重庆市禽白血病及禽网状内皮组织增生症的血清流行病学调查

禽白血病和禽网状内皮组织增生症均为禽的肿瘤性免疫抑制疾病,是危害养鸡业的两种非常重要的病毒性传染病。为调查重庆市肉鸡中禽白血病及禽网状内皮组织增生症的流行情况,在北碚区、涪陵区、开县、垫江县、潼南县五个区(县)的8个活禽交易市场采集260份血清样本,采用酶联免疫吸附试验检测了所有血清中禽白血病病毒(ALV)和禽网状内皮组织增生病毒(REV)的抗体。检测结果显示:禽白血病病毒和禽网状内皮组织增生病毒抗体阳性率分别为16.5%(43/260)和5%(13/260),双抗体阳性率为4.61%(12/260)。与全国其他地区相比,重庆市肉鸡中这两种病原的感染率相对要低,但仍应重视这两种疾病的防控,以控制病原的进一步传播。     

浙江省宁波市部分鸡场鸡免疫抑制性疫病血清学调查

为了解禽白血病、禽网状内皮组织增生症和鸡传染性贫血在本地鸡群的感染情况,对宁波市7个区、县的15个鸡群进行了3种疫病4种抗体的血清学检测。结果显示:362份被检血清中,AB亚群禽白血病病毒(ALV-AB)抗体阳性率为55.0%,J亚群禽白血病病毒(ALV-J)抗体阳性率为21.5%,禽网状内皮组织增生症病毒(REV)抗体阳性率为32.0%,鸡传染性贫血病毒(CAV)抗体阳性率为66.8%;15个鸡场AB亚群禽白血病和鸡传染性贫血共感染率为100.0%;12个鸡场共感染了3种免疫抑制性疫病,混合感染率高达80.0%。调查结果表明免疫抑制病在宁波市鸡群中非常普遍。     

我国进口种鸡群禽白血病及禽网状内皮组织增生症的血清学检测

为了解河北进口种鸡群禽白血病病毒(ALV)及禽网状内皮组织增生症病毒(REV)的感染情况,对实验室留存的2011—2013年间来自美国、加拿大和法国的15批进口种鸡的血清样品450份,通过ELISA方法进行ALV-A、B亚群和REV的抗体检测。结果共有8批28份样品为ALV-A、B亚群抗体阳性,群体阳性率和个体阳性率分别为53.3%和6.2%;未检出REV抗体阳性样品。结果表明目前我国进口种鸡群中存在一定比例的禽白血病病毒A、B亚群抗体阳性个体。     

山东省烟台地区J亚型禽白血病与禽网状内皮组织增生症血清流行病学调查

为了解山东省烟台地区J亚型禽白血病与网状内皮组织增生症的流行情况,于2019年9～10月,采用酶联免疫吸附试验对来自烟台地区8个农业县的16个种鸡场、20个商品代场和16个散养鸡群共940份血清样本进行检测分析。结果显示:有5个农业县检测到J亚型禽白血病,抗体阳性率为2.9%;8个农业县全部检测出禽网状内皮组织增生症,抗体阳性率为43.9%,双抗体阳性率为2.7%。此次调查为烟台地区禽白血病的净化及禽网状内皮组织增生症的防控提供了数据支撑。     

禽网状内皮组织增生病病毒与禽生物制品质量控制

禽网状内皮组织增生病病毒（ＲＥＶ）是禽网状内皮组织增生病（ＲＥ）的病原，属反转录病毒种禽网状内皮组织增生病病毒中的一种。该病毒主要侵害火鸡，也能引起鸡、鹅、鹌鹑和鸭等禽类以淋巴－网状细胞增生为特征的肿瘤性的病理综合征。主要表现为急性网状组织细胞增生、...     

广西部分规模场禽网状内皮增生症流行病学调查

通过ELISA方法对广西6个规模场的874份血清样品进行禽网状内皮病毒抗体检测,结果发现血清抗体阳性率平均为79.63%;用PCR方法对6个规模场的18个批次的鸡痘疫苗和8个批次的禽马立克氏病疫苗进行禽网状内皮增生症病毒检测,结果18个批次的鸡痘疫苗检测出1个批次为禽网状内皮增生症病毒阳性,8个批次的马立克氏病疫苗均未检测出禽网状内皮增生症病毒。     

2017—2019年安徽省部分禽场禽白血病定点监测

为了解安徽省部分禽场禽白血病病毒（avian leucosis virus，ALV）感染情况，2017—2019年，采用ELISA检测试剂盒，对安徽省59个禽场的3 275份血清和2 100份蛋清进行ALV-J抗体、ALV-A/B抗体和p27抗原检测，并对相关结果进行三间分布数据分析。结果显示：2017—2019年ALV-J抗体、ALV-A/B抗体和p27抗原平均抗体阳性率分别为19.36%、7.66%和5.90%；从不同养殖规模看，大型场的ALV-J抗体、ALV-A/B抗体和p27抗原的场阳性率分别为73.91%、73.91%和62.52%，均高于中型场和小型场；从不同场点类型来看，祖代场的ALV-J抗体和p27抗原的个体阳性率最高，分别为21.52%和6.01%，商品代场的ALV-A/B抗体的个体阳性率最高；从不同养殖品种看，黄羽肉鸡ALV-J抗体个体阳性率（26.24%）、鸭ALV-A/B抗体个体阳性率（12.31%）均高于其他禽种。结果表明，安徽省禽白血病流行较为严重，尤其是大型场、祖代场以及肉鸡和鸭的ALV感染风险较高。建议进一步加强对高风险禽场和禽群的禽白血病监测，持续推进禽白血病净化工作。     

禽网状内皮组织增生症病毒检测方法研究进展

禽网状内皮组织增生症（Reticuloendotheliosis,RE）是危害养禽业的一种重要病毒性肿瘤病。本文概述了禽网状内皮组织增生症病毒（REV）实验室检测方法的研究进展。在细胞生物学方面,主要依靠病毒分离培养、病毒电镜形态检查、病毒特异性抗原及其抗体的检查等。在分子生物学方面,主要依靠国内外相继建立起的PCR、荧光定量PCR、LAMP技术及斑点分子杂交等。介绍和比较了各种方法的优缺点和实用性,为临床兽医科技工作者建立快速、简便、准确、实用的检测方法提供参考。     

贵阳地区禽白血病的血清学调查

为了解和掌握禽白血病在贵阳地区发生和流行的基本情况,采用禽白血病A、B亚群抗体(ALV-A或B)和J亚群抗体(ALV-J)检测试剂盒,对贵阳市13个养鸡场中的15个肉鸡和商品蛋鸡共481份血清进行禽白血病抗体间接ELISA检测,结果 ALV抗体阳性率达到11.43%(55/481),其中9个鸡群172份血清样本A、B亚群抗体阳性率达到18.60%(32/172),13个鸡群309份血清J亚群抗体阳性率达到7.44%(23/309),结果表明该地区存在禽白血病病毒的感染。     

部分禽源生物制品外源病毒的检测

进行了部分禽用生物制品外源病毒检测的鸡胚检查法、细胞检查法和鸡检查法。鸡胚检查法应用SPF鸡胚检验;细胞检查法主要通过鸡红细胞吸附试验、禽白血病病毒ELISA和禽网状内皮组织增生症病毒IFA检验疫苗是否含有外源鸡红细胞吸附因子、禽白血病病毒和禽网状内皮组织增生症病毒,并提出疫苗检验的判定标准,为各兽用生物制品生产企业新城疫疫苗的外源病毒检验提供参考。     

J亚群禽白血病病毒与禽网状内皮增生症病毒共感染对肉鸡生长和免疫功能的抑制作用

1日龄网鸡感染J亚群禽白血病病毒(ALV-J)以及共感染禽网状内皮增生症病毒(REV)后,肉鸡生长发育明显受阻,体重增重明显下降(P＜0.05),法氏囊、胸腺明显萎缩(P＜0.05),在用新城疫疫苗免疫后,感染组血清中新城疫抗体效价显著低于对照组(P＜0.05);在ALV-J和REV共感染后,这种抑制作用更为明显(P＜0.01).ALV J单独感染后,鸡对传染性法氏囊病病毒(IBDV)弱毒疫苗免疫后的抗体反应与对照组没有明显差别,但ALV-J与REV的共感染可明显延缓鸡对IBDV弱毒疫苗免疫的抗体反应.     

ARV、REV与ALV三重RT-PCR检测方法的建立

根椐GenBank中已发表的禽呼肠孤病毒（ARV）、禽网状内皮增生病病毒（REV）、禽白血病病毒（ALV）等3种病毒基因组序列,设计了3对分别与ARV、REV和ALV某段基因序列互补的引物。在建立各病毒单项RT-PCR技术的基础上,优化三重RT-PCR反应条件,建立了3种病毒的三重RT-PCR技术。结果表明,用这3对引物对同一样品中的ARV、REV、ALV核酸模板进行三重RT-PCR扩增,可同时扩增ARV的247bp,ALV的675bp,REV的467bp的特异性片段,而对其他6种禽病病原的PCR扩增结果均为阴性。敏感性测定结果表明,该三重RT-PCR技术能检出10pg的ALV、1pg的ARV和10pg的REV模板。用42份临床病料对本研究多重RT-PCR技术和单项RT-PCR技术进行对比验证,结果显示,两者的总符合率为92%以上。表明建立的多重RT-PCR检测方法,具有特异、快速、准确的特点,可用于对这3种病毒的同时检测和鉴别诊断。     

Testing and management of a specific pathogen free chicken flock with special reference to avian leukosis virus infections.

A specific pathogen free (SPF) chicken flock was reared in isolation under laboratory conditions during five years and continuously tested for presence of specified avian pathogens. The potential occurrence of avian leukosis virus (ALV) was most thoroughly examined. The RIF and neutralization tests were unequivocally negative. Radioimmunoassay was used for detecting the presence of the major protein (gs-a) of the group-specific antigen of avian onoorna viruses. This test seemed to he well suited for checking ALV infections in chicken flocks whereas the COFAL (complement fixation avian leukosis) test was considered unreliable for this purpose. Yolk and serum from SPF chickens were negative for anti-gs-a antibodies measured by the radioimmunoassay; immunized or naturally infected birds showed anti-gs-a amounts correlating with the neutralizing titre. Besides, the flock was regularly tested for presence of seven other contagious avian pathogens. There was no evidence of infection.SPF chicken flock; avian leukosis; laboratory diagnosis of avian leukosis virus infections.     

用IFA和PCR对部分省区肉鸡白血病的调查

从山东省内不同地区和宁夏、河南等省随机采集肉鸡和肉种鸡的病料 ,采用间接荧光抗体实验和 PCR方法进行 J亚群禽白血病的流行病学调查 ,结果从 92份商品代肉鸡病料和 1 5份父母代种鸡病料中先后鉴定出 8株 J-AL V,其中 3株来自商品代肉鸡 ,5株来自父母代肉种鸡 ,感染 AL V-J的肉鸡品系有 AA、科宝和爱维因 ,表明我国肉鸡群中 AL V-J的感染十分严重。     

广西地方禽类品种ALV和REV感染情况的调查及ALV分离株gp85基因序列分析

为了解广西钦州地区主要地方品种商品禽类中禽白血病病毒(ALV)、禽网状内皮组织增殖症病毒(REV)的感染情况,本试验随机采集了广西钦州地区代表饲养场的麻鸭、狮头鹅、铁脚麻鸡、火鸡、鸽子共5个品种的蛋清、肛拭子及血清样品共953份,使用ELISA商品试剂盒进行检测;然后对部分ALV p27阳性的个体采集其血清样品接种DF-1细胞进行病毒分离并测定其gp85基因的序列。结果发现,除铁脚麻鸡外其他4个非鸡禽类品种的ALV检测均为阴性;除鸽子和狮头鹅外,麻鸭、铁脚麻鸡、火鸡均检测到REV抗体阳性;获得的两株铁脚麻鸡ALV分离株gp85基因之间核苷酸同源性为94.5%,与参考株之间核苷酸同源性为86.9%~94.9%;两株分离株gp85基因之间氨基酸同源性为91.5%,与参考株之间氨基酸同源性为84.0%~91.6%。高变区hr1和hr2区存在较多可变位点,可变区vr2和vr3相对较保守。系统进化树分析结果表明这两个毒株与参考株SCAU11-XG的亲缘关系最近。     

Infections Investigation of ALV and REV in Guangxi Local Poultry Breeds and Sequence Analysis of gp85 Gene of ALV Isolates

In order to investigate the infection status of avian leukosis virus (ALV) and avian reticuloendotheliosis virus (REV) in the major local breeds of Qinzhou,Guangxi,totally 953 samples of egg white,cloaca swab and serum of Ma duck,Shitou goose,Tiejiao-Ma chicken,turkey and pigeon were collected from the representing flocks and detected by the commercial ELISA kits.ALV was isolated for the ALV p27 positive samples by culturing on DF-1 cells,and gp85 gene was sequenced.The results showed that the detections of ALV were negative in the samples except those of Tiejiao-Ma chicken,while REV antibody was found positive in Ma duck,Tiejiao-Ma chicken and turkey.The nucleotide sequences of gp85 gene of two isolates shared 94.5% identity with each other,and shared 86.9% to 94.9% with reference strains.The amino acid sequences of gp85 gene of two isolates shared 91.5% identity with each other,and shared 84.0% to 91.6% with reference strains.There were many variable sites in the hyper variable region hr1 and hr2,and the vr2 and vr3 variable regions were relatively conservative.Phylogenetic tree analysis showed that the two isolates shared the highest homology with SCAU11-XG strain.     

Detection and characterization of avian leukosis virus in Marek's disease vaccines

Avian leukosis virus (ALV) infection in chickens is known to induce increased mortality, tumors, delayed growth, and suboptimal egg production. Countries importing specified pathogen-free eggs, vaccines, and poultry breeding stock require freedom of infection or contamination with ALV in such products among other avian pathogens. Recently, ALV was found as a contaminant in a limited number of commercial poultry vaccines, even after routine quality assurance procedures cleared the vaccines for commercialization. The contaminated vaccines were promptly withdrawn from the market, and no direct detrimental effects were reported in poultry vaccinated with such vaccines. We describe herein the characterization in vitro of the contaminant viruses. All exogenous viruses detected in four vaccine lots belong to subgroup A of ALV based on cell receptor interaction, subgroup-specific polymerase chain reaction (PCR), envelope gene sequencing, and virus neutralization. A combination of thermal treatment and serial dilutions of the contaminated vaccines facilitated detection of contaminating ALVs in cell culture coupled with antigen-capture enzyme-linked immunosorbent assay. Subgroup-specific PCR readily detected ALV-A directly in the contaminated vaccines but not in naive vaccines or cell controls. Our methods are proposed as complementary procedures to the currently required complement fixation for avian leukosis test for detection of ALV in commercial poultry vaccines.     

禽呼肠孤病毒与禽白血病病毒双重RT-PCR检测方法的建立及应用

根椐GenBank中禽呼肠孤病毒(ARV)、禽白血病病毒(ALV)基因序列,设计2对引物,在建立鉴别各病毒单项RT-PCR技术的基础上,优化双重RT-PCR反应条件,建立2种病毒的双重RT-PCR。对同一样品中的ARV、ALV核酸模板进行双重RT-PCR扩增,结果可同时扩增ARV 485 bp、ALV 673 bp的特异性片段,而对其他5种禽病病原的PCR扩增结果均为阴性。敏感性试验结果表明,该双重RT-PCR技术能检出10 pg的ALV和10 pg的ARV模板。用31份临床病料对本研究双重RT-PCR技术和单项RT-PCR技术进行对比验证,结果显示,两者的总符合率为100%。结果表明建立的双重RT-PCR检测方法,具有特异、快速、准确的特点,可用于对这2种病毒的同时检测和鉴别诊断。     

鸡白血病的流行现状和防制对策

鸡白血病普遍存在于商品鸡群中,呈渐进性发生和持续的低死亡率,白血病毒感染鸡群,导致鸡群生产性能下降,尤其是产蛋率和蛋的品质下降。介绍了鸡白血病病毒和该病在鸡群中的流行现状,分析了病毒间的谱系关系和发病原因,指出鸡白血病与禽网状内皮组织增生症的鉴别诊断方法,科学地提出对鸡白血病的预防和控制措施。