诊断试剂盒对同样血清样品检测，符合率为100％。拥有剂盒，只票面 准备生理盐水，即可对大量血清样品同时进行检测，操作简单方便、结果特异性强、敏感性高、稳定、快速、更适合于禽流感免疫技术的监测及现地疫病诊断等需要。先后制备诊断试剂盒16个批次，已成功应用于我国省、市兽医站、兽医研究所、农业院校、农科院，农业公司、口岸检疫部门及鸡等各领域对禽流感的定性诊断、流行病学调查、免疫抗体监测等。     

鸡马立克病疫苗研究进展

文章介绍了鸡马立克病使用的各种疫苗,包括单价、多价活疫苗和HVT冻干疫苗,并简述了各种疫苗的优缺点。同时对各种重组疫苗、基因缺失疫苗、核酸疫苗的研究情况做了概述,并指出了目前鸡马立克病疫苗研究存在的问题及发展前景。     

鸡马立克病病毒814株gE、gI、gp82基因的克隆及序列分析

从感染鸡马立克病病毒血清Ⅰ型(MDVⅠ)814株的鸡胚成纤维细胞(CEF)中提取病毒总DNA,以其为模板,根据GenBank中MDVⅠ GA株基因组gE、gI、gp82基因序列,设计并合成3对特异性引物,用PCR方法分别扩增了814株的gE、gI、gp82基因,并将扩增的基因片段克隆到pMD18-T载体中,进行序列测定,应用DNA Star软件分析814株gE、gI、gp82基因核苷酸序列,并与已发表的MDVⅠ毒株序列进行了比较.结果表明,不同MDVⅠ毒株的gE、gI、gp82基因同源性很高,814株与已发表的MDVⅠ毒株的gE、gI、gp82基因核苷酸序列同源性分别在99.4%、98.9%和99.6%以上.     

用切向流超滤的方法浓缩蓝耳病灭活疫苗半成品的研究报告

为了验证采用切向流超滤的方法浓缩蓝耳病疫苗半成品对提高其效价的效果,我们作了多次浓缩试验,并于每次试验之后进行TCID50检测。选取其中4次试验的样品灭活乳化成苗,进行仔猪的免疫试验,于免疫后21日采血分离血清做ELISA检测。从动物试验的检测结果来看,浓缩后的仔猪阳性率高于浓缩前,证明以超滤的方法提高蓝耳病疫苗半成品的效价是可行的。     

鸡败血支原体灭活苗制造过程中培养物浓缩工艺的研究

鸡败血支原体灭活苗中含足够的菌量是保证疫苗质量的技术关键之一，为此用几种方法将鸡败血支原体牛心汤培养物浓缩。结果化学沉降法达到浓缩目的，仍保持免疫原性，但粘度大，且所选用的聚乙二醇对鸡具有毒性而不适用；超滤或离心法浓缩均制备出合格疫苗，适用于制造鸡败血支原体灭活苗的工艺。