广西地区副猪嗜血杆菌ERIC-PCR指纹图谱分型研究

为探讨肠道细菌基因间重复序列(ERIC)的聚合酶链反应(PCR)技术用于副猪嗜血杆菌基因分型的可行性,对分离自广西地区不同猪场的22株副猪嗜血杆菌进行ERIC-PCR指纹图谱分型研究.结果发现,22株分离株显示出12种指纹图谱,可以区分无法进行血清分型的菌株.表明ERIC-PCR可适用于对副猪嗜血杆菌进行分子流行病学调...     

应用ERIC—PCR对鸡致病性大肠杆菌进行基因分型

鸡大肠杆菌病是由致病性大肠杆菌(E.coli)引起的一种鸡的细菌性疾病,常引起较高的发病率和死亡率.研究发现,革兰阴性杆菌基因组存在一个新的重复序列家族,即肠杆菌基因间重复一致(enterobac-terial repetitiVe intergenic consensus,ERIC)序列,又称基因间重复单位(intergenic repeat units,IURs).     

肠道细菌基因间重复共有序列-聚合酶链式反应指纹图谱技术用于细菌分型的研究进展

肠道细菌基因间重复共有序列-聚合酶链式反应(enterobacterial repetitive intergenic consensus-polymerase chain reaction,ERIC-PCR)指纹图谱技术利用普遍存在于生物体内的ERIC进行引物设计,通过基因扩增,获得能够表征其基因组结构的产物,该方法简单易行、重复性好、用时短,被广泛应用于细菌基因分型及同源性判别。本文简述细菌分型的研究背景和ERIC-PCR指纹图谱技术的原理及特点,归纳该技术在细菌基因分型方面的优缺点及其在常见食源性致病菌基因分型中的应用现状,并对ERIC-PCR指纹图谱技术应用于乳品企业污染菌溯源的研究进行展望。     

藏猪食草机理的研究——藏猪肠道微生物的多样性分析

采用PCR/DGGE技术和16S rDNA序列分析方法,对2种猪(普通猪、藏猪)肠道细菌优势菌群结构进行了比较分析.研究结果表明,从DGGE图谱中均可以发现2种猪肠道细菌具有一定的相似性,种内个体间相似性明显高于种间相似性.同时进行了部分优势细菌16S rDNA基因V6～V8区序列的系统发育分析发现,DGGE图谱中优势条带的16S rDNA基因序列中有7条克隆的序列与基因库最相似菌的相似性大于97％,其余的克隆序列相似性在90％～96％,其中有1条序列被鉴定为与纤维素分解菌产琥珀酸厌氧螺菌相似.本试验分析结果可为进一步研究藏猪及其肠道微生物的特性及其食草机理提供依据.     

莱航鸡rDNA重复基因家族的克隆

动物rDNA基因是一种GC含量较高、结构复杂的重复序列。通过结合生物信息学技术,经反复摸索后选用LAPCR法扩增莱航鸡rDNA基因重复序列,经测序鉴定最终克隆了莱航鸡的3个rDNA基因及其2个间隔序列。研究对克隆复杂DNA序列时引物设计的特别规则、反应体系的改进、DNA聚合酶的选用、循环参数的调整等进行了探索。     

PCR指纹图谱技术在酸奶质量监测中的应用

用PCR指纹图谱技术对市售某品牌酸奶进行了短期动态监测,对于收集的3个生产批次的9个酸奶样品,用ERIC（Enterobacterial Repetitive Intergenic Consensus,肠杆菌基因间保守重复序列）-PCR和PCR-DGGE（Denaturing Gradient Gel Electrophoresis,变性梯度凝胶电泳）指纹图谱技术对其菌种组成及其稳定性进行评价.ER-IC-PCR指纹图谱聚类分析结果显示,同一生产批次内3个不同包装的样品ERIC-PCR指纹图谱相似性为90%左右,而不同生产批次样品之间ERIC-PCR指纹图谱相似性有所下降,为82%.该结果进一步用DGGE指纹图谱进行证实.DGGE分析结果表明,G2样品明显缺少一条主带,经割胶回收测序发现,这条主带代表的微生物是Lacto-bacillus delbrueckii subsp.Bulgaricus,说明该产品不同生产批次间的稳定性不是很好.DGGE图谱和测序结果还显示,除G2样品外,该酸奶样品的菌种组成与产品标签说明是一致的.     

微生物表面展示技术的发展及应用

微生物表面展示技术是利用基因工程手段实现外源肽段(或蛋白质结构域)以融合蛋白形式在微生物表面进行展示的新型基因工程技术,被展示的多肽或蛋白质可以保持相对独立的空间结构和生物活性.其重要特征和优点是靶蛋白与其编码DNA处于同一个病毒或细胞中,可以通过序列测定确定DNA序列并进一步推导外源蛋白氨基酸组成,从而实现了基因型和表现型的统一.自1985年Smith等人创建噬菌体表面展示技术以来,微生物表面展示技术在许多研究领域一直被寄予厚望,经过20多年的研究和发展,已经得到广泛应用.本文就微生物表面展示技术的发展及其应用状况做一简要介绍.     

温和气单胞菌及益生菌对鲤鱼肠道菌群多样性影响的研究

为了分析温和气单胞菌及益生菌对鲤鱼肠道菌群多样性的影响,试验将鲤鱼分为对照组(A组)、益生菌组(B组)、温和气单胞菌组(C组)、益生菌+温和气单胞菌组(D组),采用RAPD和ERIC方法对鲤鱼肠道菌群多样性进行了研究。结果表明:两种技术的DNA图谱中都出现了17种谱带,RAPD扩增的每组条带数量少于ERIC扩增得到的,且组间条带差异性明显;C组的肠道微生物多样性低于A组,D组的肠道微生物多样性高于C组,B组的肠道微生物多样性高于D组。     

我国兽用转基因微生物产品的安全评价

转基因生物是指通过基因操作技术对遗传物质（DNA）进行重组、修饰,从而改变基因组构成的动物、植物、微生物。动物用转基因微生物产品主要是指经过人工修饰基因的疫苗、诊断试剂和饲料添加微生物。转基因技术打破了异种微生物之间天然杂交的屏障,实现了微生物间的基因转移,获得了新的生物学性状。基因重组技术为人类有效的利用微生物的遗传特性,     

基因打靶技术在动物生产中的应用

<正>基因打靶技术是20世纪80年代发展起来的一项分子生物学技术,它利用基因转移的方法,将外源DNA序列导入靶细胞,通过外源DNA序列与靶细胞内染色体上同源DNA序列间的重组,将外源DNA定点载入靶细胞基因组上某一特定的位点,或