鸡白介素的分子生物学和应用研究进展

白介素(IL)是鸡体内一类重要的细胞因子,在机体的免疫应答中起重要作用,近几年随着鸡白介素基因(IL-1、IL-2、IL-6、IL-15、IL-18等)相继克隆成功,其分子生物学和应用等方面的研究也逐步展开.白介素还可以作为免疫治疗剂、免疫增强剂、构建新型基因工程苗等.文章对其应用研究进行了综述,对其未来的发展进行了展望.     

不同方法诱导鸡IL-2基因转录及cDNA克隆的研究

应用反转录一聚合酶链式反应(RT-PCR)技术，从鸡新城疫Ⅰ系疫苗诱导的鸡胚和成鸡脾脏及成鸡白细胞中提取的总RNA中扩增得到鸡白介素-2(IL-2)基因cDNA。结果表明：以50倍或100倍稀释度接种鸡胚48h提取脾脏总RNA扩增效果最好；以5倍或10倍免疫剂量免疫成鸡48-72h，提取脾细胞或血液白细胞总RNA扩增效果最佳。为进一步研究鸡IL-2基因分子生物学特性提供了简便的诱导方法。     

鸡白细胞介素-2分子生物学和疾病防治应用研究进展

鸡白细胞介素-2(IL-2)是由激活的T细胞分泌产生的糖蛋白,具有显著的免疫增强作用,不仅在T细胞、B细胞的生长与分化和NK细胞的激活等方面发挥重要作用,而且与其他细胞因子一起发挥免疫功能,是一种能影响机体免疫反应各个方面的调节因子。文章综述了鸡白细胞介素-2分子生物学和疾病防治应用研究进展。     

白细胞介素-2在动物疾病防治中的应用进展

白细胞介素-2（IL-2）是免疫学研究的重细胞因子之一,在动物疾病防治中发挥重作用,显示了良好的应用前景。就IL-2作为免疫佐剂增强疫苗免疫效果和提高动物抗感染性疾病能力等方面进行了综述,并对应用中存在的问题进行了探讨。     

鸡白细胞介素2分子单克隆抗体的研制

以含有鸡白细胞介素2（ChlL-2）基因的重组真核表达质粒pcDNA3．1-ChlL-2免疫6周龄BALB／c小鼠,末次加强免疫后取其脾细胞与骨髓瘤细胞Sp2／0-Ag-14融合,应用间接ELISA筛选阳性克隆。共获得2株特异性分泌抗鸡IL-2分子的杂交瘤细胞株,分别命名为1H10和1E6,其腹水ELISA效价分别为1：6400和1：3200,亚类鉴定结果均为IgM。重组质粒pcDNA3．1-ChlL-2转染COS-7细胞,以上述单克隆抗体（mAb）检测表达产物,结果表明,2株mAb均能与表达产物反应;Western blot分析结果显示,2株mAb均与原核表达鸡IL-2蛋白发生特异性反应。本研究所制备的抗鸡IL-2分子mAb可为建立简单、快速的鸡IL-2检测方法提供可能,并为鸡IL-2生物学特性和禽类细胞免疫机理的研究提供材料。     

鸡IL-18基因的克隆与序列测定

根据Genbank发表的鸡IL-18基因序列,设计一对引物,提取鸡脾细胞总RNA,经RT-PCR扩增和扩增产物的克隆、测序,获得了中国江西土鸡IL-18基因片段,其大小为597bp,与Schneider报道的鸡IL-18基因序列完全一致,为进一步研究鸡IL-18的基因表达、生物学活性和应用奠定了基础。     

重组白细胞介素- 2对固始鸡免疫机能的影响

本试验旨在探讨重组白细胞介素- 2（IL- 2）对固始鸡免疫机能的影响。应用大体解剖技术和免疫技术,对重组IL- 2对固始鸡免疫机能的影响进行了研究。注射固始鸡IL- 2的各免疫组的抗体水平均高于鸡志贺氏菌苗组,明显高于空白对照组;各免疫组抗体水平在第2～3周达到最高水平,以后在4～7周内基本保持恒定水平;注射IL- 2的各免疫组的脾脏指数、胸腺指数、法氏囊指数基本上均高于空白对照组和鸡志贺氏菌苗组。重组IL- 2可促进固始鸡免疫器官的生长发育和成熟,增强鸡的免疫机能,可抵抗各种病原微生物的感染。     

海兰鸡IL-18全基因的克隆与序列分析

IL-18是一种能诱导产生IFN-γ的新型细胞因子,在调节Th1型细胞免疫应答中起重要作用。根据GenBank发表的鸡IL-18cDNA基因序列,自行设计一对引物,经植物血凝素(PHA)活化60日龄海兰鸡的脾淋巴细胞后,提取其总RNA,经反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增,扩增产物进行了T-A克隆、测序,获得了中国海兰鸡IL-18基因全序列,其大小为597 bp,与GenBank中查得的鸡IL-18基因进行比较发现,中国海兰鸡IL-18基因与Schneider报道的鸡IL-18基因序列完全一致,为进一步研究鸡IL-18基因表达、生物学活性和应用奠定了基础。     

SPF雏鸡感染REV后IL-2 mRNA表达的动态变化

为研究SPF鸡感染禽网状内皮组织增生症病毒(REV)后白细胞介素2(IL-2) mRNA表达的动态变化,本研究应用荧光定量RT-PCR方法,对SPF鸡感染REV后主要免疫器官的IL-2 mRNA转录水平进行了初步研究.结果显示,与对照组相比,REV感染组鸡的脾脏、胸腺和法氏囊中IL-2基因的表达量在感染后7d、14d、21d、28 d、35 d、42 d和49 d均呈现升高,而且除21日龄、28日龄鸡的脾脏外,均为差异显著(p＜0.05).本研究表明REV感染后可以诱导鸡的机体表达IL-2.     

鸡IL-2在新城疫病毒F基因疫苗免疫中的作用

利用国内首次克隆成功的鸡 IL- 2基因真核表达质粒与新城疫病毒 (NDV) D2 6株 F基因真核质粒 (F基因疫苗 )联合免疫 SPF雏鸡 ,观察了其诱导的免疫应答及免疫保护作用 ,以及不同免疫方式对其免疫作用的影响。结果证实了国内克隆鸡 IL- 2基因的免疫增强作用 ,以及作为免疫佐剂应用于禽类基因免疫的可行性 ,为鸡 IL- 2这一新型佐剂的实际应用提供了重要的试验依据。