牛羊两病的常规检疫方法及注意事项

牛羊“两病”通常是指牛羊的结核病和布鲁菌病。由于“两病”是人畜共患病,危害极大。为了有效控制“两病”的发生,应采取综合性措施,其中检疫是重要措施之一,如牛羊每年至少检疫2～3次,淘汰阳性牛羊;对幼畜在生后20～30d、100～120d、6月龄时各进行1次;新购入的牛羊也要进行检疫。1布鲁菌病的检疫1.1平板凝集试验(PAT)准备一块方形玻璃板,将每份被检血清按0.08,0.04,0.02,0.01mL的量分别加到玻璃板上,在上述被检血清中,分别加入布氏平板凝集抗原0.03mL,用牙签或火柴棍混匀,5～6min后判定。牛0.02mL血清出现“ ”以上凝集为阳性,0.04mL…     

健康猪只布氏桿菌凝集价增高三例分析

目前我国对猪布氏桿菌病的主要診断方法是試管凝集試驗。一般判定标准:在1∶50稀释度出現“++”号及其以上的凝集現象时,被检血清判定为阳性反应;在1∶25稀释度出現“++”号及其以上的凝集現象时,被检血清制定为疑似反应。但越来越多的病例使兽医工作者相信病猪不一定有凝集現象发生;而在1∶50稀释度出現“++”号及其以上的凝集現象时,是否即为病猪,則研究的文献尚少。根据作者4年来在广州市畜牧場对猪布氏桿菌病的观察研究,发現某些与本病有接触史的健康猪只,其凝集价有不同程度的增高。本文試以对此現象加     

兔瘟病的临床快速诊断方法

兔瘟病（RabbitsPlague）又叫兔病毒性出血症，它是由兔瘟病毒引起的一种兔的急性热性传染病，表１标准阳性反应及对照标准阳性反应HAHI空白对照标准阳性抗原＋标准阳性血清＋２．０％HRBCRP液＋标准阳性血清＋２．０％HRBCRP液＋标准阳性血清＋兔瘟抗血清＋２．０％HRBC０．９％NaCl＋２．０％HRBC不凝集－不凝集－凝集不凝集－传染性强，传播迅速，发病率和死亡率高，尤以青壮年兔多见，严重影响着养兔业的健康发展。本病虽然在实验室有许多诊断方法可供选用，但大多都需要一定的仪器设备和诊断试剂，条件苛刻，且费工费时，…     

乳胶凝集法诊断猪钩端螺旋体的研究

自赤峰不同地区中,小型养猪场,个体养猪户采集２０４头份育肥猪血清,１１０头份健康猪血清,用乳胶凝集试验诊断猪钩端螺旋体病,将生长良好的黄疸出血型钩端螺旋体培养物经离心,酸沉淀或过滤浓缩１００,经适当处理,制成致敏原,分别同待检血清,正常血清,生理盐水进行反应,以待检血清出现“”以上凝集,对照不凝集判为阳性,通过试验,凝集的阳性复合率为８３．９％￣９７．９％。     

固相补体结合反应及间接血凝试验对鼻疽马骡诊断的比较研究

以18匹鼻疽马的病理组织学变化为主要依据,结合常规补体结合反应(CFT)的检查结果,确定了间接血凝试验(IHA)的判定标准,即血清凝集1:800或以上呈现“++”为阳性,1:400呈现“++”为疑似,1:200以下凝集为阴性反应。进而为比较固相补体结合反应(SP—CFT)与IHA检测鼻疽的敏感性,以CFT作对照,对内蒙和吉林两省(区)的1244匹马骤血清进行了检测,CFT、SP—CFT和IHA的阳性率依次为10.8％、16.8％和7.3％,阴性率为84.8％、71.2％和85.4％。用这三种血清学反应检查供作对照的20匹健康马血清及14匹其它6种传染病血清,均未出现影响结果判定的类属反应。1244匹马骡血清中鼻疽菌素试验呈阳性反应的血清540匹份,三种血清学反应阳性率依次为15.9％、30.9％和3.2％,阴性率依次为77.4％、44.8％和35.9％。由上可见,在三种血清学反应中,不论对大面积的鼻疽疫区,还是对鼻疽菌素试验阳性(M~+)马群的检疫,SP—CFT均表现了最高的敏感性,至于IHA的检出率,则较SP—CFT低,但可用于鼻疽的早期诊断,以弥补在此期间补体结合性抗体尚未出现,补体结合反应不能检出的缺陷。     

O型口蹄疫病毒固相竞争ELISA抗体检测方法的建立

本研究建立了O型口蹄疫病毒固相竞争ELISA抗体检测方法,确立了O型口蹄疫病毒固相竞争ELISA抗体检测方法检测O型口蹄疫血清阴阳性判定标准：抗体效价大于或等于1：32时判为O型口蹄疫抗体阳性;1：16～1：32时判为O型口蹄疫抗体可疑。检测131份阴性血清、口蹄疫亚洲1型阳性血清和A型阳性血清,固相竞争ELISA方法和液相阻断ELISA方法的特异性分别是95．5％,84．7％。固相竞争ELISA方法检测口蹄疫亚洲1型、口蹄疫A型阳性血清时,无交叉反应,O型口蹄疫病毒感染牛、免疫牛和感染猪血清的阳性检出率均为100％,免疫猪检出率为86．7％。     

中草药防治母猪乳房炎与仔猪下痢的研究(续)

（接上期）２－５　“母仔康”能明显降低乳房炎乳汁的凝集度,改善乳品质２－５－１　ＬＭＴ液诊断方法对乳品质状况的检测结果　所采样经ＬＭＴ试剂诊断,有１０头份投药前乳房炎为阳性至强阳性。即＋＋～＃”符号,投药４８小时时（药中）乳汁阴转明显,仅有２份为＋＋与＋＋＋,３份为±;９６小时时（药后）乳汁阴转率为９０％,即剩那例强阳性（＃）转成阳性＋＋）,呈阴转趋势,仍需继续治疗,但已明显降低乳汁凝集度。阳性乳房炎乳汁用药后９０％的阴转率,表明母仔康确能降低乳房炎乳汁凝集度,改善乳汁品质。乳房炎乳汁是导致仔猪…     

布鲁氏病凝集反应阳性血清中“前带”现象的抑制试验

用做诊断布鲁氏病的标准阳性血清,以小动物进行生产,远不能满足我国大力发展畜牧业的需要;但用牛、羊等大动物制备的布鲁氏病阳性血清有的存在着“前凝集带阻滞”(简称前带)的现象,以致成为用大动物制造本血清难以克服的障碍。为此,我们做了一些抑制试验,现将试验结果简结     

检测猪伪狂犬病病毒gE抗体红细胞凝集试验的建立及应用

以纯化的抗人红细胞单链抗体(ScFv)—猪伪狂犬病病毒(PRV)gE蛋白双功能融合蛋白为抗原,建立了检测猪伪狂犬病毒gE抗体的红细胞凝集试验。利用方阵滴定试验筛选出最佳抗原工作浓度为55μg/mL,血清最佳稀释度为1∶20,作用时间15 min,与猪瘟(CSF)、猪细小病毒(PPV)、猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)、猪乙型脑炎(JE)、猪布氏杆菌病(Brucellosis)阳性血清和PRV gE缺失疫苗接种的猪免疫血清均不出现红细胞凝集现象,与PRV标准阳性血清反应出现肉眼可见的凝集圈。与美国进口的PRV抗体检测gE-ELISA诊断试剂盒检测结果比较,50份猪血清的阴、阳性检出符合率均为100%。红细胞凝集试验检测方法具有操作简便、敏感性和特异性较高的特点,可用于PRV野毒感染的快速筛查。     

重组N蛋白抗原检测PRRSV抗体ELISA的研究Ⅱ.试剂盒阴阳性临界值的测定及其与IDEXX公司试剂盒的比较

对临床上采集的899份猪血清样本。用以纯化的重组N蛋白为包被抗原建立的检测猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）抗体的间接ELISA进行检测．运用统计学方法摸清了检测结果的分布规律。并扣国外IDEXX公司PRRSV抗体检测试剂盒同时对460份血清样本进行检测。结果表明。2种方法的符合率为91．73％。利用TG—ROC软件确定了自制的ELISA酶标板（NP—ELISA）的临界值。并标定试剂盒的特异性扣敏感性均为92．6％。ELISA的结果判定标准是：当以血清样本L为标准参考阳性血清时，样品与阳性血清的比值（S／P）小于或等于0．4为阴性；S／P在0．4与0．5之间为可疑；S／P大于或等于0．5为阳性。与IDEXX公司PRRSV抗体检测试剂盒对临床样品的检测结果进行比较后，初步判定所建立的ELISA之所以出现较多的假阴性。可能是目前临床上出现了PRRSV欧洲型所致。     

鸡传染性支气管炎HA和HI试验方法的研究

用传染性支气管炎(IB)红细胞凝集抑制(HI)试验对SPF鸡血清、健康鸡血清、用SPF鸡制备的IBV标准阳性血清、感染鸡血清和自然发病鸡血清及野外样品测定结果证明,本法操作简便、特异性强、敏感性高、需时短、结果易判定。IBV HI抗体于感染后3周开始出现,然后持续上升,二个月后仍呈上升趋势.本法可定性或定量检测鸡IBV抗体,特别适用于现地诊断和免疫监测。     

鸽新城疫病毒的分离及其生物学特性测定

用ＳＰＦ鸡胚从疑似鸽新城疫（鸽ＮＤ）病鸽群中分离到一株病毒ＱＬ株,该病毒株能凝集鸡红细胞（ＲＢＣ）,这种凝集作用能被抗新城疫病毒（ＮＤＶ）阳性血清抑制;用抗ＮＤＶ单抗ＰＥＧ夹心ＥＬＩＳＡ测定分离株为阳性。分离株经肌肉注射能使鸽发病和死亡,出现与自然发病鸽一致的症状和病变,但肌注ＳＰＦ鸡只感染,不见临床症状。对该分离株作进一步生物学特性鉴定,按照国际上规定的ＮＤＶ毒力判定标准,测定了该毒株最低致死量致死鸡胚的平均死亡时间（ＭＤＴ）、１日龄雏鸡脑内接种致病指数（ＩＣＰＩ）和６周龄雏鸡静脉接种致病指数（ＩＶＰＩ）,结果ＭＤＴ为１０５小时、ＩＣＰＩ为１．３３、ＩＶＰＩ为１．０。试验结果表明本分离株为鸽新城疫病毒。     

鸭源新城疫病毒的分离鉴定

从病死肉鸭肝脏中分离到2株病毒(ZH1、ZH2),均能够凝集鸡、肉鸭、绵羊、山羊、猪、人、兔、牛等的红细胞,且这种血凝性可被NDV标准阳性血清所抑制.参照NDV毒力判定标准及其方法对分离毒株ZH1、ZH2进行了鸡胚最小致死量平均死亡时间(MDT)、鸡胚半数感染量(EID50)以及1日龄鸡脑内接种致病指数(ICPI)测定,结果ZH1、ZH2株的MDT为52 h和44 h,EID50为106.4/0.1mL和108.64/0.1mL,ICPI为1.93和1.975.表明这2株分离病毒均为NDV强毒株.     

鸭禽流感免疫抗体血凝检测及其应用

鸭是禽流感传播链中的一个重要环节,能否有效防控鸭禽流感的关键之一是使用科学的检测方法.目前,是参照禽流感血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验标准(GB/T18936-2003)[1],但是,鸭体内含有非特异性抑制因子,血清中的唾液酸残基会模拟红细胞受体,同红细胞受体竞争与流感病毒血凝素的结合,因而会导致非特异性抑制结果(假阳性)的出现,用鸡红细胞悬液检测水禽禽流感血清抗体时,常常存在非特异性凝集现象,出现前带和后带现象,有时能严重影响结果的判定.为此,本文采用不同种家禽的红细胞悬液做重复试验,探讨水禽血清的处理方法及不同种的家禽红细胞悬液对水禽禽流感血清抗体检测的影响, 在临床应用中,可为鸭禽流感免疫技术提供参考依据.     

微型平板凝集抑制法检测伪结核棒状杆菌

将伪结核棒状杆菌用含犊牛血清的平板培养后,刮取菌落,用营养肉汤稀释,经56℃30分钟灭活制备抗原。然后用已知标准血清、高免血清、待检阳性血清及阴性血清对比进行微型平板菌体凝集抑制试验。结果:标准血清、高免血清与待检阳性血清均抑制了菌体的凝集,呈现无圆形沉淀点,或仅有分散的絮状颗粒,即阳性反应;阴性血清不能抑制菌体的凝集,均呈现明显圆形成团的沉淀点即阴性反应,未出现非特异性即假阳性反应。本试验操作简便,敏感特异适用于山羊伪结核棒状杆菌病的诊断。     

猪伪狂犬病毒血清学调查及部分特性的研究

从山东某猪场疑似猪伪狂犬病死亡的仔猪大脑、扁桃体等组织中分离到一株病毒。该病毒接种家兔后，使家兔产生典型的奇痒症状，且能在鸡胚成纤维细胞（CEF）上增殖，并可产生典型的细胞病变（CPE）。CEF细胞接种该病毒后，进行DNA琼脂糖凝胶电泳时，呈现“梯状”条带，说明病毒感染CEF细胞后，使细胞产生“凋亡”现象。综合本病毒的各种特性，初步鉴定为伪狂犬病毒。应用伪狂犬乳胶凝集诊断试剂盒对来自山东6个猪场共100份血清进行了血清学调查。共检出阳性血清25份，血清阳性率达25％。     

猪伪狂犬病毒血清学调查及部分特性的研究

从山东某猪场疑似猪伪征犬病死亡的仔猪大脑、扁桃体等组织中分离到一株病毒。该病毒接种家兔后，使家兔产生典型的奇痒症状，且能在鸡胚成纤维细胞（CEF）上增殖，并可产生典型的细胞病变（CPE）。CEF细胞接种该病毒后，进行DNA琼脂糖凝胶电泳时，呈现“梯状”条带，说明病毒感染CEF细胞后，使细胞产生“凋亡”现象。综合本病毒的各种特性，初步鉴定为伪狂犬病毒。应用伪狂犬乳胶凝集诊断试剂盒对来自山东6个猪场共100份血清进行了血清学调查。共检出阳性血清25份，血清阳性率达25％。     

家畜伊氏锥虫病胶乳凝集试验中的几个问题的探讨

材料和方法一、材料1.被检血清标本:采自锥虫病疫区耕牛和7只实验感染兔。2.标准锥虫阳、阴性血清:锥虫阳性血清为感染家兔血清,其锥虫胶乳试验凝集价在1:160以上,琼扩或对流免疫电泳在1:8以上。阴性血清采自健康兔和非疫区健康牛。3.血吸虫阳性血清:采自动物实验感染牛,用间接血凝法和粪检法检测均为阳性。4.肝片吸虫阳性血清:采自实验感染牛和羊。5.焦虫阳性血清:有双芽焦虫感染、双     

鸡志贺氏菌凝集抗原及其标准血清的研制

利用分离鉴定的鸡鲍氏和鸡痢疾志贺氏菌,分别经细菌培养、灭活、浓度调整等方法研制诊断用鸡志贺氏菌凝集抗原,并用鸡志贺氏菌疫苗免疫清洁级小白鼠研制鸡志贺氏菌标准血清.结果显示,制备细菌抗原的最佳培养基是1%葡萄糖营养琼脂,抗原最佳灭活温度和时间为121℃和120 min,凝集抗原合适浓度为40亿/mL,最佳稀释液为pH 7.2的0.5%石炭酸生理盐水.制备的鸡鲍氏和鸡痢疾志贺氏菌阳性血清经效价测定分别可达8 log2和10 log2,阴性血清与鸡志贺氏菌凝集抗原作用无凝集反应发生.通过研究同时确定了平板凝集试验反应的合适温度为20～35℃,结果判定时间为3～5 min.研制的凝集抗原及其标准血清具有特异性强、稳定性好、使用方法简便、便于保存和检测结果准确可靠等优点,便于在基层生产单位推广应用.     

扬中县农村母猪布鲁氏杆菌病流行情况调查初报

布鲁氏杆菌病为人畜共患病,我县自1962年从乳牛中检出阳性牛以后,1982年我县又在全省畜禽流行病学调查中对农村母猪中进行了监测。经363头血样应用血清凝集试验试管法检出阳性血清9份,阳性率为2.47%。从而说明我县农村母猪群体中有布病的存在。为了进一步调查我县农村母猪群中布病流行的情况,自1983年起至1987年相继五年间对农村母猪群实施对该病的监测,现将监测结果初报如下:一、材料与方法1、监测对象:为农村饲养的生产母猪。2、方法:为试管凝集法。3、判定依据:根据“家畜布氏杆菌病试管凝集反应技术操作规程及判定标准”,凡检出阳性血清一律再用人医用诊断液复检,以复检结果阳性者为准,其判定标准不变。4、血样来源:各乡(镇)站兽医在各自承包范围内,按母猪数采血5-10头份,血清由县兽医站统一分离,保存供试。5、监测时间,为每年11～12月份进行。