O型口蹄疫抗体金标检测试纸条判定标准的确立

本试验旨在迅速、准确检测口蹄疫阴性血清和阳性血清,确立O型口蹄疫抗体金标检测试纸条的判定标准。通过3批次O型口蹄疫抗体金标检测试纸条,对180份猪、牛、羊口蹄疫阴性血清,197份猪、牛O型口蹄疫弱阳性血清,317份猪、牛、羊O型口蹄疫阳性血清,223份牛Asia 1、A型口蹄疫阳性血清,600份田间血清样品进行检测,同时用O型口蹄疫液相阻断ELISA和O型口蹄疫正向间接血凝2种方法检测相同的血清样品。对3种方法检测的结果进行分析,并且将试纸条的检测线和质控线的显色情况与O型口蹄疫液相阻断ELISA的抗体滴度相比较。确立了试纸条的诊断标准:试纸条抗体滴度1∶2-为口蹄疫抗体阴性;试纸条抗体滴度1∶8+为O型口蹄疫阳性血清。根据试纸条的显色结果与液相阻断ELISA的结果的关系,绘制了比色卡。试纸条的判定标准检测血清结果与液相阻断ELISA和正向间接血凝结果分别进行统计学分析,试纸条与液相阻断ELISA和正向间接血凝相关性分别为y=1.142x+0.7421,y=1.1845x+0.8623;相关系数(r)分别为0.9221和0.9033。结果显示,O型口蹄疫抗体金标检测试纸条的判定标准的确立和比色卡的绘制,实现半定量分析,更加迅速、准确,适于实验室、基层兽医站和养殖场使用。     

两种不同方法对猪瘟免疫效果评估对比试验

通过正向间接血凝试验和酶联免疫吸附试验（阻断ELISA）对3个规模化猪场提供的350份血清样品进行猪瘟免疫效果平行对比检测，结果：A猪场120份，正向间接血凝试验检测免疫合格为95份，免疫合格率为79.2%；阻断ELISA检测免疫合格为92份，免疫合格率76.7%。B猪场120份，正向间接血凝试验检测免疫合格为108份，免疫合格率为90.0%；阻断ELISA检测免疫合格为104份，免疫合格率为86.7%。C猪场110份，正向间接血凝试验检测免疫合格为58份，免疫合格率为52.7%；阻断ELISA检测免疫合格为55份，免疫合格率为50.0%。     

正向间接血凝试验(IHA)和液相阻断酶联免疫吸附试验(LPB-ELISA)检测O型口蹄疫免疫抗体的对比

本试验采用正向间接血凝试验(IHA)和液相阻断酶联免疫吸附试验(LPB-ELISA)两种方法对经过口蹄疫O型免疫的80份猪血清、60份牛血清、50份羊血清进行了O型口蹄疫免疫抗体检测的对比试验。IHA试验猪合格80份,合格率100%;牛合格60份,合格率100%;羊合格50份,合格率100%;总体合格率100%。LPB-ELISA试验猪合格75份,合格率93.75%。牛合格60份,合格率100%;羊合格47份,合格率94%;总体合格率95.79%。试验结果表明,IHA方法检测口蹄疫O型免疫抗体合格率比LPB-ELISA方法高,两者符合率95.79%,具体哪种方法更准确,还有待进一步研究。     

山东省某奶牛场布病与口蹄疫血清抗体检测及分析

从山东省某奶牛场全群采集血清148份,采用虎红平板凝集试验（RBT）、试管凝集试验（SAT）、ELISA试验进行布病抗体检测;应用口蹄疫A型、亚洲I型、O型液相阻断ELISA检测试剂盒分别检测3个血清型的口蹄疫抗体。结果显示,牛布氏杆菌抗体阳性16份,阳性率高达10．81％;口蹄疫A型抗体阳性74份,合格率50％,亚洲Ⅰ抗体阳性133份,合格率90％,口蹄疫0型抗体阳性133份,合格率90％。针对血清学检测结果,制定相应防控措施,以期降低牛布病与口蹄疫的发病风险。     

不同方法检测猪O型口蹄疫疫苗抗体效价与攻毒保护相关性研究

为评价不同检测方法检测的口蹄疫疫苗抗体效价与免疫保护率的相关性,使用O型液相阻断ELISA、正向间接血凝试验、VP1结构蛋白抗体ELISA三种检测方法对免疫不同类型O型口蹄疫疫苗的60头猪进行血清抗体跟踪测定,免疫21 d后,分别用OZK/93和O/(XJ/10-11/MYA/98)毒株进行攻毒保护实验.数据统计和分析结果显示,0型液相阻断ELISA试验测定的抗体效价与攻毒保护率存在着极显著的正相关性(P＜0.01),相关系数为0.75;正向间接血凝试验测定的抗体效价以及VP1结构蛋白抗体ELISA法测定的S/P值与攻毒保护率之间均不存在线性相关关系(P＞0.05).试验表明,O型液相阻断ELISA抗体检测方法可作为田间猪O型口蹄疫疫苗免疫效果的评价方法.     

猪O型口蹄疫3种抗体检测方法的比较

用液相阻断ELISA、正向间接血凝试验、VP1结构蛋白ELISA3种抗体检测方法同时检测来自全国10个省25个规模猪场、18个屠宰场及散养户的937份猪血清中的O型口蹄疫抗体。结果表明,这3种方法检测的抗体阳性率分别为75.9%、81.8%和62%。与液相阻断ELISA相比,正向间接血凝试验比VP1结构蛋白ELISA的符合率高,前者的敏感性为94.9%,特异性为59.3%,后者的敏感性为75.2%,特异性为79.6%。研究为猪O型口蹄疫免疫抗体监测工作的实施提供了较好的参考。     

间接血凝试验在家畜口蹄疫免疫抗体检测中的应用

为了节省IHA（间接血凝试验）血凝抗原,扩大家畜O型口蹄疫免疫抗体检测数量,在不影响检测效果（合格率）的基础上,探索和改进原正向间接血凝试验检测方法。试验分别用口蹄疫O型-Asia 1型二价灭活苗和猪O型口蹄疫苗对天水地区几个养殖场的家畜进行了免疫注射,免疫后（牛免疫21 d、猪免疫28 d）随机抽样采血,常规分离血清,采用简化后的正向间接血凝试验进行牛和猪口蹄疫O型免疫抗体检测试验。结果表明：免疫合格率分别达到97.5%和92.5%;改进后的IHA既加快了操作速度、节省诊断抗原,又降低了检测成本。在家畜O型口蹄疫检测工作中具有推广应用价值。     

四种试剂盒检测猪口蹄疫O型合成肽疫苗抗体的对比试验

使用国产的4种猪口蹄疫病毒VP1结构蛋白抗体ELISA诊断试剂盒(VP1-ELISA)、猪口蹄疫O型液相阻断ELISA检测试剂盒(LB-ELISA)、猪口蹄疫正向间接血凝试剂盒、猪O型口蹄疫病毒ELISA抗体检测试剂盒(O-ELISA)同时检测猪口蹄疫O型合成肽疫苗免疫后的50份血清样品,阳性率分别为98.0%、94.0%、54.0%、90.0%。同时使用农业部规定的3种试剂盒分别检测20份血清样品的抗体滴度发现,VP1-ELISA试剂盒和LB-ELISA试剂盒阳性符合率为95%,平均抗体滴度相差0.7,与IHA试剂盒符合率为55%,平均抗体滴度相差3.8,故LB-ELISA试剂盒可以用来评价合成肽疫苗免疫的抗体,而IHA试剂盒不能用来检测合成肽疫苗免疫的抗体。     

比较3种间接ELISA试验检测口蹄疫感染抗体的研究

将3种检测口蹄疫非结构蛋白抗体的间接ELISA试验进行了比较。这3种间接ELISA试验检测田间血清样品的最低符合率为96％，最高符合率达98％：有2种间接ELISA试验可以检测到感染口蹄疫第10天后血清中的口蹄疫感染抗体．有1种间接ELISA试验可以检测到感染口蹄疫第14天后血清中的口蹄疫感染抗体；这3种间接ELISA试验检测12份已知口蹄疫阳性血清的试验结果吻合。研究表明．这3种间接ELISA试验方法对于检测口蹄疫感染抗体具有较好的特异性．其中猪口蹄疫3A蛋白间接ELISA诊断试剂盒在灵敏性、特异性和符合率方面更优于另外2种试剂盒。     

两种不同方法对猪瘟免疫效果评估对比试验

通过正向间接血凝试验和酶联免疫吸附试验(阻断ELISA)对3个规模化猪场提供的66份血清样品进行猪瘟免疫效果平行对比检测。结果:66份血清样品用正向间接血凝试验检测免疫合格为65份,免疫合格率为98%;阻断ELISA法检测免疫合格为66份,免疫合格率为100%。     

猪瘟苗与猪蓝耳苗混合免疫的效果报告

本试验主要研究猪瘟、猪蓝耳病弱毒疫苗等量混合注射后再注射猪口蹄疫苗的免疫效果,结果表明,用这种方式免疫后,猪瘟、猪蓝耳病的抗体合格率均超过70%的标准,适用于春秋季集中免疫,而口蹄疫抗体效价则因疫苗不同而差异较大,合成肽苗明显好于O型灭活苗。     

2011-2015年安顺市家畜口蹄疫免疫效果调查分析

为了解安顺市近5年家畜口蹄疫免疫效果,采用VP1结构蛋白抗体ELISA及液相阻断 ELISA方法对全市家畜口蹄疫免疫血清进行免疫抗体监测。结果表明：2012、2013年猪O型口蹄疫合成肽疫苗抗体检测合格率极显著下降( P<0.01),2012年猪O型口蹄疫佐剂灭活疫苗及牛O型口蹄疫－亚洲Ⅰ型双价苗抗体检测合格率极显著下降( P<0.01);羊O型口蹄疫－亚洲Ⅰ型双价苗抗体检测合格率总体呈逐年上升趋势( P<0.01),猪O型口蹄疫合成肽疫苗比猪O型口蹄疫佐剂灭活疫苗保护率高。     

O型口蹄疫疫苗免疫家畜抗体水平的检测

准确监测是防控口蹄疫的重要环节。采集某地区乡镇规模化养殖场及散养户的牛、羊、猪血清,采用正向间接血凝试验进行O型口蹄疫疫苗免疫抗体水平的检测。结果显示,该地区牛、羊的口蹄疫疫苗免疫合格率平均为76%,猪的口蹄疫疫苗免疫合格率平均为60％;规模化养殖场较个体散养户免疫效果好;牛口蹄疫O型灭活苗的免疫效果好于牛口蹄疫Asia I-O型双价灭活疫苗的免疫效果。     

贵州省猪弓形虫病的血清学调查

为全面了解贵州省猪弓形虫感染情况,对采自9个市（州、地）264个养猪场（户）的2 906份血清用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测猪弓形虫抗体,总体阳性率为65.83%,变化范围为27.88%~85.42%。采集65份猪血清做ELISA和间接血凝试验（indirect heamagglutination assay,IHA）比较测定,两种方法总体符合率为58.46%。IHA方法补充检测177份猪血清,弓形虫抗体阳性率为27.68%。血清学调查结果与国内部分省（市）报道相符。     

西藏牦牛O型、AsiaⅠ型口蹄疫疫苗免疫抗体效价分析

为调查口蹄疫疫苗对西藏牦牛的免疫保护情况,应用口蹄疫液相阻断ELISA方法对随机选取的西藏五区一市844头牦牛的血清进行O型、AsiaⅠ型口蹄疫抗体水平检测。结果显示,西藏地区牦牛口蹄疫O型、AsiaⅠ型疫苗抗体具有50%以上保护力的比例分别为83.44%、71%,口蹄疫疫苗免疫状况良好,但西藏同一地区不同县、市的牦牛口蹄疫疫苗免疫情况存在较大差异。     

羊口蹄疫免疫抗体效价高低与免疫时间的关系的试验

根据防制工作需要,在麦积区党川乡的五个羊场进行了绵羊Asia I-O型口蹄疫的区域预防免疫试验。通过监测免疫抗体水平,评价口蹄疫Asia I-O型双价灭活疫苗对绵羊的免疫效果,结果表明,新生羔羊首次免疫后要加强免疫,综合分析认为首次免疫后30d进行加强免疫是合理的。成年羊在有免疫抗体的情况下,接种Asia I-O双价疫苗后,抗体上升,有效保护期可达150d。免疫后150d（5个月）,O型免疫抗体合格率为71.54%,为消除免疫空白期,间隔135d再进行免疫是科学的,根据监测结果分析认为成年羊1年2～3次接种双价疫苗是可行的。     

2019—2021年伊吾县牛羊口蹄疫免疫抗体监测与分析

为掌握伊吾县牛羊口蹄疫免疫抗体水平,采用液相阻断ELISA抗体检测(LPB-ELISA)方法,收集6个乡镇2019—2021年抽检春秋两季牛1258头、羊2496只,进行时间、地域分布描述。实验显示,口蹄疫A型总体合格率90.86%、90.91%,O型口蹄疫免疫抗体总体合格率94.12%、94.03%,免疫抗体效价大于70%。不同区域前山乡口蹄疫整体免疫水平最高,吐葫芦乡牛A型口蹄疫免疫抗体较低仅为74.67%。结果表明,全县牛羊口蹄疫免疫抗体检测效果整体良好,部分乡镇免疫较低。需做好基层牛羊口蹄疫免疫调研,查找原因,提出了今后的工作方向,加强对防疫员开展从疫苗保存、免疫部位选择、免疫剂量技术指导,特别是动物检疫站监管,为伊吾县畜牧业高质量健康发展提供依据。     

猪弓形虫血清学检测方法比较

采用弓形虫间接血凝试验（IHA）和弓形虫IgG抗体ELISA两种方法检测来自宁夏区内16个规模场61个散养户的510份猪血清。结果显示,两种方法存在关联性,前者阳性率为19.22%,后者阳性率为22.94%。表明宁夏区内不同类别的养猪场户存在弓形虫病的感染,此外,ELISA方法检测弓形虫抗体检出率高于间接血凝试验。     

犬细小病毒抗体间接ELISA检测方法的建立

利用本实验室建立的昆虫细胞/杆状病毒表达系统表达犬细小病毒病毒样颗粒（CPV-VLPs）,采用硫酸铵沉淀、蔗糖密度梯度离心对表达的CPV-VLPs进行纯化,用电子显微镜、SDS-PAGE及Western-blotting方法检测纯化效果。以纯化的CPV-VLPs作为包被抗原建立CPV间接ELISA检测方法,对各反应条件进行优化并分析其特异性、敏感性、重复性。结果显示,CPV-VLPs经过纯化后纯度可达到95%以上;优化的ELISA最佳工作条件为：纯化抗原包被浓度为5.0mg/L,4℃包被过夜;1%BSA,37℃封闭2h;待检血清1∶40稀释,37℃孵育1.5h;HRP标记的酶标二抗1∶20 000稀释,37℃孵育1h;TMB室温避光显色30min;确定的血清阴性阳性临界值D450nm值为0.264。该方法可特异性检测犬细小病毒阳性血清,与犬瘟热、犬传染性肝炎、犬冠状病毒病、狂犬病阳性血清均不发生反应。该方法的敏感性为1∶640,批内重复试验变异系数小于6%,批间重复试验变异系数小于8%。42份临床血清样本的检测结果表明,与血凝抑制试验的符合率为90.48%。     

正安县山羊主要疫病血清抗体检测报告

为了解正安县山羊主要疫病的发展趋势,通过虎红平板凝集试验、正向间接血凝试验、酶联免疫吸附试验等方法对正安县引进山羊进行布鲁氏杆菌病、O型口蹄疫、AsiaI型口蹄疫、山羊传染性胸膜肺炎、山羊痘等主要疫病血清抗体的检测。结果表明,O型口蹄疫、AsiaI型口蹄疫和山羊痘免疫抗体阳性率分别为79．42％、81．18％和99．58％,未免疫的布鲁氏杆菌病、羊传染性胸膜肺炎的丝状支原体山羊亚种和绵羊肺炎支原体未免疫抗体阳性率分别为0％、0％和3．81％。监测结果为山羊健康的引进、培育和扩繁提供了一些基础数据,对指导养羊生产有一定的意义。