MB22木聚糖酶发酵条件的研究

通过因素轮换试验和正交试验,对MB22菌产木聚糖酶的培养基配方和发酵条件进行了研究。结果显示最佳培养基组成是:以玉米芯粉和麸皮为碳源,麸皮120g/l,玉米芯280g/l,(NH4)2SO44g/l,CaCO31.5g/l,Tween80,2.0g/l,MgSO4·7H2O1.5g/l;最佳发酵条件为:起始pH5.0,摇床培养温度30℃,转速160r/min,振荡培养84h。在最佳发酵条件下,MB22菌的最高产酶活力可达898.23U/ml。虽然与一些高产菌株相比该菌株的产酶能力还有待于进一步提高,但该试验结果为进一步进行微生物生产木聚糖酶的研究提供了理论依据。     

玉米芯生产单细胞蛋白研究玉米芯生产SCP的水解工艺优化

为使Candida boidinii No.2201 的诱变株Y- 108 有效地利用玉米芯水解液生产SCP,本文报道了对玉米芯酸水解工艺的优化。结果表明适宜的酸水解条件为1∶8 的料水比,1-5 % 的硫酸,在120 ℃的温度下直接水解3h,其还原糖得率高达43 % 左右,菌体产量平均在23 g/L。     

鸭蛋壳膜双酶水解提取黏多糖的工艺研究

试验以鸭蛋壳膜为原料,采用双酶水解的方法水解并提取黏多糖。通过二次回归正交旋转组合试验探索了双酶水解的酶用量、双酶比例、总水解时间3个因素对黏多糖得率的影响,得到最佳条件为:碱性蛋白酶与胰蛋白酶比例为0.10678,水解总时间为15.364 h,酶总用量为66 820 U/g。在此条件下进行验证试验,D-葡萄糖醛酸得率为6.75 mg/g,与理论极值(6.90 mg/g)接近。     

高产纤维分解酶黑曲霉诱变选育与发酵条件优化

本试验旨在研究高产纤维分解酶黑曲霉诱变选育与发酵条件优化。通过对黑曲霉X1诱变选育(紫外、硫酸二乙酯、紫外-硫酸二乙酯复合诱变),获得产纤维分解酶能力强的突变菌黑曲霉,并对其产酶发酵条件和水解秸秆能力进行研究。结果表明,黑曲霉X1经紫外、硫酸二乙酯及紫外-硫酸二乙酯复合诱变,筛选出1株产酶能力高的突变菌黑曲霉X1U4-1;与原菌相比,突变菌滤纸酶活性提高了66.7%,β-葡萄糖苷酶活性提高了22.3%,木聚糖酶活性提高了3.8%,还原糖含量(12 h)提高了6.8%。黑曲霉X1U4-1最适发酵产酶条件为发酵时间72 h,玉米芯∶麸皮=3∶7,接种量1.2 mL,硫酸铵浓度4%;在此条件下,滤纸酶活性达到0.77 U/g,纤维素酶活性达到93.80 U/g,木聚糖酶活性达到9 383.18 U/g。本研究表明,采用紫外-硫酸二乙酯复合诱变可有效改善黑曲霉产酶性能和水解秸秆能力。     

玉米芯水解液生产酵母蛋白的研究

我国玉米产量非常大,副产物玉米芯中富含纤维素、半纤维素、木质素[1],其水解液中含大量戊糖(主要是木糖)和六碳糖。迄今大量玉米芯仍作为废弃物燃烧掉,不仅浪费了木质素资源,其烟尘还造成了二次污染[2]。利用玉米芯水解液生产酵母蛋白,既解决了环境问题,又能变废为宝,为木质素资源的利用开辟了新的途径。为此,本实验利用能同化木糖和六碳糖的酵母菌株Y-2.05对玉米芯水解液生产酵母进行工艺研究。1材料与方法1.1材料原料:玉米芯,市场采购;菌种:酵母Y-2.05,本实验室提供。1.2培养基斜面培养基:木糖20g/l、酵母膏10g/l、蛋白胨10g/l、pH值5.…     

碳源和氮源对黑曲霉产木聚糖酶的影响

研究了碳源、氮源以及其它因子对黑曲霉(Aspergillusniger)A3菌株产木聚糖酶的影响。结果表明,当迟效碳源为玉米芯70g/l、速效碳源为葡萄糖10g/l,氮源为NaNO33g/l和(NH4)2SO43g/l,麸皮5g/l,用无氮的Mandels无机盐溶液配制,起始pH值5.5～6.0,并添加中和剂CaCO3调控发酵pH值,250ml三角瓶装液量为30ml时,黑曲霉A3液体发酵酶活力达405.6IU/ml。采用玉米芯代替半纤维素作为主要碳源,可以大大降低生产成本,减少环境污染,有利于工业化生产。     

双酶分步水解制备棉籽多肽工艺条件优化

为高效制备棉籽多肽,采用Alcalase酶和Flavourzyme酶对棉籽蛋白进行双酶分步水解.在前期单因素试验的基础上,通过Plackett-Burrman设计对影响其多肽得率的相关因素进行评估并筛选出具有显著效应的3个因素,然后通过三因素三水平的 Box-Behnken 响应面分析法确定双酶分步水解棉籽蛋白的最优操作条件为:底物浓度(w/v)8.36%,先用Alcalase 酶在温度59.9℃、pH值8.0、酶用量25000 U/g的条件下水解150 min,再用Flavourzyme酶在温度50℃、pH值6.0、酶用量27430 U/g的条件下水解120 min,多肽得率可达到65.07%.     

饲料原料为底物一种木聚糖酶体外酶解的方法

为了评价几种单一酶、复合酶对饲料原料的水解效果,进行了体外酶解试验。共采用2种单一酶制剂（木聚糖酶）：酶制剂1号、2号;4种复合酶制剂：酶制剂3、4、5、6号。预试验显示上述酶有基本相似的最适水解反应参数：料水比为1：10、pH 5.5、温度37℃和时间5小时。在此参数下,研究添加木聚糖添加量为10U/g饲料原料、50U/g饲料原料、100U/g饲料原料三个浓度梯度进行体外酶解。实验结果显示：以还原糖增长率为指标,复合酶酶解效果比单一酶制剂好;复合酶中酶制剂5号酶解效果最好。     

基于羧酸酯酶降解伏马毒素研究

初步探索了一种羧酸酯酶对伏马毒素B1(FB1)的降解规律。结果表明,该酶具有较强的pH值和温度适应性,最适反应pH值为8.0,最适反应温度为30℃。较低的酶浓度(1 U/l)下反应1 d,有36.91%的FB1残留;较高的酶浓度(100 U/l)下反应3 h,FB1能被完全转化成水解型伏马毒素B1(HFB1)。当FB1浓度低于50μg/ml时,降解速率随底物浓度的增加而增加,表现为一级反应;高于50μg/ml时,降解速率基本保持不变,表现为零级反应。最大降解速率Vmax为0.148μmol/(l·min),米氏常数Km为33.2μmol/l。该酶能够将玉米粉中的FB1降解,具有开发应用前景。     

响应面法优化β-甘露聚糖酶发酵培养基的研究

研究采用响应面法对路氏肠杆菌(Enterobacter ludwigii MY271)液体发酵产β-甘露聚糖酶的培养基进行优化。在前期单因素试验对培养条件及培养基优化的基础上,利用Plackett-Burman试验设计筛选出影响产酶的3个显著性因素:魔芋粉、Na2HPO4和Mg SO4。在此基础上,运用最陡爬坡试验找到中心复合试验的中心点,然后研究不显著因素的最低添加量来降低生产成本,最后利用中心复合设计确定显著性因素之间的交互作用及最佳组成。结果表明,魔芋粉14 g/l、蛋白胨18 g/l、Na2HPO4 0.7 g/l、KH2PO4 0.5 g/l、Zn SO4 0.15 g/l、Mg SO4 0.01 g/l,β-甘露聚糖酶酶活可达到62.76 U/ml,与模型预测值相近,且与单因素优化后的酶活(30.02 U/ml)相比,提高了109.06%。通过响应面法优化培养基组分,酶活得到了显著提高,为该酶制剂的大规模生产奠定了基础。     

稀硫酸预处理王草的研究

本研究采用稀硫酸对热研4号王草进行预处理,结合3,5-二硝基水杨酸法测定水解液中还原糖含量的方法,对稀硫酸浓度(v/v)、固液比(g/mL)、水解温度、水解时间和不同粒径5个因素进行单因素实验分析,在单因素试验的基础上通过二次回归正交旋转组合设计进行工艺参数优化.实验结果表明,最佳预处理条件,水解温度为117℃,水解时...     

紫菀有效成分分析及生物碱的提取与体外抑菌研究

采用试管法和圆形滤纸层析法分析鉴定了紫菀的化学成分,结果表明,紫菀主要含有生物碱、有机酸、黄酮类、多糖、酚类、鞣质、植物三萜和挥发油等。用醇类溶剂提取法从300 g生药中提取总生物碱0.4520 g,得率为0.1506%。用试管稀释法和纸片法对紫菀乙醇提取物和生物碱提取物进行了体外抑菌效果试验,结果表明,紫菀乙醇提取物对金黄色葡萄球菌、猪巴氏杆菌、大肠杆菌、链球菌和沙门氏杆菌都有较强的抑菌作用,其抑菌圈直径分别为18.20±1.30 mm、17.00±2.55 mm、12.40±2.07 mm、14.60±1.82 mm、16.00±4.36 mm;最低抑菌浓度分别为0.80 g/m l、0.05 g/m l、0.50 g/m l、0.20 g/m l和0.20 g/m l;紫菀生物碱提取物对金黄色葡萄球菌、猪巴氏杆菌、大肠杆菌、链球菌和沙门氏杆菌的最低抑菌浓度分别为4 mg/m l、2 mg/m l、6 mg/m l、4 mg/m l和4 mg/m l。     

双酶联合酶解雄蚕蛾蛋白制备活性肽的工艺条件优化

建立并优化以雄蚕蛾蛋白粉为原料酶解制备活性肽的工艺技术,有助于研发具有功能活性的雄蚕蛾保健产品。首先以雄蚕蛾蛋白的水解度和肽得率为考核目标,对酶解工艺中的酶解液p H、反应温度、反应时间、酶种类及其配比、料液质量浓度及酶用量等因素进行单因素试验。然后采用Box-Benhnken中心组合试验设计法对酶解条件进行优化,建立p H、温度、时间、料液质量浓度等4个因素的酶解效率预测回归模型,并使用Design-Expert 8.0软件对数据做回归分析,验证试验结果提示建立的雄蚕蛾蛋白酶解效率预测回归模型对实测数据有较好的拟合性。最终确定以Alcalase蛋白酶和丹尼斯克碱性蛋白酶对雄蚕蛾蛋白粉进行联合酶解的最佳工艺条件为:酶解液p H 9.5,反应温度55℃,反应时间130 min,料液质量浓度70 g/L。在此优化工艺条件下,雄蚕蛾蛋白粉的水解度为27.32%,肽得率为50.43%,酶解效率综合值为40.47%。     

木聚糖酶固态发酵工艺及酶学特性研究

筛选出一株高产木聚糖酶的菌株U6-5,菌体固态发酵产酶条件的研究表明,最佳发酵培养基配方为:麸皮50g、花生壳粉30g、玉米芯粉20g、NH4NO30.5g、水110ml,每克原料接种量为3.05×105个孢子,最适发酵温度28～30℃,在此培养条件下发酵26～28h,木聚糖酶酶活达到6105U/g。该木聚糖酶具有较高的耐热、耐储藏性能。     

碱性蛋白酶水解苜蓿叶蛋白制备寡肽最佳条件的研究

利用碱性蛋白酶水解苜蓿叶蛋白制备寡肽,以水解度表征其反应程度,确定了苜蓿叶蛋白的最佳水解条件:温度50℃,pH值9.0,底物浓度3%,酶活添加量4000U/g(净蛋白),水解时间2.0h。在此条件下,水解液的酸溶性肽得率和水解度分别为51.26%和27.50%,寡肽的平均肽链长度为3.64。     

功能性添加剂木寡糖的制备研究

提供1种以玉米芯为原料,采用高温蒸煮溶出玉米芯木聚糖,再利用内切型木聚糖酶酶解制备木寡糖的方法.所得终产物为以木二糖为主的木寡糖,总糖得率达到17%(按含36%木聚糖玉米芯计),可作为功能性饲料添加剂使用.     

不同酶浓度对脱脂豆粕水解效果影响的研究

本试验选用0、200、400、600、800、1000U/mL 6个浓度梯度的2709碱性蛋白酶水解脱脂豆粕,研究酶浓度对脱脂豆粕水解效果的影响。结果表明,随着酶浓度的增加,豆粕氮溶质数、酸溶性氮得率、豆粕蛋白水解度及水解液中氨基酸含量不断增大;豆粕蛋白得率呈显著降低趋势。综合各指标试验结果得出,利用2709碱性蛋白酶水解豆粕,适宜条件为pH9.8,酶浓度400U/mL,48.5℃,保温5h。     

枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis BS1发酵培养基的优化

为提高枯草芽孢杆菌BS1发酵液中芽孢含量,通过单因素试验、正交试验及回归正交组合试验优化其发酵培养基,最终确定培养基配方为:麦芽浸粉1 g/l、黄豆粉15 g/l、CaCO36.68 g/l、MnSO40.4 g/l、MgCl22 g/l,初始pH值7.0。使用该配方,在37℃、180 r/min条件下于恒温摇床中振荡培养48 h,枯草芽孢杆菌BS1菌株发酵液中芽孢含量可达8.55×1010cfu/ml。     

诱变选育木聚糖酶高产菌株及其发酵条件的研究

以黑曲霉(Aspergillus niger)XE6为出发菌株,经微波(MW)和硫酸二乙酯(DES)诱变处理,选育出一株遗传性状稳定的高产木聚糖酶菌株mAn1。利用单因素轮换法和正交试验法对菌株mAn1固态发酵产酶工艺进行了研究。结果表明:最适产酶条件为麸皮与玉米芯的添加比例6:4,硝酸铵2g,培养基起始pH值为4.5,固液比为1:1.8,500ml三角瓶中装培养基50g,30℃培养72h,在此条件下所产木聚糖酶的酶活为81151U/g,比出发菌株的酶活提高了34.88%。     

黑曲霉Asp-1发酵棕榈粕生产高β-甘露聚糖酶生物饲料

采用黑曲霉ASP-1,以麸皮和豆粕为辅助发酵料,料水比1:1.2,温度30℃,121℃灭菌30min,接种量按孢子量106个/g添加孢子悬浮液,对棕榈粕进行发酵。通过正交实验得出最佳发酵配方为:棕榈粕90%、麸皮8%、豆粕2%,;最佳发酵时间48h;发酵后能量值为18413J/g;还原糖含量为5.1%,水解完全;β-甘露聚糖酶可达205.7U/g。