黑山羊源大肠杆菌烈性噬菌体生物学特性及基因组分析

为分离到能有效裂解黑山羊源大肠杆菌的烈性噬菌体,本课题采集不同来源的新鲜粪便样品并经目的菌富集后,结合双层琼脂平板法进行噬菌体分离纯化,随后制作透射电镜样品进行其外形特征观察;对获得的噬菌体进行裂解谱、最佳感染复数和生长曲线分析;该噬菌体对温度、pH和紫外线的敏感性测定;该噬菌体全基因组测定与分析。结果表明,从黑山羊粪便中分离出的一株烈性噬菌体PLYYY01,在大肠杆菌菌苔形成1~2 mm的透亮噬菌斑;通过透射电镜观察,该噬菌体头部直径在60nm左右,尾部长度为100nm左右;该噬菌体有较宽的裂解谱(37.5%,6/16),可裂解多种血清型大肠杆菌;最佳感染复数是0.1;具有较强的繁殖活性,潜伏期约为30 min,爆发量约为95PFU/cell;在40℃~50℃、pH 5~10之间噬菌体的效价较为稳定,对紫外线不耐受;基因组测序组装结果显示:PLYYY01基因组长度为57025 bp,(G+C)mol%含量为44.74%,共编码71个蛋白,未发现抗生素耐药基因及毒力因子基因。     

H7N9流感病毒的动态

1采取生物安全措施应对H7N9流感病毒联合国粮农组织表示,中国政府需要采取强有力的生物安全措施应对出现的H7N9禽流感病毒。与其它流感病毒如H5N1高致病性禽流感病毒相比,这种新病毒在家禽中很难被发现,因为感染动物并没有患病的迹象。     

近期广西鸽新城疫发病情况与预防控制意见

近几年来,广西养鸽业得到快速发展。据不完全统计,目前广西饲养种鸽数量约为200万对。最大种鸽场饲养种鸽约6万对,目标建成规模为20万对的种鸽场。大部分鸽场是种鸽饲养量为1000对～6000对的小规模养鸽场。随着养鸽业不断向规模化、集约化发展,鸽病的发生与流行也日趋严重,其中鸽新城疫（又称鸽I型副粘病毒病,也叫鸽瘟）一直是危害养鸽业的主要传染病之一。     

部分种鸡场常用活疫苗中ALV的PCR检测

禽白血病病毒(Avian leukosis virus,ALV)既能通过种蛋垂直传播给后代,也能通过鸡之间直接接触发生水平传播,而使用污染了ALV的活疫苗也是一种常见的传播途径。本课题组应用PCR方法,对3个种鸡场2年来使用的包括由10家疫苗公司生产的11种类型共计18份活疫苗样品进行了ALV的检测。结果有两份样品的检测呈阳性(占11.12%),它们分别是鸡传染性支气管炎疫苗和鸡痘疫苗,病毒亚型的鉴定结果显示,它们分别属于ALV的J和A亚型,而B、C和D亚型均未从样品中检出。本试验的结果表明,目前部分种鸡场使用的活疫苗中存在J和A亚型ALV的污染。这提示我们,疫苗污染可能是目前ALV在鸡群中传播的重要途径之一,应引起种鸡场的重视。     

广西地方土鸡马立克氏病病毒和J亚群禽白血病病毒混合感染的报告

广西南宁某养殖场的广西土鸡群在60日龄开始陆续出现发病、死亡,105日龄送检时累计发病率20%,死亡200多只。通过病理组织学观察、PCR鉴定及病毒基因序列测定,证明土鸡群中存在马立克氏病病毒和J亚群禽白血病病毒的混合感染。     

三黄鸡临床血管瘤病例中分离出A亚群与J亚群禽白血病病毒

为了解禽白血病病毒在广西鸡群中流行情况,采用DF-1细胞接种、细胞培养上清p27抗原检测、PCR扩增,对临床血管瘤型禽白血病的三黄鸡病料进行了病毒分离,并对分离病毒gp85基因进行测序和序列比较。结果表明,从1只病鸡同时分离到了一株A亚群禽白血病病毒(ALV-A)与一株J亚群禽白血病病毒(ALV-J),分别命名为HG01-A株和HG01-J株。ALV-A gp85与7株A亚群氨基酸同源性为85.8%~87.5%,与A亚群美国株MQNCSU同源性最高为87.5%,与A亚群原型株RSA同源性为86.9%。而ALV-J gp85与7株毒株核酸序列同源性为84.0%~93.8%,与广东株XX2-08以及四川株SCSM01同源性最高为93.8%,与英国原型株HPRS103同源性为90.2%。进化分析进一步表明,HG01-A与各参考株亲缘关系较远,HG01-J与SCSM01亲缘关系最近。本研究首次从同一只广西三黄鸡中同时分离到ALV-A及ALV-J,进一步完善了我国地方品种鸡群中禽白血病的流行病学信息。     

广西主要地方优良品种鸡禽白血病的感染情况调查

禽白血病(avian lenkosis,AL)是由一种常见的反转录病毒禽白血病/肉瘤病毒群中的病毒引起,以在成年鸡中产生淋巴样肿瘤和产蛋量下降为主要特征[1]。近年来,禽白血病对养禽业的危害日益严重。据报道,作为全国地方家禽品种资源最     

广西地方品种鸡临床血管瘤型禽白血病的诊断

对2013年间广西3个地方品种鸡养殖公司发生的临床血管瘤型疑似禽白血病进行实验室诊断,本研究开展了临床病理观察、剖检变化和病毒的分离与鉴定3方面的工作。结果表明:1临床上,鸡表现出典型的血管瘤病症一般都发生在产蛋高峰期左右,血管瘤主要在胸腹部皮肤和脚趾处以血疱的形式出现;剖检病变主要见于肝脏,表现为肿大、坏死,有的表面出现大小不一的血疱;其次见于脾脏和腺胃,表现为肿大;也见于心、肺、胰、卵巢、胸腺和肠系膜等组织器官,多表现为肿大和坏死。2临床上表现出明显血管瘤病症的病鸡中,93.75%(15/16)能分离到ALV-J,6.25%(1/16)同时分离到ALV-A和ALV-J两个亚群。证实广西临床上表现出血管瘤的病鸡以ALV-J感染为主,且首次发现个别病鸡存在ALV-A和ALV-J的混合感染。     

广西凭祥斗鸡禽白血病病毒检测及分离株env基因分析

为了解广西凭祥市特有家禽品种斗鸡禽白血病病毒(ALV)的感染情况,采集了该市3个鸡场斗鸡的肛拭子、血清、血浆样品共344份,用禽白血病ELISA检测试剂盒进行检测。结果显示,斗鸡ALV感染情况严重,其中肛拭样品ALV-p27抗原阳性率高达39.13%,血清样品病毒分离阳性率为12.97%,ALV-J和ALV-A/B抗体阳性率分别为22.39%和7.46%;对从2只斗鸡获得的病毒分离株DJ-3-18和DJ-45进行病毒囊膜蛋白基因env的扩增、序列测定及比较分析,结果显示2株病毒的gp85基因与ALV-A亚群参考株之间氨基酸的同源性为88.2%~96.5%,gp37基因与ALV-A亚群参考株之间氨基酸的同源性为91.4%~98.0%,其中与台湾A亚群蛋鸡源分离株TW-3577的亲缘关系最近,而与ALV其他亚群毒株的同源性则较低。结果表明,首次获得的2株斗鸡源ALV分离株属A亚群。