分光光度法测定盐霉素的含量

研究了分光光度法测定盐霉素含量的方法.检测波长为528 nm,以95%乙醇为溶剂,4%香草醛溶液为显色剂,显色温度70～74 ℃,显色时间40 min.盐霉素浓度在40～280 u/mL范围内与吸光度呈线性关系,相关系数0.999 6(n=6),回收率在100.1%～100.8%(n=5);RSD在0.8%～1.2%.本法适用于制药厂盐霉素生产的中间体质量控制.     

测定盐霉素中间体效价的新方法一分光光度法

研究了分光光度法测定发酵液中盐霉素含量的方法。检测波长为520nm,以无水甲醇为溶剂,3%香草醛溶液为显色剂,显色温度50℃,显色时间15min,盐霉素浓度在20～120μ／mL范围内与吸光度呈线性关系,相关系数0．9999（n=6）,回收率为100．1％,RSD为0．519％（n=9）。     

高效液相色谱法测定阿奇霉素的含量

为了测定阿奇霉素的含量,试验采用高效液相色谱(HPLC)法,以Kromasil C_(18)为色谱柱(250.0 mm×4.6 mm,5.0μm),以0.067 mol/L磷酸二氢铵(三乙胺调p H值为6.5)︰乙腈=70︰30为流动相,流速为1.0 m L/min,用UV230+型紫外-可见波长检测器,检测波长为210 nm,用外标法定量。结果表明:阿奇霉素在1.4~3.4 mg/m L的浓度范围内线性关系良好(r=0.999 8,n=6);样品的平均回收率为100.20%,相对标准偏差(RSD)=0.38%(n=3);样品测定方法重现性的RSD=0.49%(n=6),说明该方法可用于阿奇霉素含量的测定。     

薄层层析－紫外分光光度法测定预混剂中的恩拉霉素

试验旨在建立薄层层析－紫外分光光度法测定预混剂中恩拉霉素的方法。使用硅胶GF254薄层板为固定相,正丁醇∶冰醋酸∶水(2∶1∶1)为展开剂,在紫外光灯(254 nm)下定位,样品中的恩拉霉素得到较好分离。在271 nm波长处对不同含量的恩拉霉素标品进行紫外检测,结果表明,恩拉霉素点样量在20~166 μg范围内与吸光度呈现良好的线性关系(r=0.9989),平均回收率为99.85%,RSD值为3.1%(n=9)。此法所测定的结果与高效液相色谱(HPLC)法所测定的结果基本一致。该方法简单、快捷、准确、分析量大,适用于预混剂中恩拉霉素的定量分析。     

鸡球虫中山分离株对7种抗球虫药的药敏试验

试验比较7种离子载体类抗球虫药对鸡球虫中山野外分离株的敏感性。试验分为9组,包括拉沙洛西钠(90mg/kg)、盐霉素(60mg/kg)、马杜霉素(5mg/kg)、莫能霉素(100mg/kg)、那拉霉素(70mg/kg)、敌球素(30mg/kg)和赛杜霉素(25mg/kg)7个用药组,感染不用药及不感染不用药2个对照组。每组选用15只2周龄本地黄鸡,从感染前1d开始喂药直到试验结束(感染后7d)。攻毒剂量为6万孢子化球虫卵囊。结果为拉沙洛西钠、敌球素、莫能霉素、那拉霉素、盐霉素、赛杜霉素和马杜霉素的抗球虫指数(ACI)分别是199、186、185、146、135.3、135和125;病变记分减少率(RLS)依次是拉沙洛西钠(100%)、敌球素(100%)、莫能霉素(80%)、那拉霉素(15%)、赛杜霉素(15%)、盐霉素(10%)和马杜拉霉素(5%)。结果表明:拉沙洛西钠、敌球素和莫能霉素对鸡球虫中山分离株属于敏感药物,盐霉素、国产马杜霉素、那拉霉素和赛杜霉素对鸡球虫中山分离株均不敏感。     

比色法测定硫酸新霉素溶液的含量

笔者利用氨基糖苷类抗生素药物与碱性酒石酸铜试液发生衍生化显色反应的原理,采用比色法测定硫酸新霉素溶液的含量。结果显示,药物浓度在2~12 mg/mL范围内与吸光度呈良好的线性关系,相关系数r=0.9985(n=6),平均回收率为99.5%,RSD为0.5%(n=4)。此方法操作简单、快捷,稳定性较好。     

盐霉素对鸡原代心肌细胞的毒性作用及其机制的初步研究

初步探讨盐霉素对鸡原代心肌细胞的毒性作用及其毒性机制。采用差速贴壁法结合化学纯化法分离鸡原代心肌细胞,应用免疫荧光法鉴定心肌细胞纯度,给予1、5、10、20、50μg·mL-1盐霉素处理后,观察心肌细胞形态,采用MTT法测定盐霉素对心肌细胞活性的影响;比色法检测心肌细胞乳酸脱氢酶(LDH)释放、肌酸激酶(CK)活性;流式细胞术分析盐霉素对心肌细胞凋亡及线粒体膜电位的影响;电子显微镜观察盐霉素对心肌细胞超微结构的影响;荧光显微镜观察盐霉素对心肌细胞氧化应激的影响;比色法测定盐霉素对心肌细胞Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9蛋白酶活性的影响;qRT-PCR检测Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9、细胞色素C(Cyt-C)、Bax及Bcl-2mRNA的转录水平。结果表明:分离所得鸡原代心肌细胞形态良好,纯度大于90%;盐霉素以显著的浓度-时间依赖性方式抑制心肌细胞生长并诱导细胞死亡;盐霉素导致心肌细胞LDH释放极显著增加(P0.01),细胞内CK酶活性增强,呈浓度依赖性(P0.01);盐霉素导致心肌细胞凋亡率极显著升高(P0.01),线粒体膜电位(ΔΨm)明显下降(P0.01);电子显微镜观察显示盐霉素导致心肌细胞线粒体严重肿胀、空泡化,嵴溶解甚至消失;盐霉素导致心肌细胞内活性氧(ROS)显著升高;细胞质Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9蛋白酶活性均极显著升高(P0.01);qRT-PCR结果表明凋亡相关基因Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9、Cyt-C及Bax mRNA转录上调,Bcl-2mRNA转录下调(P0.01)。盐霉素可以通过细胞凋亡引起鸡心肌细胞死亡,线粒体途径和死亡受体途径可能共同参与了盐霉素诱导的鸡心肌细胞凋亡。     

饲料中聚醚类抗生素的柱后衍生同时测定方法研究

采用高效液相色谱柱后衍生化法同时检测饲料中莫能菌素和盐霉素的含量。试验采用两个柱后衍生反应器,使莫能菌素和盐霉素在柱后分离后与衍生试剂1(硫酸)和衍生试剂2(香草醛)在不同的反应器中先后分别发生反应,经检测莫能菌素和盐霉素的保留时间分别在13min和17min左右。在饲料中添加莫能菌素和盐霉素浓度分别为20、60、120μg/mL时,莫能菌素的平均回收率为93.0%～97.7%,变异系数为1.05%～1.54%;盐霉素的平均回收率为94.0%～96.5%,变异系数为0.78%～1.01%。     

分光光度法测定莫能菌素含量

研究了分光光度法测定发酵液中莫能菌素含量的方法。检测波长560nm，以无水甲醇为溶剂，3％香草醛溶液为显色剂，显色温度45℃，显色时间20min，莫能菌素浓度在20～140u／mL范围内与吸光度呈线性关系，相关系数0．9996（n=7），回收率为100．2％，RSD为0．747％（n=9）。     

高效液相色谱法测定盐霉素预混剂中盐霉素A的含量

建立了测定盐霉素预混剂中盐霉素A含量的高效液相色谱分析方法。采用C18色谱柱,甲醇-水-冰醋酸(94︰6︰0.1)等度洗脱,甲醇-硫酸-香草醛(95︰2︰3)为衍生试剂,流速0.7 mL/min;衍生温度98 ℃;检测波长520 nm;进样量20 μL。结果表明,盐霉素A在0.4～0.6 mg/mL范围内线性关系良好（r2=0.9998）,平均回收率100.6%。该方法简便、准确、可行。     

盐酸林可霉素紫外分光光度测定方法的建立

以0.02 mol/L氯化钯溶液为参比液,采用紫外分光光度法在380 nm±1 nm波长处测定盐酸林可霉素注射液中林可霉素的含量.结果表明,林可霉素在50 μg/mL～250 μg/mL范围内,其吸光度与浓度呈良好的线性关系,相关系数r=0.999 9,平均回收率为99.5%,RSD为0.9%(n=5).该方法操作简便、快速,结果准确,适于作为生产企业中间产品的质量控制方法.     

鱼肉中微量氨的酚—次氯酸钠光度法测定

鱼肉中氨含量的检测可用于鱼肉新鲜度检验。在碱性条件下,以常温下NH3在亚硝基铁氰化钠的催化下与酚—次氯酸钠作用生成稳定的蓝色化合物,最大吸收波长为620nm,最适显色时间为20min,最适显色温度为37℃,相对标准偏差为1.5%(n=10),回收率在96.7%～101.5%之间。该方法具有简便、快速、相对准确等特点。     

高效液相色谱柱前衍生化法测定饲料中的盐霉素

以甲醇∶1 5 %醋酸水溶液 (90∶10 ,v/v)为流动相 ,2 ,4 二硝基苯肼 (DNP)为衍生剂 ,应用高效液相色谱柱前衍生化法 ,采用紫外检测方法对饲料中的盐霉素进行了测定。盐霉素标准品的保留时间为 8 99min ,饲料中盐霉素的保留时间为 8 91min。经测定盐霉素标准液的标准曲线回归方程与相关系数 ,其线性关系理想 ,重现性好。采用此方法测得的总回收率为 89 0 6% ,总变异系数为 1 73%。此方法的检测限为 1mg/kg。     

鸡肉中甲砜霉素和氟甲砜霉素残留的高效液相色谱法检测

试验将鸡肉样品制成匀浆,用乙酸乙酯提取,正己烷去脂后用乙酸乙酯反萃取,经固相萃取柱(SPE)净化,甲醇洗脱,采用HPLC进行检测。甲砜霉素和氟甲砜霉素在同时检测时的保留时间分别为7.30min和17.60min,测得甲砜霉素与氟甲砜霉素的检测限达10ng/g。在添加浓度为0.005～0.02mg/kg时,平均回收率在65.84%～81.18%之间,相对标准偏差(RSD)在5.6%～13.2%之间(n=5);甲砜霉素、氟甲砜霉素在0.01～1.0mg/L范围内有良好的线性关系。     

日粮不同NDF水平对辽宁绒山羊瘤胃挥发性脂肪酸浓度及其比例的影响

试验选择带有永久瘤胃瘘管的辽宁绒山羊羯羊9只,随机分为3组,每组3只,研究日粮NDF水平(59.5%、54.6%、49.69%)对绒山羊瘤胃挥发性脂肪酸浓度及比例的影响。结果表明:随着NDF水平的降低,乙酸浓度显著升高(P<0.05),丙酸浓度显著升高(P<0.05),乙酸比例显著降低(P<0.05),丙酸的比例显著升高(P<0.05)。丁酸浓度和丁酸的比例没有显著变化(P>0.05)。各种酸浓度及其比例与NDF水平有着比较好的线性回归关系:乙酸浓度=16.21-17.99NDF(n=9,R2=0.55,P<0.05),丙酸浓度=33.39-43.97NDF(n=9,R2=0.68,P<0.01),乙酸比例=51.77+51.61NDF(n=9,R2=0.52,P<0.05),丙酸比例=29.09-31.06NDF(n=9,R2=0.49,P<0.05)。绒山羊日粮NDF含量为50%左右时瘤胃的发酵效果最好。     

高效液相色谱法检测酸奶与奶酪中纳他霉素残留

目的:建立高效液相色谱法测定酸奶和奶酪中纳他霉素残留的快速检测方法。方法:样品经水:冰乙酸(体积比为40:5)溶剂提取,采用Agela C18色谱柱(5μm,4.6×250 mm)色谱柱,甲醇:水:乙酸=60:40:5(体积比)为流动相,302 nm检测波长,流速为1 mL/min,柱温采取30℃。结果:酸奶和奶酪中纳他霉素含量在0.5~100 mg/kg范围时与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 9),加标回收率90.3%~95.6%(n=7),相对标准偏差(RSD)1.01%。结论:该方法准确度高、重现性好的特点,特别是操作简便、快捷,可以作为企业生产监控的有效方法。     

梯度洗脱HPLC法同时测定4种解热镇痛类药物的含量

建立梯度洗脱HPLC法同时测定4种解热镇痛类药物的含量方法。采用十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以甲醇-0.05 mol/L醋酸铵溶液为流动相进行梯度洗脱,流速1.0 mL/min,柱温为30℃,检测波长254 nm。结果表明,在该色谱条件下,对乙酰氨基酚、安乃近、安替比林、氨基比林分离良好;对乙酰氨基酚在50～500μg/mL范围内线性良好,R=0.999 8,平均回收率为99.2%(n=9),RSD为0.6%;安乃近在10～250μg/mL范围内线性良好,R=0.999 8,平均回收率为100.6%(n=9),RSD为0.8%;安替比林在10～100μg/mL范围内线性良好,R=0.999 6,平均回收率为99.4%(n=9),RSD为1.0%;氨基比林在10～250μg/mL范围内线性良好,R=0.999 7,平均回收率为98.9%(n=9),RSD为0.8%。本测定方法操作简便,结果准确、可靠,可用于同时测定以上4种解热镇痛类药物的含量。     

隐孢子虫感染奶牛的卵囊排出规律

对26 头自然感染隐孢子虫奶牛的卵囊排出情况作了连续21 个月的观察。结果表明,阳性犊牛(n =12) 转阴率最高,为50.00% (均为感染强度 或者);阳性成母牛(n = 9) 转阴率次之,为11.11% ;阳性育成牛(n= 5) 转阴率为0.00% 。阳性奶牛中,高强度感染(或)者多为长期带虫,持续从粪便中排出卵囊。     

RP-HPLC法测定健胃散中枸橼酸含量

建立RP-HPLC法测定健胃散中枸橼酸含量的方法。用十八烷基键合硅胶柱分离枸橼酸,以0.5%磷酸二氢铵溶液(用磷酸调pH值至3.0)为流动相,检测波长210 nm。枸橼酸在1.0-15.0μg(r=0.999 9,n=6)范围内呈线性关系,线性方程为Y=67.88X+1.577(r=0.9999,n=6);平均回收率为97.75%,RSD为1.62%(n=6)。该方法简便、快速,可用于健胃散中枸橼酸含量测定。     

牛奶中吡利霉素残留检测高效液相色谱-串联质谱法研究

建立了牛奶中吡利霉素残留检测的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法。液相色谱条件为:色谱柱为Waters XBridge C18柱(150 mm×2.1 mm,5μm),流动相为乙腈-0.01mol/L乙酸铵溶液(30∶70,V/V),柱温为30℃,流速为0.2 mL/min,进样量为10μL。质谱条件为:电喷雾离子源(ESI ),多反应监测(MRM)方式进行采集;监测离子质荷比(m/z)为411.5>112.0,411.5>363.4。以吡利霉素的同分异构体异吡利霉素作内标,内标法定量。结果表明:吡利霉素的线性范围为20~400 ng/mL,相关系数R2=0.999 9;方法检测限为2 ng/mL,定量限为5ng/mL;从50、100和150 ng/mL三个添加浓度检测结果可以看出,方法的平均回收率为90.4%~104.3%(n=6),批内、批间RSD均小于5%。