ERIC-PCR的研究进展

肠道细菌基因间重复序列(enterobacterial repetitive intergeniC consensus,ERIC)是主要存在于肠道细菌的一类基因间重复序列.ERIC-PCR技术是利用ERIC核心的高度保守序列设计引物进行PCR,因此,通过这一技术扩增基因组DNA,构建DNA指纹图谱,能广泛用于肠道微生物动态分析、微生物分类鉴定等方面的研究.     

PCR技术及其在寄生虫学研究中的应用

聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,简称PCR)是Mullis等人(1985)发明的一项DNA扩增技术。它利用耐热的DNA聚合酶快速特异地扩增任何所希望的目的基因或DNA片段。PCR技术不仅可以用于基因分离、克隆和核酸序列分析,还可用于遗传病及传染病的早期诊断等诸多方面。目前,PCR技术在传染病的诊断     

DNA条形码与生物分类学研究

DNA条形码是一段特殊的、可用于物种鉴定的DNA序列.是近几年来国际上生物分类学研究的热点.该技术在动物分类学研究中已得到广泛的应用,所采用的DNA序列是线粒体细胞色素C氧化酶Ⅰ号基因(CO Ⅰ)的部分序列.在植物分类学研究中,DNA条形码的进展相对缓慢.目前尚处于对所提议的叶绿体DNA片段rpoB、rpoCl、matk、rbcL等进行比较和评价阶段.阐述了DNA条形码在生物分类学研究方面的应用现状、存在的问题及可能的发展趋势.     

DNA条形码及其在动物遗传多样性中的应用

DNA条形码技术是现今生物分类学中重要的分子技术之一,其利用线粒体细胞色素C氧化酶亚单位Ⅰ(COⅠ)等基因可以快速准确地鉴定新种和隐存种。COⅠ基因存在于所有动物中,呈母系遗传、比较保守、无内含子、进化速率比较快(是核基因进化速率的2～10倍)、具有明显的碱基偏好性,而且其DNA序列很少存在插入和缺失。DNA条形码技术不仅是生物形态学研究的一个重要补充,而且为研究生物分类与进化开辟了新的途径。本文就DNA条形码技术的技术原理、操作步骤及其在动物分类学及遗传多样性中的应用作一概述,旨在通过对其技术原理了解的同时,掌握其在当代生物分类学中的独特作用、现实意义及局限性,为进一步开展生物分类及进化研究提供思路。     

基因探针技术在大肠杆菌诊断中的应用

基因探针又称核酸探针,它是随着分子生物学及分子遗传学的深入发展而产生的一种新的检测技术。与常规的实验室检测方法相比,基因探针技术具有高度特异、敏感、快速、简便等优点。近几年来,基于探针只能和靶细菌等的DNA杂交,而不与其它DNA杂交的原理,已将探针技术作为一种有效的检测手段,应用于细菌、病毒、疟原虫、钩     

DNA疫苗在猪病防制中的研究应用及其优缺点分析

一、DNA疫苗的免疫机理 DNA疫苗(DNA vaccine)又称基因疫苗、核酸疫苗,由病原抗原编码基因及质粒载体两部分组成.抗原基因可以是单个基因或完整的一组基因,也可以是编码抗原决定簇的一段核苷酸序列,质粒载体可在真核细胞中表达外源基因.DNA疫苗是将编码目的抗原蛋白基因序列的真核质粒,经各种基因转移途径导入机体细胞,通过宿主细胞转录、翻译、表达出相应的抗原蛋白,诱导宿主产生针对该抗原蛋白的保护性免疫应答,从而达到免疫的目的.     

基于DNA水平的差异显示技术及其在寄生虫遗传变异中的应用

在一个生命有机体中,基因的表达是按照时间和空间顺序有序地进行的。基因的这种差异性表达,决定着每一个生命体的生长发育、分化、细胞周期调控、衰老及死亡等生命过程。因此,差异显示技术是研究生命有机体生命过程分子机制的重要手段。目前,研究寄生虫遗传变异的差异显示技术主要包括蛋白质水平、DAN水平和RNA水平来进行。DNA是各种生命个体的遗传物质,DNA的遗传差异能够确切地反映生物群体的遗传变异。目前在DNA水平的差异显示技术主要有PCR—RAPD、PCR—RFLP、PCR—AFLP、PCR—SSCP、DNA指纹分析法和SRAP法等。     

家畜DNA的微注射转移技术

DNA 操作和胚胎处理技术的新进展,有可能在有机体之间直接进行遗传信息转移。用这种方法改良家畜有很大潜力,因此引起广泛重视。重组 DNA 技术于1973年问世,1980年Gordon 等报道了小鼠胚胎原核微注射单基因或 DNA 片段成功。此后,陆续报道了约20个这类裸基因试验.1985年 Hammar 等首次报道     

DNA干扰研究进展

DNA干扰(DNAi)即含有与体内某一基因的cDNA相同序列的DNA链,在没有启动子诱发其表达的情况下导致细胞内序列特异的基因表达被抑制.DNA干扰可参与真核生物的抗病毒侵粢,阻断转座子的异常活动,调控基因表达等.随着RNA干扰技术缺陷的暴露以及人们对多种同源基因依赖性基因沉默的深入了解,DNAi有望成为最有潜力的基因干预治疗方法,并将在抵抗人类重大疾病和基因治疗方面发挥重要作用.     

转基因动物研究概况

转基因动物是指以实验方法导入的外源基因在其染色体基因组内稳定整合并能遗传给后代的一类动物.自从本世纪七十年代初期重组DNA技术问世以来,经过二十多年的探索,基因工程无论在理论研究上,还是在生产的实际应用方面都取得了惊人的成绩.随着重组DNA技术的不断发展,许多具有重要价值的蛋白基因及有关调控序列得以克隆,并通过体外培养细胞实现了表达.但是,体外培养细胞虽然可以无限繁殖,却不能反映出基因在正     

重组DNA技术及其在动物科学中的应用

DNA重组技术是基因工程的核心,指在体外条件下,将不同生物的基因进行入工"剪切""组合"和"拼接",使遗传物质重新构建,然后通过载体转入受体细胞内并使所需要的基因在受体细胞内表达,DNA重组技术涉及核酸分子杂交技术、PCR反应、限制性核酸内切酶等工具酶的应用、基因转移等多项技术方法,本文就该技术在实验动物科学中的应用作一综述。     

用PCR扩增兔SRY基因的研究

用家兔外周血提取基因组DNA,根据欧洲家兔SRY基因的cDNA序列中开放性阅读框部分设计引物,采用PCR技术对基因组DNA进行了SRY基因检测。结果显示,SRY基因(+)是雄性决定基因,这对于幼兔的性别鉴定、性别选择及在胚胎时期诊断性连锁疾病有重要意义。     

基因芯片技术在药物研究中的应用

生物芯片是由现代分子生物学技术结合微加工技术制成的具有一定生物学分析检测功能的微型器件，以DNA芯片和PCR、毛细管电泳及介电电泳为代表。九十年代以来，在人类基因组实施计划的推动下，DNA芯片技术得到了迅猛的发展，具在生命科学的研究中开始发挥作用。DNA芯片技术能够同时分析成千上万个基因或基因组，研究与疾病诊断相关的基因序列，可用于药理基因组学研究与基因重复测序工作，它在药学领域将对于药物靶标的发现、多靶位同步超高通量药物工筛选、药物作用的分子机理研究、中医药基础理论的现代化、药物活性和毒性评价等领域具有其它方法无可比拟的优势。美国Affymetrix公司已开始与Merck公司、Hoffmanlaroche公司等合作，将基因芯片技术用于新药筛选；Incyte Pharmaceuticals,Synteni,Nanogen等公司也采用基因芯片技术进行新筛选，以期从天然药物或合成物中筛选出基因相关药物。     

细菌λ Red重组技术的应用及其影响因素

由λ噬菌体的exo、beta、gam 3个基因分别编码的Exo、Beta和Gam蛋白组成λRed同源重组系统。λRed重组是细菌靶基因置换的有效技术,该技术发展迅速,已广泛应用于大肠埃希菌等细菌染色体DNA的基因敲除、基因整合,可以对任何大小的DNA分子进行精确修饰。利用λRed重组系统不仅可以构建工程菌,还可以为研究细菌的致病机理和耐药机制提供新的方法。然而,许多应用因重组频率而受到限制,影响重组频率的因素主要有底物浓度、同源片段的长度、内源性核酸酶、错配蛋白等。论文综述了λRed同源重组技术的应用进展及影响重组的因素,以期为优化重组试验方案及提高试验的成功率提供帮助。     

DNA疫苗在猪病防制中的研究应用及其优缺点分析

一、DNA疫苗的免疫机理DNA疫苗(DNA vaccine)又称基因疫苗、核酸疫苗,由病原抗原编码基因及质粒载体两部分组成。抗原基因可以是单个基因或完整的一组基因,也可以是编码抗原决定簇的一段核苷酸序列,质粒载体可在真核细胞中表达外源基因。DNA疫苗是将编码目的抗原蛋     

一种简便快速的DNA体外扩增方法(PCR)

随着基因工程技术在生物科学尤其是医学和兽医学等领域日益广泛的应用,简便、快速、大量获得一些目的DNA已成为所有基因操作者的共同愿望。许多基因操作及以DNA为基础的检测实验,都要求有一定量的 DNA,按基因工程操作的一般程序,大量获得一种目的基因要经过下列步骤:获取少量纯的目的基因→基因与载体体外重组→转     

RAPD技术在动物遗传育种中的应用

随机扩增多态性DNA (randomamplifiedpolymorphic,DNA)是由Williams等 (1990 )提出的一种DNA多态检测技术 ,它以PCR为基础 ,用一系列不同的碱基随机排列的寡聚核苷酸为引物 (通常为 10bp)对所研究的基因组DNA进行单引物扩增。RAPD是分子水平上的一种标记方法 ,具有简单、快速、无须标记探针和杂交实验等优点 ,因而广泛应用于动物基因定位与构建遗传图谱、MAS、预测杂种优势、性别鉴定等研究领域。1　基因定位与遗传图谱的构建家畜中大多数有经济意义的性状都受多基因控制且表型呈现连续分布的数量性状。微效多基因在基因组的分布…     

DNA指纹技术及其在动物遗传育种中的应用

DNA指纹 (DNAfingerprint ,DFP)技术是一种在单一实验中可以检出大量DNA位点差异性的分子生物学技术。 1980年Wyman和White首先在人类基因文库的DNA随机片段中分离出高度多态的重复序列区域。 1982年 ,Bell等人又在人胰岛素基因附近发现高度重复序列。 1985年 ,Jeffreys等人发现小卫星位点的核心序列并以此为探针获得了第一个杂交图谱 ,由于其具有和人的指纹相似的个体特异性而被称为DNA指纹图谱。之后 ,随着分子生物学的发展 ,DNA指纹技术也在不断发展 ,并在医学、生物学等多个领域得到广泛应用。本文综述DNA指纹技术的发展及…     

奶牛育种基因标记技术及在黑龙江省应用的前景展望

动物分子育种是依据分子遗传学和分子数量遗传学原理,利用DNA重组技术来改良畜禽品种的新兴学科.本文从奶牛分子育种的角度,着重阐述了奶牛基因标记技术育种的研究进展,以及通过DNA分子标记技术来改良奶牛重要生产性状或筛选、培育优秀种公牛和种子母牛等.同时指出了奶牛分子育种是将来奶牛品种改良的主要工具.     

基因差异表达分析技术在寄生虫学中的应用研究进展

生物体表现出的各种生物学特性,主要是由于基因在不同细胞间及不同生长阶段的选择性差异表达引起的.这些基因的差异表达按特定的时间和空间顺序有序地进行着,决定了生命活动的多样性.而基因差异表达研究的各种分析技术正是在此基础上发展起来并在兽医寄生虫学中得到广泛应用.以mRNA差异显示、抑制消减杂交法和DNA微列阵分析等为代表的基因差异表达分析技术,在基因表达谱的分析及基因生物学功能研究,阐述寄生虫的发病机制,寄生虫疾病诊断,筛选合适的药物靶标和疫苗候选分子有效地防病治病方面发挥着重要作用.